Neste protocolo, a tecnologia de processamento de óleo de carneiro de Epimedii folium (EF) foi otimizada pela aplicação de uma metodologia experimental de superfície de resposta e delineamento Box-Behnken, e o efeito da FE bruta e otimizada extraída em água sobre o desenvolvimento embrionário do zebrafish foi preliminarmente investigado.
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Artigo de método
Otimização da tecnologia de processamento de óleo de carneiro Epimedii folium e teste de seu efeito no desenvolvimento embrionário do peixe-zebra
Neste artigo
Resumo
Resumo
Como uma medicina tradicional chinesa (MTC), Epimedii folium (EF) tem uma história na medicina e alimentos que é > 2.000 anos de idade. Clinicamente, EF processado com óleo de carneiro é frequentemente usado como um medicamento. Nos últimos anos, os relatos de riscos à segurança e reações adversas de produtos que utilizam EF como matéria-prima têm aumentado gradualmente. O processamento pode efetivamente melhorar a segurança da MTC. De acordo com a teoria TCM, o processamento de óleo de carneiro pode reduzir a toxicidade da FE e aumentar seu efeito tonificante nos rins. No entanto, há uma falta de pesquisa sistemática e avaliação da tecnologia de processamento de óleo de carneiro EF. Neste estudo, utilizou-se a metodologia experimental de superfície-resposta de Box-Behnken para otimizar os parâmetros-chave da tecnologia de processamento, avaliando o conteúdo de múltiplos componentes. Os resultados mostraram que a tecnologia ótima de processamento de óleo de carneiro da EF foi a seguinte: aquecer o óleo de carneiro a 120 °C ± 10 °C, adicionar o EF bruto, fritá-lo suavemente a 189 °C ± 10 °C até que esteja uniformemente brilhante e, em seguida, removê-lo e esfriar. Para cada 100 kg de EF, 15 kg de óleo de carneiro devem ser usados. As toxicidades e teratogenicidades de um extrato aquoso de FE processado em óleo bruto e óleo de carneiro foram comparadas em um modelo de desenvolvimento de embriões de peixe-zebra. Os resultados mostraram que o grupo de ervas brutas foi mais propenso a causar deformidades em peixe-zebra, e sua concentração de FE letal metade-máxima foi menor. Em conclusão, a tecnologia otimizada de processamento de óleo de carneiro mostrou-se estável e confiável, com boa repetibilidade. Em uma determinada dose, o extrato aquoso de EF foi tóxico para o desenvolvimento de embriões de peixe-zebra, e a toxicidade foi mais forte para a droga bruta do que para a droga processada. Os resultados mostraram que o processamento de óleo de carneiro reduziu a toxicidade da FE bruta. Esses achados podem ser usados para melhorar a qualidade, uniformidade e segurança clínica da FE processada com óleo de carneiro.
Introdução
Epimedii folium (EF) é a folha seca de Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., ou Epimedium koreanum Nakai. A FE pode ser usada para tratar osteoporose, síndrome menopausal, nódulos mamários, hipertensão, doença coronariana e outras doenças1. Como uma medicina tradicional chinesa (MTC), EF tem uma história na medicina e alimentação de mais de 2.000 anos. Devido ao seu baixo preço e notável efeito de tonificar os rins, é amplamente utilizado em medicamentos e alimentos saudáveis. EF é processado por meio de fritura com óleo de carneiro, um processo....
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Protocolo
Todos os experimentos relacionados a animais foram conduzidos com aprovação do Comitê de Ética em Experimentos do Instituto Chongqing de TCM (número do certificado de revisão ética em animais de laboratório: ZJS2022-03).
1. Determinação dos componentes bioativos
NOTA: A espécie utilizada nesta pesquisa foi Epimedium sagittatum, e as amostras foram coletadas no Condado de Fengdu, Chongqing. A amostra foi identificada como uma parte seca acima do solo de E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) Máxima. por pesquisadores do Instituto de Medicina Biológica, Instituto Chongqing de Medicina Tradi....
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Resultados
Resultados da investigação metodológica
Foi observada uma relação linear entre a concentração de icariin, EA, EB, EC, BI e áreas cromatográficas dos picos (ver Tabela 3). Os valores de RSD% (n = 6) das áreas cromatográficas dos picos de icariin, EA, EB, EC e BI foram 0,28%, 1,22%, 0,65%, 1,67% e 1,06%, respectivamente, indicando que a precisão das medidas por CLAE foi boa. Os valores de RSD% (n = 6) dos teores de icariin, EA, EB, EC e BI foram 1,59%, 1,46%, 1,86%, 2,29% e 0,98%, respe.......
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Discussão
Variáveis independentes e determinação de seus níveis
A tecnologia de processamento EF só é descrita na edição de 2020 da Farmacopeia Chinesa e nas especificações locais de processamento de medicamentos chineses publicadas por 26 províncias, municípios e regiões autônomas em todo o país1. A descrição envolve os seguintes passos: pegar óleo de carneiro e aquecê-lo para derreter, adicionar pedaços de EF, fritar com fogo lento até que fique uniforme e brilhante, retirá-lo e deixá-.......
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Divulgações
Os autores declaram não haver conflitos de interesse.
Agradecimentos
Este trabalho é apoiado pelo Projeto de Negócios de Pesquisa Científica Básica da Academia de Medicina Tradicional Chinesa de Chongqing (Número do Projeto: jbky20200013), pelo Projeto de Orientação de Incentivo ao Desempenho das Instituições de Pesquisa Científica de Chongqing (Número do Projeto: cstc2021jxjl 130025) e pelo Projeto de Construção da Disciplina-Chave da Comissão Municipal de Saúde de Chongqing do Processamento de Matéria Médica Chinesa.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Acetonitrila | Fisher | 197164 | |
Baohuoside  (B ) | Fornecedor verificado - Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd. | MUST-20042402 | |
| Coluna cromatográfica | Waters Corporation | Simetria C18 | |
| Design Software especializado | Stat-Ease Inc., Minneapolis, MN | Versão de teste8.0.6.1 | |
| Detector | Waters Corporation | 2998 | |
| Desintegrador | Hefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd. | S-FS553 | |
| Balança analítica eletrônica | Mettler-Toledo International Inc. | ||
| Epimedin A (EA) | Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd. | MUST-21112118 | |
| Epimedin B (EB) | Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd. | MUST-20080403 | |
| Epimedin C (EC) | Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd. | MUST-20080310 | |
| Etanol | Chongqing Chuandong Chemical (Grupo) Co., Ltd. | ||
| Software | GraphPad GraphPad Software Inc., San Diego, CA, EUA | 6.02 | |
| Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) | Waters Corporation | 2695 | |
| Icariin | Chengdu Glip Biotechnology Co., Ltd. | ||
| Metanol | Chongqing Chuandong Chemical (Group) Co., Ltd. | ||
| Membrana microporosa | Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd. | 0.22μ m | |
| Óleo de carneiro | Kuoshan Zhiniu Fresh Food Store | 20211106 | |
| Office Excel software de escritório | Microsoft | Office Excel 2021 | |
| Peneira da farmacopeia | Shaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd. | R40/3 | |
| Máquina de água pura | Chongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd. | NO Sro 10A | |
| Papel de filtro qualitativo | Shanghai Leigu Instrument Co., Ltd. | de 18cm | |
| , Oberkochen, Alemanha | de Stemi 2000 | ||
| Branson Ultrasonics (Shanghai) Co.,Ltd. | BUG25-12 | ||
| Peixe-zebra | China Centro de Recursos de Peixe-Zebra (CZRC) | A cepa |
Referências
- Chinese Pharmacopoeia Commission. Chinese Pharmacopoeia. Volume I. , China Medical Science and Technology Press. Beijing, China. (2020).
- Wang, X. T. Collection of Traditional Chinese Medicine Processing Methods. , Nanchang Science and Technology Press. Jiangxi, China. (1998).
- Chen, L. L., Jia, X. B., Jia, D. S.
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Reimpressões e permissões
