Este estudo apresenta um modelo cirúrgico porcino de isquemia miocárdica crônica por estenose progressiva da artéria coronária, resultando em comprometimento da função cardíaca sem infarto. Após a isquemia, os animais são submetidos à cirurgia de revascularização do miocárdio sem circulação extracorpórea com colocação epicárdica de adesivo carregado de exossomos derivado de células-tronco. Essa terapia adjuvante melhora a função e a recuperação miocárdica.
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Artigo de método
Modelo cirúrgico porcino de isquemia miocárdica crônica tratada com adesivo carregado de exossomo e cirurgia de revascularização miocárdica sem circulação extracorpórea
Neste artigo
Resumo
Resumo
A isquemia miocárdica crônica decorrente da estenose coronariana progressiva leva ao miocárdio hibernante (HIB), definido como miocárdio que se adapta à redução da disponibilidade de oxigênio por meio da redução da atividade metabólica, prevenindo a lesão irreversível dos cardiomiócitos e o infarto. Isso é distinto do infarto do miocárdio, pois o HIB tem potencial de recuperação com revascularização. Pacientes com doença arterial coronariana (DAC) significativa experimentam isquemia crônica, o que os coloca em risco de insuficiência cardíaca e morte súbita. A intervenção cirúrgica padrão para DAC grave é a cirurgia de revascularização miocárdica (CRM), mas tem se mostrado uma terapia imperfeita, mas não existem terapias adjuvantes para recuperar miócitos adaptados à isquemia crônica. Para suprir essa lacuna, foi utilizado um modelo cirúrgico de HIB utilizando porcinos que é passível de revascularização miocárdica e mimetiza o cenário clínico. O modelo envolve duas cirurgias. A primeira operação envolve o implante de um constritor rígido de 1,5 mm na artéria descendente anterior (DAE). À medida que o animal cresce, o constritor gradualmente causa estenose significativa, resultando em redução da função sistólica regional. Quando a estenose atinge 80%, o fluxo e a função miocárdica ficam prejudicados, criando a HIB. Em seguida, é realizada uma CRM sem CEC com a artéria mamária interna esquerda (LIMA) para revascularizar a região isquêmica. O animal se recupera por um mês para permitir uma melhora miocárdica ideal antes do sacrifício. Isso permite estudos fisiológicos e teciduais de diferentes grupos de tratamento. Esse modelo animal demonstra que a função cardíaca permanece comprometida apesar da CRM, sugerindo a necessidade de novas intervenções adjuvantes. Neste estudo, foi desenvolvido um adesivo de colágeno embutido em exossomos derivados de células-tronco mesenquimais (CTM), que pode ser aplicado cirurgicamente na superfície epicárdica distal à anastomose com LIMA. O material está em conformidade com o epicárdio, é absorvível e fornece o arcabouço para a liberação sustentada de fatores de sinalização. Essa terapia regenerativa pode estimular a recuperação miocárdica que não responde apenas à revascularização. Esse modelo se traduz na área clínica, fornecendo meios de exploração fisiológica e mecanicista sobre a recuperação em HIB.
Introdução
Globalmente, a DAC grave afeta mais de cem milhões de pacientes e, embora a taxa de mortalidade tenha diminuído, continua sendo uma das principais causas de morte 1,2. A DAC tem um amplo espectro clínico, desde infarto do miocárdio (IAM) até isquemia com viabilidade preservada. A maioria das pesquisas pré-clínicas concentra-se na IM, caracterizada pela presença de tecido infartado, pois é possível estudar em modelos animais de pequeno e grande porte. Entretanto, esse modelo não contempla pacientes com viabilidade preservada e passíveis de revascularização. A maioria dos pacientes submetidos à CRM apresenta suprimento sanguíneo diminuído e função limitada, mantendo variabilidade na reserva contrátil e viabilidade3. Sem tratamento, esses pacientes podem evoluir para insuficiência cardíaca avançada e morte súbita, especialmente durante o aumento da carga de trabalho4. Dentre esses pacientes, a cirurgia de revascularização miocárdica (CRM) é uma terapia eficaz, mas pode não resultar em recuperação funcionalcompleta5. É importante ressaltar que a disfunção diastólica, que é um marcador de piores desfechos clínicos, não se recupera após a revascularização, sugerindo a necessidade de novas terapias adjuvantes durante aCRM6,7. Atualmente, não há intervenções adjuvantes clinicamente disponíveis para a revascularização do miocárdio para restaurar a plena capacidade funcional dos cardiomiócitos. Essa é uma grande lacuna terapêutica, uma vez que muitos pacientes evoluem para insuficiência cardíaca avançada apesar da revascularizaçãoadequada8.
Foi criado um modelo porcino inovador de isquemia miocárdica crônica, passível de CRM, para mimetizar a experiência clínica de DAC9. Os suínos fornecem um bom modelo de cardiopatia em relação a outros animais de grande porte, pois não possuem colaterais epicárdicas em ponte, de modo que a estenose isolada da DAE resulta em isquemia regional10. Neste estudo, foram utilizadas porcas Yorkshire-Landrace, fêmeas com 16 semanas de idade. Nesse modelo, a DAE foi revascularizada com revascularização do miocárdio sem circulação extracorpórea com enxerto de artéria mamária interna esquerda (LIMA) (Tabela 1 Suplementar). A intervenção coronária percutânea (ICP) não é possível para abrir a estenose, pois o constritor é um dispositivo rígido. A ressonância magnética (RM) cardíaca é usada para avaliar a função global e regional, a anatomia coronariana e a viabilidade tecidual. A análise da RMC mostrou função diastólica, caracterizada pela taxa de enchimento de pico (RFP), que permanece comprometida apesar daCRM6. O mecanismo de disfunção diastólica provavelmente está relacionado ao comprometimento da bioenergética mitocondrial e da formação de colágeno no HIB que persistem após a CRM11.
As células-tronco mesenquimais (CTM) fornecem sinalização terapêutica através de exossomos para melhorar a recuperação miocárdica quando aplicadas durante a CRM. Neste modelo suíno e em estudos paralelos in vitro , demonstrou-se que a colocação de um adesivo epicárdico de vicryl MSC durante a CRM recupera a função contrátil com aumento de proteínas-chave mitocondriais, a saber, PGC-1α12, um importante regulador do metabolismo energético mitocondrial13. O modelo in vitro permitiu investigar o mecanismo de sinalização das CTMs sobre a função mitocondrial prejudicada. Exossomos são microvesículas estáveis secretadas (50-150 nm) que contêm proteínas ou ácidos nucléicos, incluindo microRNA (miRNA)14. Dados recentes in vitro sugerem que os exossomos derivados das CTM são um importante mecanismo de sinalização necessário para a recuperação da respiração mitocondrial.
Exossomos derivados de células-tronco são terapêuticas adjuvantes promissoras, pois são facilmente acessíveis, podem ser produzidos comercialmente e carecem de conflitos éticos. Em consideração à tradução clínica, foi criado um adesivo de colágeno embutido com exossomos derivados de CTM que pode ser suturado cirurgicamente à região hibernante do miocárdio. Demonstrou-se que há liberação sustentada de exossomos usando esse adesivo e ele fornece uma terapia regenerativa livre de células com mecanismo de sinalização parácrina que visa a recuperação mitocondrial e aumenta a biogênese mitocondrial15. Esse procedimento fornece o modelo pré-clínico para estudar o impacto das terapias derivadas das CTM na melhora da função cardíaca por meio do aumento da função mitocondrial e da redução da inflamação no momento da revascularização e da reversão das adaptações dos miócitos à isquemia crônica.
Neste estudo, um método cirúrgico de revascularização miocárdica sem CEC usando LIMA para anastomose da DAE para contornar a área de estenose proximal da DAE mimetizando o tratamento padrão para pacientes com DAC é mostrado. Como terapia adjuvante com CRM, foi demonstrada a aplicação cirúrgica de adesivo de colágeno embutido no exossomo derivado das CTM na região isquêmica do miocárdio. Este modelo cirúrgico pode ser utilizado para estudar as respostas fisiológicas ao efeito parácrino observado com o uso de um remendo exossômico, bem como os mecanismos moleculares de recuperação.
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Protocolo
Os Comitês Institucionais de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) do Minneapolis VA Medical Center e da Universidade de Minnesota aprovaram todos os estudos com animais. As diretrizes atuais do National Institutes of Health (NIH) para o uso e cuidados com animais de laboratório foram seguidas.
1. Isolamento de células-tronco mesenquimais e preparação e caracterização de exossomos
- Isolamento de células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas da medula óssea
- Obter 30-50 mL de medula óssea estéril do esterno ou tíbia de uma fêmea suína Yorkshire-Landrace de 20 semanas de idade. Para isso, introduza uma agulha interóssea 15G de 25 mm no esterno ou na tíbia e retire a amostra em uma seringa de 60 mL com 10 mL de heparina.
NOTA: Para maiores detalhes sobre a coleta de medula óssea consultar Pittenger et al., Hocum-Stone et al.12,16. - Em resumo, passar o espécime de medula óssea através de um tubo Vacutainer CPT com heparina por 30 min a 1800 x g.
- Retire a camada bufante que contém as células mononucleares e lave com a solução salina balanceada de Hank. Células mononucleares pellet por centrifugação e ressuspensão em meio de cultura (10% de soro fetal bovino [SFB]).
- Transferir as células mononucleares para frascos de cultura celular para crescimento aderente. Isolar as CTMs da fração mononuclear por sua natureza aderente.
- Lavar todas as CTMs não realizadas em até 24 h, deixando uma monocamada de CTMs no frasco de cultura de tecidos. Confirmar o fenótipo das CTM por citometria de fluxo, garantindo negatividade para CD45, um marcador hematopoiético, e positividade para CD90 e CD105, marcadores das CTMs.
- Obter 30-50 mL de medula óssea estéril do esterno ou tíbia de uma fêmea suína Yorkshire-Landrace de 20 semanas de idade. Para isso, introduza uma agulha interóssea 15G de 25 mm no esterno ou na tíbia e retire a amostra em uma seringa de 60 mL com 10 mL de heparina.
- Preparação e caracterização de exossomos de células-tronco mesenquimais suínas
- Sementes 1 x 104 cardiomiócitos de ratos H9C2 e cultura em 1x DMEM+ 10% FBS e 1x Pen/strep. Semente 2 x 104 CTMs suínas em DMEM avançado + 5% FBS e 1x Pen/strep.
- Uma vez que ambas as linhagens celulares estejam pelo menos 80% confluentes, mude o meio para H9C2 e MSC esgotados do exossomo.
- Expor os cardiomiócitos H9C2 à hipóxia leve (1% O2 por 24 h). Retirar os frascos da hipóxia após 24 h e pipetar o meio H9C2.
- Remover e eliminar o suporte MSC do balão MSC. Adicionar o meio H9C2 purificado ao balão MSC. Incubar o balão durante 6 h em condições normóxicas (5% CO2, 20% O2 e 37 °C).
- Extrair os exossomos do meio condicionado co-cultivado usando o reagente de isolamento total do exossomo seguindo as instruções do fabricante.
- Verificar a identificação de exossomos por western blot na detecção de proteínas exossômicas comuns com anticorpos contra CD-63 (1:1000)17.
- Realizar análises de rastreamento de nanopartículas (NTA) para quantificar os exossomos e a avaliação do tamanho das nanopartículas e sua distribuição. Para fazer isso, dissolva a proteína total (50 μg) de exossomos em 500 μL de PBS para determinar a concentração e distribuição de tamanho de exossomos usando analisador de rastreamento de nanopartículas.
- Analise os dados usando um software de rastreamento de nanopartículas.
2. Cirurgia de revascularização miocárdica sem circulação extracorpórea
- Preparo animal
- Pesar o animal (porcos Yorkshire-Landrace fêmeas de 16 semanas de idade) 3 dias antes do agendamento para a cirurgia. Jejuar o animal por 12 h antes da cirurgia enquanto tem acesso à água durante o jejum.
- Administrar buprenorfina 0,18 mg/kg por via intramuscular 2-4 h antes da cirurgia.
- Indução do animal
- Sedar o animal com injeção intramuscular de 6,6 mg/kg de tiletamina-zolazepam/xilazina.
- Aguarde 15 min para garantir a sedação adequada, avaliando o tônus mandibular seguido da colocação do cateter 22G na veia central da orelha.
NOTA: Outra veia periférica pode ser considerada (ou seja, veia cefálica) se a veia da orelha for inadequada. - Administrar pomada oftálmica topicamente em cada olho. Administrar 1-2 mg/kg de propofol por via intravenosa para induzir anestesia geral. O tônus da mandíbula reflete de forma mais confiável a profundidade da anestesia e deve ser avaliado durante todo o procedimento.
- Intubar o animal com um tubo endotraqueal de tamanho adequado.
- Cirurgia
- Faça a barba no esterno e na virilha do animal em preparação para o procedimento cirúrgico.
- Colocar ventilação mecânica em 10-15 incursões respiratórias por minuto, oxigênio 1-4 L/min e isoflurano 1,0-3,0%, conforme necessário, para manter a anestesia profunda para a cirurgia. Verifique se há reflexo ocular ou mandibular ausente para confirmar a anestesia profunda.
- Equipamento de monitorização da posição (Eletrocardiograma, CO expiradofinal 2, frequência cardíaca, saturação de oxigênio, pressão arterial e temperatura) no animal.
- Conecte o cateter intravenoso a uma bolsa de solução salina normal ou solução de ringers de lactato para administrar fluidos de manutenção continuamente.
- Preparar a pele utilizando técnica asséptica com esfoliante de iodopovidona e solução 3x para esterilidade adequada e minimizar o risco de infecção do sítio cirúrgico.
- Administrar lidocaína por via intravascular (dose de ataque de 2 mg/kg ou perfusão contínua na dose de 50 mcg/kg/min) para prevenir arritmias.
- Posicione o animal dorsalmente e esfregue com toalhas estéreis.
- Realizar o corte da artéria femoral esquerda ou direita para colocação da linha arterial pela técnica de Seldinger seguido da conexão do cateter ao transdutor para monitorização contínua da pressão arterial no momento da cirurgia.
- Use o eletrocautério monopolar para fazer uma incisão de 20 cm que se estende da fúrcula esternal proximalmente até o processo xifoide distalmente, e para incisar camadas de músculos, gordura subcutânea e tecido conjuntivo até o esterno.
- Realizar esternotomia mediana utilizando serra oscilante.
OBS: A serra padrão é evitada para esternotomia de repetição, pois acarreta maior risco de lesão miocárdica por aderências pericárdicas prévias de toracotomia esquerda realizada para colocação do constritor da ADA. - Divida a placa esternal posterior com uma tesoura. Utilizar afastador de tórax especializado para visualização adequada do mediastino.
- Dissecção as aderências usando eletrocautério monopolar ou tesoura de Metzenbaum. Dissecar cuidadosamente o músculo e a gordura periesternais para expor a artéria mamária interna esquerda (LIMA).
- Uma vez exposto lateralmente à borda esternal, separe-o suavemente da parede torácica com dissecção romba com ponta de eletrocautério. Utilizar o LIMA como enxerto esqueletizado.
- Iniciar dissecção ao nível do3º espaço intercostal. Eleve suavemente a borda esternal esquerda para uma visualização ideal.
- Use tração suave na adventícia para expor os ramos arteriais e venosos do LIMA. Clipar o lado LIMA dos ramos usando hemoclipes e cauterizar a parede torácica lateral dos ramos.
OBS: Deve-se tomar cuidado para não cauterizar o clipe no LIMA, pois isso pode causar estreitamento do conduto. - Uma vez mobilizado um segmento inicial de ATI, continuar a dissecção proximalmente em direção ao nível da veia subclávia e distalmente até a bifurcação do ATI.
- Uma vez terminada a dissecção, administrar heparina por via intravenosa na dose de 100-300 U/kg. Aguarde 3 min após a administração da heparina.
- Após 3 min, clipar a extremidade distal do LIMA, imediatamente antes do nível da bifurcação do LIMA, e dividir o conduto. Costure a extremidade distal com uma gravata de sutura de seda livre 2-0.
- Preparar a extremidade proximal para enxertia. Inspecione visualmente a qualidade do fluxo deixando o enxerto sangrar por alguns segundos.
- Aperte suavemente a extremidade distal do conduto LIMA com uma pinça de buldogue atraumática para evitar sangramento. Abrir o pericárdio com um T invertido fazendo uma incisão de aproximadamente 5-6 cm. Coloque pontos de tamanho 3-0 no pericárdio para tração em ambos os lados da fenda.
- Estabilizar a DA com fitas de retração de silicone e estabilizador tecidual, que é fixado ao afastador esternal. Fazer uma arteriotomia na artéria LAD distal à estenose (causada por banda constritora) com uma lâmina 11 e estender com uma tesoura de íris.
- Coloque um shunt coronário de tamanho adequado na DAD. Realizar a anastomose LIMA a LAD com sutura inabsorvível 7-0 utilizando técnica de bypass sem circulação extracorpórea. Solte o oclusor bulldog no LIMA e confirme a hemostasia.
- Preparação de adesivo de exossomo derivado de células-tronco mesenquimais (CTM)
- Após o isolamento bem-sucedido dos exossomos das CTMs, suspender cerca de 3 x 108 exossomos em 3 mL de solução salina normal e adicionar à esponja de colágeno.
- Levar 3 ml de suspensão do exossoma à temperatura ambiente a cerca de 22 °C durante 10 minutos. Coloque 2 esponjas de colagem absorvíveis (cada uma com 1,27 cm x 2,54 cm) em uma placa de Petri média.
- Use uma seringa de 5 mL com uma agulha 18G para misturar suavemente a suspensão do exossomo. Pipetar lentamente 1,5 mL de suspensão em cada esponja de colágeno e aguardar 5 min para absorção total.
- Colocação de adesivo exossômico
- Coloque a esponja carregada de exossomos de cabeça para baixo na região hibernante do coração, que é o epicárdio da região septal anterior na distribuição da DA.
- Coloque suavemente duas esponjas para cobrir a região de hibernação do coração. Use uma tela de poliglactina de 3,5 cm x 1,0 cm para cobrir cada esponja de colágeno.
- Costure a tela no epicárdio com finas suturas 7-0 interrompidas.
- Colocação de dreno torácico
- Colocar um dreno torácico através de uma incisão separada, próximo ao aspecto inferior da incisão da esternotomia. Coloque o dreno torácico cautelosamente sobre a face anterior do coração.
- Uma vez que o tubo está no lugar, coloque uma sutura de corda em bolsa com sutura 3-0 usando um ponto de colchão horizontal para permitir o fechamento da ferida após a remoção do tubo.
- O dreno torácico é mantido até o fechamento completo do tórax.
- Fechamento torácico
- Aproximar o esterno com pontos inabsorvíveis usando um padrão de figura oito. Administrar 1 mg/kg de bupivacaína por via intramuscular em toda a extensão da incisão.
NOTA: A sutura é usada em vez de fios para evitar interferência com imagens de ressonância magnética. - Fechar camadas de músculo e pele de forma padrão usando sutura absorvível 2-0 e 3-0, respectivamente.
- Realize uma pausa respiratória e sucção para evacuar todo o ar para fora da cavidade torácica. Monitorar a pressão das vias aéreas no ventilador com cautela e manter a pressão entre 15-22 mmHg e liberar quando completa.
- Uma vez que todo o ar é evacuado, remova o dreno torácico enquanto fecha a ferida usando a sutura de corda da bolsa. Aplicar cola adesiva topicamente para cobrir a incisão esternal.
- Aproximar o esterno com pontos inabsorvíveis usando um padrão de figura oito. Administrar 1 mg/kg de bupivacaína por via intramuscular em toda a extensão da incisão.
- Cuidados pós-operatórios no pós-operatório
- Desmame gradualmente o animal do ventilador à medida que a incisão da pele estiver sendo fechada. Certifique-se de que o animal é capaz de respirar espontaneamente e proteger os reflexos antes de desconectá-lo do equipamento de anestesia.
- Retirar o tubo endotraqueal após confirmar que o animal é capaz de proteger sua via aérea. Cobrir a incisão da pele com curativo estéril e não aderente embutido com pomada antibiótica para minimizar a infecção do sítio cirúrgico.
- Continue a monitorar os sinais vitais, incluindo frequência cardíaca, frequência respiratória, temperatura corporal a cada 15 minutos até que o animal seja capaz de manter sua posição sem assistência.
- Certifique-se de que o animal não seja deixado sozinho até que possa levantar e manter a cabeça erguida e possa ficar em pé sem assistência. Administrar meloxicam na dose de 0,2 mg/kg por via subcutânea antes de transportar o animal para a unidade de recuperação.
- Transporte o animal para a unidade de recuperação quando o animal estiver estável. Manter o curativo do sítio cirúrgico na incisão até o 3º dia de pós-operatório. Substitua o curativo se ele ficar sujo.
- Continue a monitorar o nível da dor, incisão na pele e bem-estar geral do animal nos primeiros 5 dias após a cirurgia. Administrar meia dose de meloxicam (0,1 mg/kg) conforme necessário uma vez por dia para dor de escape.
- Um único alojamento do animal durante os primeiros 5 dias após a cirurgia enquanto a(s) incisão(s) cicatriza(m) para reduzir o risco de infecção do sítio cirúrgico por outro animal. Devolver o animal ao alojamento do grupo após 5 dias.
- Comunicar quaisquer complicações ou alterações no estado do animal (febre, ascite, perda de peso, inapetência, etc.) ao veterinário ou ao pessoal adequado.
3. Cineangiocoronariografia por acesso femoral
- Fixar o animal na mesa cirúrgica no decúbito dorsal. Iniciar a ventilação mecânica a 10-15 respirações por minuto. Colocar oxigênio em 2-4 L/min, isoflurano em 1% e 4%, conforme necessário para manter um plano profundo de anestesia.
- Coloque eletrocardiogramas no membro do animal para monitorar o ritmo cardíaco. Avaliar o animal quanto à profundidade da anestesia. Considere o animal profundamente anestesiado quando o reflexo ocular ou mandibular estiver ausente.
- Limpe a área do peito e pescoço com esfoliação de iodopovidona e, em seguida, esfregue o animal com toalhas.
- Acessar a artéria femoral via corte cirúrgico e expor a artéria e veia femoral. Fazer uma incisão longitudinal de 1-2 mm com lâmina nº 11 na artéria femoral e canular a artéria com introdutor de 11 Fr na luz do vaso.
- Após a obtenção do acesso, adiante o cateter para realização de cineangiocoronariografia para avaliar a permeabilidade anatômica do enxerto LIMA-DAD.
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Resultados
Após a revascularização, a cineangiocoronariografia é realizada para avaliar a estenose da DAE (maior que 80%) e a patência do enxerto LIMA-LAD (Figura 1). Quatro semanas após a cirurgia de revascularização e colocação do adesivo de colágeno carregado de exossomos, a RMC cardíaca é realizada para avaliar a função sistólica e diastólica do coração em repouso e sob estresse usando infusão de dobutamina em baixas doses a 5μg/kg/min. A função sistólica é analisada medindo-se a porcentagem da esp...
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Discussão
Este estudo apresenta o primeiro modelo porcino de miocárdio cronicamente isquêmico, no qual foi demonstrado que o tratamento com um adesivo carregado de colágeno carregado de exossomo derivado de CTM durante a revascularização cirúrgica recupera a função diastólica e sistólica mediante estimulação inotrópica, potencialmente visando a recuperação mitocondrial. Anteriormente, foi demonstrado que, em um modelo animal de grande porte de HIB, a função diastólica e sistólica, medida pela RMC cardíaca, permanece comprometida e...
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo VA Merit Review #I01 BX000760 (RFK) dos Estados Unidos (EUA) Departamento de Assuntos de Veteranos BLR&D e Departamento de Assuntos de Veteranos dos EUA concedem #I01 BX004146 (TAB). Também agradecemos o apoio do Instituto do Coração Lillehei da Universidade de Minnesota. O conteúdo deste trabalho não representa a opinião do Departamento de Assuntos de Veteranos dos EUA do Governo dos Estados Unidos.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 5 Ethibond | Ethicon | MG46G | Sutura |
| # 40 lâmina de corte | Oster | 078919-016-701 | Remova o cabelo dos locais de cirurgia |
| 0 Vicryl | Ethicon | J208H | Sutura |
| 1 mL Seringa | Medtronic/Covidien | 1188100777 | Administre agentes injetáveis |
| 1" fita médica | Medline | MMM15271Z | Ferida segura curativo e cateteres intravenosos |
| 1000mL 0,9% Cloreto de sódio | Baxter | 2B1324X | Fluido de reposição IV |
| 12 mL Seringa | Medtronic/Covidien | 8881512878 | Administrar agentes injetáveis |
| 18 ga agulhas | BD | 305185 | Administração de agentes injetáveis |
| 20 ga agulhas | BD | 305175 | Administração de agentes injetáveis |
| 20 mL Seringa | Medtronic/Covidien | 8881520657 | Administrar agentes injetáveis |
| 2-0 Vicryl | Ethicon | J317H | Sutura |
| 250 mL 0,9% salina | Baxter | UE1322D | Fluido IV de Reposição |
| 3 mL Syinge | Medtronic/Covidien | 1180300555 | Administrar agentes injetáveis |
| 3-0 Vicryl | Ethicon | VCP824G | Sutura |
| 36" Tubulação de monitoramento de pressão | Smith' s Medical | MX563 | Connect art. Linha para transdutor |
| 4,0 mm ID tubo endotraqueal | Medline | DYND43040 | Estabelecer via aérea para hibernação |
| 4-0 Tevdek II Fios | Deknatel | 7-922 | Sutura para fixar o constritor em torno da LAD |
| 48" Tubulação de monitoramento de pressão | Smith' s Medical | MX564 | Connect art. Linha para transdutor |
| 500mL 0,9% Cloreto de sódio | Baxter | 2B1323Q | Drug delivery, Fornece névoa para Blower Mister |
| 6 mL Seringa | Medtronic/Covidien | 1180600777 | Administrar agentes injetáveis |
| Tubo endotraqueal de 6,0 mm ID | Mallinckrodt | 86049 | Estabelecer via aérea para Revasc, MRI e Terminação |
| Tubo endotraqueal de 6,5 mm ID | Medline | DYND43065 | Estabelecer vias aéreas para Revasc, MRI e Terminação |
| 6 "linha de tubulação de pressão | Smith ' s Medical | MX560 | Coletar medula óssea |
| 60 mL Seringa | Medtronic/Covidien | 8881560125 | Administrar agentes injetáveis |
| Tubo endotraqueal de 7,0 mm de diâmetro interno | Medline | DYND43070 | Estabelecer vias aéreas para Revasc, ressonância magnética e terminação |
| 7-0 Prolene | Ethicon | M8702 | Sutura |
| Advanced DMEM (1X) | ThermoFisher Scientific | 12491023 | |
| Almofadas de preparação de álcool | MedSource | MS-17402 | Desinfetante de pele |
| Amicon Ultra-15 Unidade de Filtro Centrífugo | Millipore Sigma | UFC910024 | |
| Máquina de Anestesia | Drager | Fabious Trio | mantém anestesia geral |
| Máquina de Anestesia + ventilador | DRE Drager- Fabius Tiro | DRE0603FT | Fornecer Oxigênio e inalante ao paciente |
| Monitor de Anestesia | Phillips Intellivue | MP70 | Multiparâmetro para segurança do paciente |
| Kit de Linha Arterial | Seta | ASK-04510-HF | Cateter femoral para monitoramento da pressão arterial |
| Lágrimas Artificiais | Rugby | 0536-1086-91 | Lubrifique os olhos para evitar o ressecamento da córnea |
| Bair Hugger | 3M | Modelo 505 | Sistema de aquecimento do paciente |
| Pacote básico | Medline | DYNJP1000 | Tubos de Coleta de Sangue com tampa e capa de mesa estéreis |
| - topo verde | Fisher Scientific | 02-689-7 | Colete amostras de sangue de microesferas |
| Kit de Soprador | Medtronic/Covidien | 22120 | Limpa o campo cirúrgico para anastomose |
| de vasos BODIPY TR Ceramide | ThermoFisher Scientific | D7540 | |
| Agulha de medula óssea- 25mm 15 ga Agulha IO | Vidacare | 9001- VC-005 | Coletar medula óssea |
| Cera óssea | Medline | ETHW31G | Hemostasia de osso cortado |
| Bovie Cautery peça de mão | Covidien | E2516 | Hemostasia |
| Bupivicaína | Pfizer | 00409-1161-01 | Anestésico local |
| Buprenorfina 0,3 mg / mL | Sigma Aldrich | B9275 | Analgésico pré-operatório para procedimentos de sobrevivência |
| Célula Raspadores | Corning | 353085 | |
| Cephazolin 1 gr | Pfizer | 00409-0805-01 | Tubo |
| torácico | Covidien | 8888561043 | Evacua o ar da cavidade torácica |
| Cloroprep | Becton Dickenson | 260815 | Tubo CPT de preparação cirúrgica da pele |
| BD | 362753 | MSC isolamento da medula óssea | |
| Delrin Constrictor | U de MN | Feito sob medida | Cria estenose de LAD |
| Dermabond | Ethicon | DNX12 | Adesivo de pele |
| DMEM (1X) Dulbecco's Modified Eagle Medium, HEPES | ThermoFisher Scientific | 12430062 | |
| Dobutamina 12,5 mg/mL | Pfizer | 00409-2344-01 | Aumenta a pressão arterial e a frequência cardíaca durante a coleta de sangue da segunda microesfera |
| Almofadas de ECG | DRE | 1496 | Monitor do ritmo cardíaco |
| FBS esgotado por exossomos | ThermoFisher Scientific | A2720801 | |
| Falcon Pipetas sorológicas descartáveis de poliestireno, estéreis, 10mL | Fisher Scientific | 13-675-20 | |
| Introdutor femoral e carotídeo | Cordis- J& J | 504606P | cânulas femorais e carotis |
| Soro Fetal Bovino, Inativado por Calor, Gibco FBS | ThermoFisher Scientific | 16140089 | |
| Flo-thru 1.0 | Baxter | FT-12100 | usado para anastomos LIMA para L |
| Flo-thru 1.25 | Baxter | FT-12125 | FT-12125 |
| Flo-thru 1.5 | Baxter | FT-12150 | FT-12150 |
| Flo-thru 2.0 | Baxter | FT-12200 | FT-12200 |
| GlutaMAX Suplemento | ThermoFisher Scientific | 35050061 | |
| Máquina de Cortar | Cabelo Oster | 078566-011-002 | Remova o cabelo de locais de cirurgia Esponja de |
| colágeno Helistat | McKesson | 570973 1690ZZ | Esponja para incorporação de exossomos |
| Heparina | Pfizer | 0409-2720-03 | anticoaggulante |
| Fisher Scientific | 316-154 | Formalina para amostras de tecido | |
| HyClone Soro fetal bovino caracterizado (FBS) | Cytiva | SH30071.03 | |
| Hypafix | BSN Medical | 4210 | Curativo seguro e cateteres intravenosos |
| Isoflurano | Sigma Aldrich | CDS019936 | Anestésico Geral - Inalante |
| Tubulação IV para Soprador Mister Carefusion | 42493E | Adapta-se a Fluidos IV para Soprador/Mister | |
| Jelco 18 ga cateter IV | Smiths medical | 4054 | Acesso IV em Revasc, MRI e Term |
| Lidocaine 2% | Pfizer | 00409-4277-01 | Anestésico/ antiarrítmico local |
| Ligaclips Grampos cirúrgicos | Ethicon | MSC20 | para remoção LIMA |
| Lâmina longa para laringoscópio | DRE | 12521 | Permite a visualização da traqueia para intubação |
| Meloxicam 5 mg/mL | Boehringer Ingelheim | 141-219 | Bomba |
| Microsphere | Coleta amostras de sangue do introdutor femoral | ||
| Monopolar Cautery | Covidien | Valleylab™ FT10 | Hemostasia |
| Nanosight NS 300 | Malvern Panalytical | MAN0541-03-EN | |
| NTA 3.1.54 software | Malvern Panalytical | MAN0520-01-PT-00 | |
| OPVAC Synergy II | Terumo Sistema Cardiovascular | 401-230 | Posicionador cardíaco e estabilizador |
| Tanque de oxigênio E cilindro vários | vários | Usado para o soprador Mister se a máquina de anestesia não tiver medidor de fluxo auxiliar | |
| PBS, pH 7.2 | ThermoFisher Scientific | 20012050 | |
| Penicilina-Estreptomicina-Neomicina (PSN) Mistura de antibióticos | ThermoFisher Scientific | 15640055 | |
| Pigtail 145 cateter 6 French | Boston Scientific | 08641-41 | Meça as pressões LV |
| Transdutor de pressão | vários | Deve se adaptar ao monitor de anestesia | Monitore as pressões arteriais diretas |
| Propofol | Diprivan | 269-29 | Agente de indução |
| Roncurônio | Mylan | 67457-228-05 | Agente bloqueador neuromuscular |
| SR Buprenorfina 10 mg/mL | Abbott Labs | NADA 141-434 | Analgésico pós-operatório |
| Solução salina estéril 20 mL | Fisher Scientific | 20T700220 | Descarga para cateteres intravenosos |
| Serra esternal/ Serra de necropsia | Thermo Fisher | 812822 | Usado para abrir a cavidade torácica |
| Torneiras de parada | Smith Medical | MX5311L | 2 para conectar à cauda de porco |
| Succinilcolina 20 mg/mL | Pfizer | 00409-6629-02 | Agente bloqueador neuromuscular |
| Tubo de sucção | Medline | DYND50223 | |
| Recipiente de sucção | Medline | ||
| Pacote de cirurgia com afastador de tórax | vários | Veja a lista de pacotes | Corte femoral e esternotomia mediana |
| Instrumentos cirúrgicos | vários | Veja a lista de pacotes | Cortes femorais e carotídeos e esternotomia Clipe |
| mola cirúrgica | Applied Medical | A1801 | Extremidade da braçadeira de LIMA após a remoção Bomba de |
| seringa | Harvard | Delivers IV Infusão de dobutamina | |
| SYTO RNASelect Green Fluorescent cell Stain - 5 mM Solução em DMSO | Millipore Sigma | S32703 | |
| Telazol 100 mg/mL | Fort Dodge | 01L60030 | Sedativo pré-operatório |
| Telpha pad | Covidien | 2132 | Curativo estéril |
| Temporizador | Tempo de coleta de amostras de sangue | ||
| Reagente de isolamento total de exossomos ( de meios de cultura de células) | ThermoFisher Scientific | 4478359 | |
| TPP Frasco de cultura de tecidos, T75, tampa de filtro com 0,22 uM PTFE | ThermoFisher Scientific | TP90076 | |
| pomada antibiótica tripla | Johnson & Johnson | 23734 | Malha Vicryl tópica sobre ferida |
| Ethicon | VKML | Patch para aplicação de células epicárdicas | |
| Microesferas Vortex | Mix | ||
| Xilazina 100 mg/mL | Vedco | 468RX | Pré-operatório Sedativo/analgésico |
Referências
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