Delineando o fenótipo metabólico de células renais derivadas de biópsia

Masataka Kawamura; Catherine Parmentier; Lisa A. Robinson; Markus Selzner; Caitriona M. McEvoy; Julia M. Murphy; Maya G. Bozzo-Rey; Sarah Q. Crome; Ana Konvalinka; Sergi Clotet-Freixas

doi:10.3791/65457

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Artigo de método

Delineando o fenótipo metabólico de células renais derivadas de biópsia

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DOI:

10.3791/65457

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17 de junho de 2025

Masataka Kawamura¹^,²^,³ , Catherine Parmentier¹^,³ , Lisa A. Robinson²^,⁴^,⁵ , Markus Selzner¹^,³ , Caitriona M. McEvoy⁶^,⁷^,⁸ , Julia M. Murphy¹^,⁶^,⁹ , Maya G. Bozzo-Rey¹⁰ , Sarah Q. Crome¹^,⁶^,⁹ , Ana Konvalinka¹^,⁴^,⁶^,¹¹^,¹² , Sergi Clotet-Freixas¹⁰

¹Soham and Shaila Ajmera Family Transplant Centre, University Health Network, ²Division of Nephrology, The Hospital for Sick Children, ³Division of General Surgery, University Health Network, ⁴Institute of Medical Science, University of Toronto, ⁵Program in Cell Biology, The Hospital for Sick Children Research Institute, ⁶Toronto General Hospital Research Institute, University Health Network, ⁷Division of Nephrology, Tallaght University Hospital, ⁸Trinity Kidney Centre, Trinity College Dublin, ⁹Department of Immunology, University of Toronto, ¹⁰Division of Nephrology, McMaster University and St. Joseph's Healthcare, ¹¹Division of Nephrology, Department of Medicine, University Health Network, ¹²Department of Laboratory Medicine and Pathobiology, University of Toronto

Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve um método único para conduzir o perfil metabólico de células renais derivadas de biópsia. A abordagem apresentada foi otimizada em suínos machos adultos saudáveis e tem o potencial de melhorar a avaliação em tempo real da viabilidade do aloenxerto renal. Este método também pode ajudar a descobrir uma nova biologia em várias doenças renais baseadas no metabolismo.

Resumo

O transplante renal é o tratamento ideal para a doença renal terminal; no entanto, os rins transplantados são frequentemente perdidos prematuramente, com até 50% de perda do enxerto 10 anos após o transplante. Uma das principais causas de perda prematura do enxerto é a lesão sofrida pelo enxerto no momento do transplante, conhecida como lesão de isquemia-reperfusão (IRI). A função tardia do enxerto (FTE), definida como a necessidade de diálise na primeira semana pós-transplante, é uma manifestação de IRI grave que mostra características funcionais e histológicas de lesão renal aguda (LRA). Embora os mecanismos que impulsionam a LRA permaneçam obscuros, evidências acumuladas sugerem que a função metabólica alterada no aloenxerto medeia a LRA e pode ser a razão para a FTE. Assim, decifrar e monitorar os fundamentos metabólicos da IRI melhorará nossa capacidade de diagnosticar e prevenir a LRA. Este artigo descreve um método único para avaliar a respiração mitocondrial (por meio da taxa de consumo de oxigênio), glicólise (taxa de acidificação extracelular) e níveis intracelulares de ATP em suspensões de células renais derivadas de biópsia por agulha. A metodologia foi otimizada em suínos machos adultos saudáveis e validada em um modelo suíno de autotransplante. A abordagem apresentada tem o potencial de melhorar a avaliação em tempo real da viabilidade do enxerto renal na clínica. O perfil do metabolismo em biópsias derivadas de pacientes também pode descobrir uma nova biologia em outras doenças renais baseadas no metabolismo.

Introdução

O transplante renal é o tratamento ideal para a doença renal terminal 1,2,3,4; no entanto, os rins transplantados são frequentemente perdidos prematuramente, com até 50% de perda do enxerto em 10 anos após o^{transplante 5}. Os pacientes afetados têm maior morbidade e mortalidade e representam um grande fardo econômico para os sistemas de saúde⁶. Uma das principais causas de perda prematura do enxerto é a lesão sofrida pelo enxerto no momento do transplante, conhe....