Indução de estenose uretral seguida de uretroplastia de enxerto de mucosa bucal em modelo de rato

Summary

No presente protocolo, foi desenvolvida indução de estenose uretral em ratos Wistar, seguida de reconstrução uretral com enxerto de mucosa bucal. Foi realizado uretrograma retrógrado e avaliação com laser Doppler, validando a reconstrução uretral (após a formação de estenose) e a colocação do enxerto.

Abstract

A reconstrução uretral é uma importante área de atuação dos urologistas. A mucosa bucal é considerada a melhor opção quando o enxerto uretral é necessário, embora, em alguns casos, seja inadequado ou precise ser otimizado para reparar uma determinada estenose. Portanto, desenvolver procedimentos inovadores e avaliar seu suposto sucesso em modelos experimentais é crucial para atender à necessidade clínica. Com esse objetivo, este estudo descreve um protocolo no qual a estenose uretral foi induzida por eletrocautério em ratos Wistar. A reconstrução uretral foi realizada 1 semana após com enxerto de mucosa bucal, retirado do lábio inferior e colocado de forma onlay ventral. O uretrograma retrógrado mostrou melhora significativa do diâmetro uretral após a uretroplastia em relação ao respectivo valor após a indução da estenose. Além disso, a colocação do enxerto foi avaliada pela análise da perfusão sanguínea com laser Doppler. Como esperado, uma área azul-escura correspondeu ao enxerto de mucosa bucal não vascularizado. Este procedimento pode simular com sucesso o processo fisiopatológico normal da lesão uretral e modulação tecidual, bem como a reconstrução uretral utilizando enxerto de mucosa bucal de forma reprodutível, e servir de base para futuras pesquisas baseadas em engenharia tecidual ou enxertos uretrais.

Introduction

A reconstrução uretral é um grande desafio para os cirurgiões urológicos no manejo da lesão uretral no contexto de estenoses, traumas ou defeitos congênitos¹. Com intenção curativa, a uretroplastia é o tratamento de escolha para a maioria dos pacientes, com defeitos uretrais longos (>2 cm) e anteriores que requerem alguma forma de uretroplastia de substituição². Muitos tecidos têm sido usados como substitutos uretrais, incluindo enxertos de pele de espessura total ou dividida de áreas genitais ou extragenitais, mucosa da parede vesical ou mucosa bucal disseminada². Os enxertos de mucosa bucal apre....

Protocol

Todos os procedimentos com animais foram realizados de acordo com a Diretiva 2010/63/UE. Os procedimentos foram aprovados pelo Organismo de Bem-Estar Animal institucional, licenciado pela DGAV, a autoridade portuguesa competente para a proteção animal (licença n.º 0421/000/000/2021). Ratos machos Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) (400-500 g) com 12-14 semanas de idade foram utilizados para o presente estudo. Os animais foram obtidos de fonte comercial (ver Tabela de Materiais).

1. Preparação das soluções

1. Solução anestésica
   1. Encher uma seringa de 3 mL com 2,3 mL de medetomidina (1 mg/mL; 0,715 mg/k....

Results

Um total de 12 ratos Wistar machos, pesando 400-500 g e 12-14 semanas de idade, foram utilizados para indução de estenose uretral. Um uretrograma retrógrado (RUG1) foi realizado 1 semana após⁸, confirmando o sucesso da técnica. O diâmetro uretral foi medido em milímetros ao nível da indução da estenose. Em seguida, foi realizada uretroplastia com enxerto de mucosa bucal na face ventral da uretra de ratos. Os mesmos ratos foram submetidos a um segundo uretrograma retrógrado (RUG2) 14 dias após a ur.......

Discussion

A uretroplastia com enxertos de mucosa bucal é um dos principais pilares da reconstrução uretral. No entanto, procedimentos inovadores devem ser desenvolvidos para otimizar os já descritos e estabelecer novos, como materiais de engenharia tecidual e enxertos biológicos, para reduzir complicações e morbidade. Vários procedimentos têm sido publicados para estabelecer modelos pré-clínicos e definir técnicas cirúrgicas. Souza et ^al.1 realizaram um estudo com 12 coelhos da raça Nova Zelândia. Uma incis.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Atipamezole	OrionPharma		ANTISEDAN (atipamezol) é indicado para reverter os efeitos sedativos e analgésicos.
Buprenorfina	RichterPharma		A buprenorfina é um derivado do alcaloide tebaína opioide, que é um analgésico mais potente (25-40 vezes) e de maior duração do que a morfina.
Carl Zeiss Opmi-1 FC Microscópio Estereoscópico Cirúrgico	Microscopia Carl Zeiss, Alemanha		OPMI 1 FC da ZEISS simboliza qualidade, precisão e confiabilidade. O sistema manual é fácil de usar e entrega imagens de alta fidelidade com a lendária óptica ZEISS.
Carprofeno	Zoetis		O carprofeno é um anti-inflamatório não esteroide (AINE) da classe do ácido propiônico.
Cateter 22 G. x 1''	B Braun	Segurança Introcan	Cateter IV de etileno propileno fluorado (FEP) com construção mais firme para acesso arterial.
Enrofloxacina	Bayer		Enrofloxacina é um antibiótico fluoroquinolona.
Fentanil	Braun	3644960	O fentanil é um potente analgésico opioide sintético.
Flumazenil	Fresenius Kabi		O antagonista benzodiazepino é usado para a reversão total ou parcial dos efeitos sedativos causados pelas benzodiazepinas.
Cauterização de alta temperatura	Fiab	F7244	Cauterização descartável, estéril, alta temperatura (1200 °C; C), ponta fina de 28 mm.
Gel Instillagel	Farco-farmacêutica		Lubrificante à base de celulose com propriedades anestésicas locais e desinfetantes.
Iopromida	Bayer		Meio contrastante injetável não iônico, com iodo.
Sistema de imagem Doppler a laser (imager de perfusão moorLDI2-HIR e software dedicado)	MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, Reino Unido	5710	Os modelos de angiogênese utilizam imagem Doppler a laser para avaliar a perfusão sanguínea nos membros posteriores, sendo que um deles é ligado cirurgicamente. Software dedicado de medição e comparação permite definir regiões de interesse para avaliação do fluxo sanguíneo no membro isquêmico versus não isquêmico, estabelecendo uma "razão de reperfusão" que pode ser avaliada quantas vezes e ao longo de vários dias no mesmo sujeito.
Gel Lubrithal para Olhos	Dechra		Gel para os olhos usado em animais para prevenção de olhos secos durante anestesia. Ação lubrificante e hidratante na córnea e conjuntiva.
Ratos Wistar Han Machos IGS (Crl:WI(Han))	Laboratórios Charles River, Espanha		De doze a quatorze semanas
Metedomidina	Virbac	037/01/07RFVPT	Medetomidina é um medicamento sintético usado como anestésico cirúrgico.
Midazolam	Labesfal		A medicação benzodiazepina é usada para anestesia e sedação procedimental.
Sistema de Angiografia Monoplan	Philips Medical Systems	Azurion 7 M20	Um sistema fixo de raios-x fluoroscópico diagnóstico, projetado especificamente para otimizar a capacidade dos usuários de avaliar visual e quantitativamente a anatomia e a função dos vasos sanguíneos do coração, cérebro e outros órgãos, bem como do sistema linfático.
Pinças para mosquitos	Henry Schein	102-4346	Pinça Hemostática Hartman-Mosquito de aço inoxidável curva de 3-1/2"
Suporte de agulha	Henry Schein	100-2570	Suporte de agulhas Mayo-Hegar, aço inoxidável, 14 cm
Suporte de Agulha Ophtalmic	Asico	AE-6143	Suporte de agulha barranquer mais delicado sem trava
Sódio Pentobarbital	Ecuphar		O sódio pentobarbital é o sal de sódio do pentobarbital usado para a eutanásia.
Pinça Pontiaguda	Esculapa	BD335R	Microfórceps, ponta de 0,30 mm
Polysorb 6.0	Medtronic (Covidien)	UL-101	Sutura Sintética Absorvível Revestida tinha como objetivo reduzir a reação inflamatória nos tecidos, seguida por encapsulamento gradual da sutura pelo tecido conjuntivo fibroso.
Providona-Iodo	Mylan		Povidona-iodo 10% é um medicamento antisséptico, usado como desinfetante antes e após a cirurgia.
Lâmina de Bisturi nº 11	B Braun	BB511	Aço carbono, estéril
Tesoura de Mola	Henry Schein	600-4826	Tesoura cirúrgica 31 castroviejo
Pinças cirúrgicas	Esculapa	BD33R	Microfórceps, ponta de 0,20mm
Tesoura Cirúrgica	Esculapa	MA873R	Tesoura Micro Iris, pontas curvas de estilhaços
SurgiPro 7.0	Medtronic (Coviden)	VP-702-X	Sutura de Polipropileno Monofilamento Não Absorvível indicada para uso em ligadura geral de tecidos moles.