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Artigo de método

Um modelo de orelha de camundongo para avaliação de dermatite alérgica de contato

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DOI:

10.3791/65120

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24 de março de 2023

Neste artigo

Resumo

Aqui, descrevemos os métodos de indução de dermatite alérgica de contato em orelhas de camundongos pelo 1-fluoro-2,4-dinitrobenzeno (DNFB) e como avaliar a gravidade da dermatite alérgica de contato.

Resumo

A pele é a primeira linha de defesa do corpo humano e um dos órgãos mais expostos aos produtos químicos ambientais. A dermatite alérgica de contato (DCA) é uma doença de pele comum que se manifesta como erupção cutânea local, vermelhidão e lesões cutâneas. A ocorrência e o desenvolvimento da DCA são influenciados por fatores genéticos e ambientais. Embora muitos estudiosos tenham construído uma série de modelos de DCA nos últimos anos, os protocolos experimentais desses modelos são todos diferentes, o que torna difícil para os leitores estabelecê-los bem. Portanto, um modelo animal estável e eficiente é de grande importância para aprofundar o estudo da patogênese da dermatite atópica. Neste estudo, detalhamos um método de modelagem usando 1-fluoro-2,4-dinitrobenzeno (DNFB) para induzir sintomas semelhantes aos da DAC em orelhas de camundongos e descrevemos vários métodos para avaliar a gravidade da dermatite durante a modelagem. Este protocolo experimental tem sido aplicado com sucesso em alguns experimentos e tem um certo papel promocional no campo da pesquisa em DCA.

Introdução

A dermatite alérgica de contato (DCA) é uma doença cutânea comum que se caracteriza por sintomas semelhantes aos eczemas no local de contato, edema e eritema em casos moderados, e pápulas, erosão, exsudação ou mesmo cicatrizes maciças em casos graves1. Acomete até 20% da população e pode acometer pessoas de qualquer idade2. A DCA ocorre frequentemente em indivíduos que foram expostos a alérgenos repetidamente e pode ser causada pela resposta imune do indivíduo a um ou mais alérgenos em sua casa ou local de trabalho3. A hipersensibilidade tardia tipo IV é considerada o princip....

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Protocolo

Todos os cuidados e tratamento dos camundongos estavam de acordo com as diretrizes estabelecidas pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Yangzhou e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais sob a licença de projeto SYXK(SU)2022-0044. Camundongos BALB/c machos e fêmeas com idade entre 6-8 semanas foram usados neste estudo. Cada grupo consistiu de seis camundongos (ver Tabela de Materiais). As gaiolas foram colocadas em câmara com temperatura controlada (22 ± 2 °C, ciclo claro/escuro de 12 h) com livre acesso a água e ração. Um fluxograma experimental é mostrado na Figur....

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Resultados

Sob estimulação repetida com DNFB, as orelhas de camundongos do grupo DNFB apresentaram sintomas clínicos evidentes comparáveis aos da DAC, com áreas sensíveis apresentando os sintomas típicos de vermelhidão, ressecamento e até erosão e exsudação. Entretanto, a administração auricular de água pura (grupo controle) ou solvente controle (grupo veículo) não produziu sintomas semelhantes (Figura 4).

Já no grupo DNFB, comparado à orelha direita não tratada, a espessura.......

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Discussão

O protocolo aqui descrito para indução de sintomas semelhantes aos da DAC em orelhas de camundongos pode ser utilizado para estudar a fisiopatologia da DAC e como ferramenta de triagem para o desenvolvimento de novas drogas.

Existem dois passos fundamentais para estabelecer um modelo de DCA: sensibilização inicial e estimulação subsequente. O abdome é geralmente o local de sensibilização inicial, mas o local de estimulação subsequente foi escolhido de forma ligeiramente diferente. Estudos prév.......

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Divulgações

Os autores declaram não haver conflitos de interesse neste trabalho.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela National Natural Science Foundation of China (NSFC) para N.-N. Y. (81904212); Projeto de Ciência e Tecnologia da Medicina Tradicional Chinesa de Jiangsu (YB201995); e o Projeto de Financiamento Especial para Pesquisadores de Pós-Doutorado na China (2020T130562).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
1-Fluoro-2,4-dinitrobenzeno (DNFB)Merck200-734-31-Fluoro-2,4-dinitrobenzeno, ≥ 99%
AcetonaSinopharm Reagente Químico Co. LTD10000418≥ 99,5%
Folha de alumínio CleanwrapCF-2
Evans corante azulSolarbio314-13-6Conteúdo de corante aprox. 80%
Fixador de mouseZHUYANBANGGEGD-SM1830
AzeiteSolarbio8001-25-0500 ml
Ponta de pipetaBiofountFT-20010 - 200 μ l
PipetadorEppendorf AG312300025020 - 200 μ l
Lâminas de barbearShanghai Gillette Co. LTD74-S
Vernier pinçasDelixi ElectricDECHOTVCS1200

Referências

  1. Neale, H., Garza-Mayers, A. C., Tam, I., Yu, J. Pediatric allergic contact dermatitis. Part I: Clinical features and common contact allergens in children. Journal of the American Academy of Dermatology. 84 (2), 235-244 (2021).
  2. Koppes, S. A., et al.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Indução por DNFBModelo AnimalMedição do Inchaço da OrelhaCorante Azul de EvansEspessura do Pavilhão AuricularInchaço InflamatórioÍndice EsplênicoAvaliação Pré-clínica