$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
O principal objetivo da presente coleção é fornecer aos leitores conhecimento atualizado sobre a nova metodologia para estudar doenças vasculares em níveis de células, proteínas e mRNA, tanto in vivo quanto in vitro, em humanos ou em modelo de camundongo. Isso inclui novas modalidades de imagem e inteligência artificial, bem como análise histopatológica estendida a difíceis A coleção apresenta quatro métodos que respondem plenamente a essas perguntas, fornecendo pistas muito interessantes sobre como abordar questões antigas com uma perspectiva moderna e tecnológica, mostrando uma rápida evolução técnica nesse campo.
A lesão de isquemia-reperfusão (IRI) é um importante fator de risco para lesão renal aguda (LRA)2. Nenhum biomarcador diagnóstico específico foi estabelecido, embora os miRNAs sejam excelentes candidatos3. Aomatsu et al.4 desenvolveram um interessante modelo de camundongo com LRA, purificando e quantificando miRNAs por qRT-PCR. Eles identificaram 17 miRNAs regulados positivamente com LRA, induzidos por danos de isquemia-reperfusão. O método permite estudar o perfil de miRNAs em rins com LRA com faixa dinâmica, quantificação precisa e alta especificidade. Além disso, o modelo facilita a administração de medicamentos antes e depois do IRI. O protocolo também descreve ao leitor os pontos críticos a serem observados e as reações inespecíficas após a PCR. Alguns pontos-chave são a homogeneização, a seleção do controle endógeno e a qualidade dos miRNAs purificados. Este método é muito útil, pois fornece um modelo animal de LRA para o estudo de IRI no rim humano, o que provavelmente será viável para estudos posteriores além dos miRNAs.
Bauer et al.5 estabeleceram um método semiautomatizado para extração de DNA de uma pequena quantidade de placas ateroscleróticas fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE). Este é outro tópico interessante, pois é provável que forneça um método padronizado para estudar a patobiologia de um tecido muito difícil, como os ateromas difusamente calcificados1. Isso dificulta a recuperação tecidual, pois inclui o uso de protocolos de descalcificação que alteram os ácidos nucléicos e outros conteúdos celulares1. Os autores obtiveram maior concentração de DNA e melhor qualidade de DNA (estabilidade e reprodutibilidade) em comparação com dois métodos manuais baseados em colunas, sem diferenças significativas na fragmentação do DNA. Modificações importantes no protocolo incluem a etapa de incubação para desparafinização (menor toxicidade dos reagentes), digestão noturna da protease K, tempo de incubação adicional após a adição do tampão de lise a 65 °C e aumento do volume de eluição. O protocolo é certamente promissor para futuras análises de alto rendimento.
Suarez-Cuenca et al.6 apresentaram um protocolo para a quantificação de células progenitoras mononucleares (MPCs) circulantes de vasos próximos ao local da angioplastia, a fim de predizer o risco de amputação de membros em pacientes com isquemia crítica de membros (CLI). Este é outro tópico interessante, uma vez que o risco de amputação na CLI atualmente ainda é muito alto7, e há uma falta substancial de modelos preditivos disponíveis8. A possibilidade de identificar biomarcadores circulantes é muito promissora na prática clínica, oferecendo uma perspectiva viável para mudar a história e o manejo de pacientes com CLI.
Com o trabalho de Zoli et al.9, a técnica de imagem tractografia foi utilizada para investigar a extensão dos tumores hipofisário-diencefálicos e da base do crânio. A avaliação pré-operatória de neuroimagem é crucial antes da cirurgia baseada no crânio, e a tractografia raramente foi adotada na cirurgia da base do crânio até o momento devido a problemas técnicos10. Além da implementação do protocolo de ressonância magnética para o tratamento desses tumores, o objetivo dos autores também foi descrever a cooperação translacional entre os neurocirurgiões e a equipe de neuroimagem. Esta colaboração oferece um protocolo multidisciplinar para uma abordagem multiaxial integrada eficaz para esses pacientes. O protocolo implementado incluiu sequências rápidas (varreduras de codificação reversa de fase para imagens ponderadas por difusão) como uma nova abordagem para uma correção avançada de pós-processamento. Isso abre caminho para novas abordagens para o estudo pré-cirúrgico desses tumores difíceis.
As doenças ateromatosas vasculares ainda são um grande problema de saúde em todo o mundo, e novos métodos são cada vez mais necessários para estudar esses pacientes em diferentes níveis, desde imagens e sangue até tecidos. Esta coleção apresenta dicas para superar alguns problemas no estudo de doenças vasculares, compreendendo: (1) novos métodos para estudar o conteúdo de células de placa, proteínas e mRNA, (2) análise histopatológica estendida a difícil recuperação de tecidos (por exemplo, áreas calcificadas) e (3) a quantificação da angiogênese. Certamente, o desenvolvimento e a divulgação de novas abordagens relacionadas à análise de tecidos são pertinentes a uma vasta gama de patologias e potencialmente afetam as diretrizes clínicas para o diagnóstico em todos os níveis.