Análise de Amostras de Cyperi Rhizoma Cru e Processadas Usando Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massas em Tandem em Ratos com Dismenorreia Primária

Summary

Aqui, uma análise comparativa de amostras de Cyperi rhizoma (CR) cruas e processadas é apresentada usando cromatografia líquida de ultra-alta eficiência e espectrometria de massas em tandem de alta resolução (UPLC-MS/MS) em ratos com dismenorreia primária. As alterações nos níveis sanguíneos dos metabólitos e dos constituintes da amostra foram examinadas entre ratos tratados com CR e CR processados com vinagre (CRV).

Abstract

Cyperi rhizoma (CR) é amplamente utilizado em ginecologia e é um medicamento geral para o tratamento de doenças das mulheres na China. Uma vez que o efeito analgésico da RC é aumentado após o processamento com vinagre, a RC processada com vinagre (CRV) é geralmente usada clinicamente. No entanto, o mecanismo pelo qual o efeito analgésico é aumentado pelo processamento do vinagre não está claro. Neste estudo, a técnica de cromatografia líquida de ultra-alta pressão acoplada à espectrometria de massas (UPLC-MS/MS) foi usada para examinar as alterações nos níveis sanguíneos dos constituintes exógenos e metabólitos entre ratos com dismenorreia tratados com RC e tratados com CRV. Os resultados revelaram diferentes níveis de 15 constituintes e dois metabólitos no sangue desses ratos. Entre eles, os níveis de (-)-mirtenol e ácido [(1R,2S,3R,4R)-3-hidroxi-1,4,7,7-tetrametilbiciclo[2.2.1]hept-2-il]acético no grupo CRV foram consideravelmente maiores do que no grupo CR. O CRV reduziu o nível de prostanoides de 2 séries e leucotrienos de 4 séries com atividades pró-inflamatórias, de agregação plaquetária e vasoconstritoras e proporcionou efeitos analgésicos pela modulação do metabolismo do ácido araquidônico e do ácido linoleico e da biossíntese de ácidos graxos insaturados. Este estudo revelou que o processamento do vinagre aumenta o efeito analgésico da RC e contribui para o entendimento do mecanismo de ação do CRV.

Introduction

A dismenorreia primária (DP) é a condição mais prevalente na clínica ginecológica. Caracteriza-se por dor nas costas, inchaço, dor abdominal ou desconforto antes ou durante a menstruação, sem patologia pélvica no sistema reprodutivo¹. Um relatório sobre sua prevalência mostrou que 85,7% dos estudantes sofrem de DP². Os anticoncepcionais orais em baixas doses são a terapia padrão, mas seus efeitos adversos, como a trombose venosa profunda, têm chamado cada vez mais atenção³. A prevalência de trombose venosa profunda entre usuárias de anticoncepcional oral é de >1 por 1.000 mul....

Protocol

Todos os experimentos relacionados a animais foram conduzidos com aprovação do Comitê de Ética em Experimentos do Instituto Chongqing da MTC. Vinte e quatro ratas Sprague Dawley (SD) com 8-10 semanas de idade e pesando 200 g ± 20 g foram utilizadas neste experimento.

1. Preparação da extração

1. Cálculo
   1. Planeie administrar o extracto de CR ou CRV a um grupo de tratamento de seis ratos Sprague-Dawley (10 g/[kg∙dia]) durante 3 dias. Use uma concentração de extrato CR ou CRV de 1 g/mL (1 mL do extrato é obtido a partir de 1 g de ervas).
      NOTA: A dosagem de CR é de 6-10 g. Neste estudo, a dose máxima de 10 g foi....

Results

Análise do experimento do modelo de dismenorreia
Não houve resposta de contorção dentro de 30 minutos no grupo controle porque esses ratos não foram injetados intraperitonealmente com ocitocina e benzoato de estradiol para causar dor. Os ratos dos grupos modelo, RC e CRV apresentaram reações de contorção substanciais após a injeção de ocitocina. Esses resultados demonstram a eficácia da combinação de benzoato de estradiol e ocitocina na indução de dismenorreia. As diferenças nos níveis de PGF 2α, PGE .......

Discussion

Devido à grande variedade e natureza diferente dos MTCs, essas ervas às vezes não funcionam na prática clínica, e isso pode ser devido ao processamento inadequado e decocting de MTCs. Os mecanismos da MTC estão se tornando mais evidentes com o uso da ciência e tecnologia contemporâneas^29,30. Este estudo mostra que tanto a RC quanto a CRV têm efeitos terapêuticos em ratos modelo de DP e que o efeito terapêutico da CRV é mais substancial. O mecanismo de ação do CRV.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrila	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA	197164
BECKMAN COULTER Microfuge 20	Beckman  Coulter, Inc.
benzoato de estradiol	Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd	C10042616
ácido fórmico	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA	177799
sistema LC 30A	Shimadzu, Kyoto, Japão	228-45162-46
Azeite	Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd	H25A11P111909
Ocitocina sintética	Zhejiang peptide biology Co., Ltd
Rato PGF2α Kit ELISA	Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd	202101
Rato PGFE2 Kit ELISA	Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd	EDL202006217
SPF Ratos Sprague-Dawley	Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd	Número do certificado SCXK (Hunan) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO	Tecan Austria GmbH, Áustria	1510002987
sistema triplo TOF 4600	SCIEX, Framingham, MA, EUA	BK20641402
água	Fisher Scientific, Pittsburg, PA, EUA	152720