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Artigo de método

Análise de Amostras de Cyperi Rhizoma Cru e Processadas Usando Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massas em Tandem em Ratos com Dismenorreia Primária

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DOI:

10.3791/64691

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23 de dezembro de 2022

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Neste artigo

Resumo

Aqui, uma análise comparativa de amostras de Cyperi rhizoma (CR) cruas e processadas é apresentada usando cromatografia líquida de ultra-alta eficiência e espectrometria de massas em tandem de alta resolução (UPLC-MS/MS) em ratos com dismenorreia primária. As alterações nos níveis sanguíneos dos metabólitos e dos constituintes da amostra foram examinadas entre ratos tratados com CR e CR processados com vinagre (CRV).

Resumo

Cyperi rhizoma (CR) é amplamente utilizado em ginecologia e é um medicamento geral para o tratamento de doenças das mulheres na China. Uma vez que o efeito analgésico da RC é aumentado após o processamento com vinagre, a RC processada com vinagre (CRV) é geralmente usada clinicamente. No entanto, o mecanismo pelo qual o efeito analgésico é aumentado pelo processamento do vinagre não está claro. Neste estudo, a técnica de cromatografia líquida de ultra-alta pressão acoplada à espectrometria de massas (UPLC-MS/MS) foi usada para examinar as alterações nos níveis sanguíneos dos constituintes exógenos e metabólitos entre ratos com dismenorreia tratados com RC e tratados com CRV. Os resultados revelaram diferentes níveis de 15 constituintes e dois metabólitos no sangue desses ratos. Entre eles, os níveis de (-)-mirtenol e ácido [(1R,2S,3R,4R)-3-hidroxi-1,4,7,7-tetrametilbiciclo[2.2.1]hept-2-il]acético no grupo CRV foram consideravelmente maiores do que no grupo CR. O CRV reduziu o nível de prostanoides de 2 séries e leucotrienos de 4 séries com atividades pró-inflamatórias, de agregação plaquetária e vasoconstritoras e proporcionou efeitos analgésicos pela modulação do metabolismo do ácido araquidônico e do ácido linoleico e da biossíntese de ácidos graxos insaturados. Este estudo revelou que o processamento do vinagre aumenta o efeito analgésico da RC e contribui para o entendimento do mecanismo de ação do CRV.

Introdução

A dismenorreia primária (DP) é a condição mais prevalente na clínica ginecológica. Caracteriza-se por dor nas costas, inchaço, dor abdominal ou desconforto antes ou durante a menstruação, sem patologia pélvica no sistema reprodutivo1. Um relatório sobre sua prevalência mostrou que 85,7% dos estudantes sofrem de DP2. Os anticoncepcionais orais em baixas doses são a terapia padrão, mas seus efeitos adversos, como a trombose venosa profunda, têm chamado cada vez mais atenção3. A prevalência de trombose venosa profunda entre usuárias de anticoncepcional oral é de >1 por 1.000 mul....

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Protocolo

Todos os experimentos relacionados a animais foram conduzidos com aprovação do Comitê de Ética em Experimentos do Instituto Chongqing da MTC. Vinte e quatro ratas Sprague Dawley (SD) com 8-10 semanas de idade e pesando 200 g ± 20 g foram utilizadas neste experimento.

1. Preparação da extração

  1. Cálculo
    1. Planeie administrar o extracto de CR ou CRV a um grupo de tratamento de seis ratos Sprague-Dawley (10 g/[kg∙dia]) durante 3 dias. Use uma concentração de extrato CR ou CRV de 1 g/mL (1 mL do extrato é obtido a partir de 1 g de ervas).
      NOTA: A dosagem de CR é de 6-10 g. Neste estudo, a dose máxima de 10 g foi....

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Resultados

Análise do experimento do modelo de dismenorreia
Não houve resposta de contorção dentro de 30 minutos no grupo controle porque esses ratos não foram injetados intraperitonealmente com ocitocina e benzoato de estradiol para causar dor. Os ratos dos grupos modelo, RC e CRV apresentaram reações de contorção substanciais após a injeção de ocitocina. Esses resultados demonstram a eficácia da combinação de benzoato de estradiol e ocitocina na indução de dismenorreia. As diferenças nos níveis de PGF 2α, PGE .......

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Discussão

Devido à grande variedade e natureza diferente dos MTCs, essas ervas às vezes não funcionam na prática clínica, e isso pode ser devido ao processamento inadequado e decocting de MTCs. Os mecanismos da MTC estão se tornando mais evidentes com o uso da ciência e tecnologia contemporâneas29,30. Este estudo mostra que tanto a RC quanto a CRV têm efeitos terapêuticos em ratos modelo de DP e que o efeito terapêutico da CRV é mais substancial. O mecanismo de ação do CRV.......

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Divulgações

Os autores declaram não ter interesses financeiros concorrentes.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela Comissão Municipal de Saúde e Planejamento Familiar de Chongqing Projeto de Ciência e Tecnologia de Medicina Chinesa (Número do Projeto: ZY201802297), Projeto Geral da Fundação de Ciências Naturais de Chongqing (Número do Projeto: cstc2019jcyj-msxmX065), Chongqing Modern Mountain Area Characteristic High-efficiency Agricultural Technology System Innovation Team Building Plan 2022 [10] e Chongqing Municipal Health Commission Key Discipline Construction Project of Chinese Materia Processamento Médico.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Acetonitrila Fisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA197164
BECKMAN COULTER Microfuge 20Beckman  Coulter, Inc.
benzoato de estradiolShanghai Macklin Biochemical Co., LtdC10042616
ácido fórmicoFisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA177799
sistema LC 30AShimadzu, Kyoto, Japão228-45162-46
AzeiteShanghai Yuanye Biotechnology Co., LtdH25A11P111909
Ocitocina sintéticaZhejiang peptide biology Co., Ltd 
Rato PGF2α Kit ELISAShanghai lmai Bioengineering Co., Ltd202101
Rato PGFE2 Kit ELISAShanghai lmai Bioengineering Co., LtdEDL202006217
SPF Ratos Sprague-DawleyHunan SJA Laboratory Animal Co., LtdNúmero do certificado SCXK (Hunan) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO   Tecan Austria GmbH, Áustria1510002987
sistema triplo TOF 4600SCIEX, Framingham, MA, EUABK20641402
águaFisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA152720
MRZ15K0472019092001

Referências

  1. Yu, W. Y., et al. Acupuncture for primary dysmenorrhea: A potential mechanism from an anti-inflammatory perspective. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2021, 1907009(2021).
  2. Rafique, N., Al-Sheikh, M. H.

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Reimpressões e permissões

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