Method Article

Otimização da tecnologia de processamento de óleo de carneiro Epimedii folium e teste de seu efeito no desenvolvimento embrionário do peixe-zebra

DOI:

10.3791/65096

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March 17th, 2023

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1Chongqing Academy of Chinese Materia Medica, 2Bioengineering College of Chongqing University

In This Article

Summary

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Neste protocolo, a tecnologia de processamento de óleo de carneiro de Epimedii folium (EF) foi otimizada pela aplicação de uma metodologia experimental de superfície de resposta e delineamento Box-Behnken, e o efeito da FE bruta e otimizada extraída em água sobre o desenvolvimento embrionário do zebrafish foi preliminarmente investigado.

Abstract

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Como uma medicina tradicional chinesa (MTC), Epimedii folium (EF) tem uma história na medicina e alimentos que é > 2.000 anos de idade. Clinicamente, EF processado com óleo de carneiro é frequentemente usado como um medicamento. Nos últimos anos, os relatos de riscos à segurança e reações adversas de produtos que utilizam EF como matéria-prima têm aumentado gradualmente. O processamento pode efetivamente melhorar a segurança da MTC. De acordo com a teoria TCM, o processamento de óleo de carneiro pode reduzir a toxicidade da FE e aumentar seu efeito tonificante nos rins. No entanto, há uma falta de pesquisa sistemática e avaliação da tecnologia de processamento de óleo de carneiro EF. Neste estudo, utilizou-se a metodologia experimental de superfície-resposta de Box-Behnken para otimizar os parâmetros-chave da tecnologia de processamento, avaliando o conteúdo de múltiplos componentes. Os resultados mostraram que a tecnologia ótima de processamento de óleo de carneiro da EF foi a seguinte: aquecer o óleo de carneiro a 120 °C ± 10 °C, adicionar o EF bruto, fritá-lo suavemente a 189 °C ± 10 °C até que esteja uniformemente brilhante e, em seguida, removê-lo e esfriar. Para cada 100 kg de EF, 15 kg de óleo de carneiro devem ser usados. As toxicidades e teratogenicidades de um extrato aquoso de FE processado em óleo bruto e óleo de carneiro foram comparadas em um modelo de desenvolvimento de embriões de peixe-zebra. Os resultados mostraram que o grupo de ervas brutas foi mais propenso a causar deformidades em peixe-zebra, e sua concentração de FE letal metade-máxima foi menor. Em conclusão, a tecnologia otimizada de processamento de óleo de carneiro mostrou-se estável e confiável, com boa repetibilidade. Em uma determinada dose, o extrato aquoso de EF foi tóxico para o desenvolvimento de embriões de peixe-zebra, e a toxicidade foi mais forte para a droga bruta do que para a droga processada. Os resultados mostraram que o processamento de óleo de carneiro reduziu a toxicidade da FE bruta. Esses achados podem ser usados para melhorar a qualidade, uniformidade e segurança clínica da FE processada com óleo de carneiro.

Introduction

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Epimedii folium (EF) é a folha seca de Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., ou Epimedium koreanum Nakai. A FE pode ser usada para tratar osteoporose, síndrome menopausal, nódulos mamários, hipertensão, doença coronariana e outras doenças1. Como uma medicina tradicional chinesa (MTC), EF tem uma história na medicina e alimentação de mais de 2.000 anos. Devido ao seu baixo preço e notável efeito de tonificar os rins, é amplamente utilizado em medicamentos e alimentos saudáveis. EF é processado por meio de fritura com óleo de carneiro, um processo....

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Protocol

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Todos os experimentos relacionados a animais foram conduzidos com aprovação do Comitê de Ética em Experimentos do Instituto Chongqing de TCM (número do certificado de revisão ética em animais de laboratório: ZJS2022-03).

1. Determinação dos componentes bioativos

NOTA: A espécie utilizada nesta pesquisa foi Epimedium sagittatum, e as amostras foram coletadas no Condado de Fengdu, Chongqing. A amostra foi identificada como uma parte seca acima do solo de E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) Máxima. por pesquisadores do Instituto de Medicina Biológica, Instituto Chongqing de Medicina Tradi....

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Results

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Resultados da investigação metodológica
Foi observada uma relação linear entre a concentração de icariin, EA, EB, EC, BI e áreas cromatográficas dos picos (ver Tabela 3). Os valores de RSD% (n = 6) das áreas cromatográficas dos picos de icariin, EA, EB, EC e BI foram 0,28%, 1,22%, 0,65%, 1,67% e 1,06%, respectivamente, indicando que a precisão das medidas por CLAE foi boa. Os valores de RSD% (n = 6) dos teores de icariin, EA, EB, EC e BI foram 1,59%, 1,46%, 1,86%, 2,29% e 0,98%, respe.......

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Discussion

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Variáveis independentes e determinação de seus níveis
A tecnologia de processamento EF só é descrita na edição de 2020 da Farmacopeia Chinesa e nas especificações locais de processamento de medicamentos chineses publicadas por 26 províncias, municípios e regiões autônomas em todo o país1. A descrição envolve os seguintes passos: pegar óleo de carneiro e aquecê-lo para derreter, adicionar pedaços de EF, fritar com fogo lento até que fique uniforme e brilhante, retirá-lo e deixá-.......

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Disclosures

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Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Acknowledgements

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Este trabalho é apoiado pelo Projeto de Negócios de Pesquisa Científica Básica da Academia de Medicina Tradicional Chinesa de Chongqing (Número do Projeto: jbky20200013), pelo Projeto de Orientação de Incentivo ao Desempenho das Instituições de Pesquisa Científica de Chongqing (Número do Projeto: cstc2021jxjl 130025) e pelo Projeto de Construção da Disciplina-Chave da Comissão Municipal de Saúde de Chongqing do Processamento de Matéria Médica Chinesa.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitrilaFisher197164
Baohuoside figure-materials-1 (Bfigure-materials-2 ) Fornecedor verificado - Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20042402
Coluna cromatográficaWaters CorporationSimetria C18
Design Software especializadoStat-Ease Inc., Minneapolis, MNVersão de teste8.0.6.1
DetectorWaters Corporation2998
DesintegradorHefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.S-FS553
Balança analítica eletrônicaMettler-Toledo International Inc.
Epimedin A (EA)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-21112118
Epimedin B (EB)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080403
Epimedin C (EC)Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.MUST-20080310
EtanolChongqing Chuandong Chemical (Grupo) Co., Ltd.
SoftwareGraphPad GraphPad Software Inc., San Diego, CA, EUA6.02
Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC)Waters Corporation2695
IcariinChengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.
MetanolChongqing Chuandong Chemical (Group) Co., Ltd.
Membrana microporosaTianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd.0.22μ m
Óleo de carneiroKuoshan Zhiniu Fresh Food Store20211106
Office Excel software de escritórioMicrosoftOffice Excel 2021
Peneira da farmacopeiaShaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.R40/3
Máquina de água puraChongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd.NO Sro 10A
Papel de filtro qualitativoShanghai Leigu Instrument Co., Ltd.de 18cm
, Oberkochen, Alemanhade Stemi 2000
Branson Ultrasonics (Shanghai) Co.,Ltd.BUG25-12
Peixe-zebraChina Centro de Recursos de Peixe-Zebra (CZRC)A cepa
MS205DU201808012109140120171101Estereomicroscópio Carl Zeiss Limpador ultrassônico AB

References

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  1. Chinese Pharmacopoeia Commission. Chinese Pharmacopoeia. Volume I. , China Medical Science and Technology Press. Beijing, China. (2020).
  2. Wang, X. T. Collection of Traditional Chinese Medicine Processing Methods. , Nanchang Science and Technology Press. Jiangxi, China. (1998).
  3. Chen, L. L., Jia, X. B., Jia, D. S.

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