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Artigo de método

Estabelecimento de um modelo de fístula oronasal em camundongos

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DOI:

10.3791/65578

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8 de setembro de 2023

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Neste artigo

Resumo

Este artigo descreve um procedimento passo a passo para o estabelecimento de um modelo de camundongos com fístula oronasal. A fístula oronasal foi criada empregando-se cautério oftalmológico aquecido para lesar a porção da linha média do palato duro, resultando na formação de uma abertura entre as cavidades oral e nasal.

Resumo

Este estudo apresenta um método utilizando o cautério oftalmológico aquecido para desenvolver um modelo viável para a investigação de fístulas oronasais. Camundongos C57BL/6 foram utilizados para estabelecer o modelo de fístula oronasal (ONF). Para a confecção da ONF, os camundongos foram anestesiados, imobilizados e seus palatos duros expostos. Durante o procedimento cirúrgico, uma lesão mucosa de 2,0 x 1,5 mm de espessura total foi induzida na linha média do palato duro com o uso de cátero oftalmológico. Foi fundamental controlar o tamanho da ONF e minimizar o sangramento para garantir o sucesso do experimento. A verificação da efetividade do modelo de ONF foi realizada no 7º dia de pós-operatório, englobando avaliações anatômicas e funcionais. A presença do septo nasal dentro da cavidade oral e a saída de água estéril das narinas à injeção na cavidade oral confirmaram o estabelecimento bem-sucedido do modelo de ONF. O modelo demonstrou uma fístula oronasal prática e bem-sucedida, caracterizada por baixa taxa de mortalidade, alterações significativas de peso e mínima variação no tamanho da ONF. Estudos futuros poderão considerar a adoção desta metodologia para elucidar os mecanismos de cicatrização de feridas no palato e explorar novos tratamentos para fístulas oronasais.

Introdução

A fístula oronasal (ONF), uma abertura anormal entre as cavidades oral e nasal, manifesta-se clinicamente como um defeito em uma área estrutural desde o processo alveolar até a úvula, que comumente ocorre como complicação após o reparo da fissurapalatina1. Pacientes com FON, apresentam refluxo alimentar, distúrbios articulatórios e comprometimento da função velofaríngea, afetando significativamente sua qualidade devida2,3,4. A taxa de FON pós-operatória varia de 2,4% a 55% devido a fatores como largura da fissura, tipo de Veau e método cirúrgico5,6,7,8....

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Protocolo

Todos os procedimentos em animais neste estudo foram revisados e aprovados pelo Comitê de Ética da Escola de Estomatologia da China Ocidental, Universidade de Sichuan. Camundongos C57BL/6 adultos (fêmeas) foram utilizados para o presente estudo.

1. Preparo cirúrgico

  1. Reunir os instrumentos cirúrgicos necessários para o procedimento: germinador, cautério oftalmológico, tesoura microcirúrgica, pinça microcirúrgica, seringas e agulhas (26 g x 0,63 polegadas) (Figura 1A,B) (ver Tabela de Materiais).
    OBS: Antes do procedimento cirúrgico, autoclave os ins....

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Resultados

Para avaliar a viabilidade e estabilidade desse método experimental, o mesmo procedimento foi realizado em dez camundongos, e foram feitas observações quanto à mortalidade, mudanças no tamanho da ferida, peso corporal e análise histológica. Os camundongos foram eutanasiados no dia 7.

O procedimento apresentou baixa taxa de mortalidade. O cautério oftalmológico e o germinador, representados na Figura 1A-C, foram os principais instr.......

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Discussão

Pesquisadores têm explorado vários materiais, fármacos e novas técnicas para o tratamento da ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. Com os avanços nos procedimentos cirúrgicos, a incidência e a recorrência da ONF têm sido reduzidas. No entanto, devido às característi.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo Programa de Pesquisa e Desenvolvimento, Hospital de Estomatologia da China Ocidental, Universidade de Sichuan (RD-02-202107), Programa de Apoio à Ciência e Tecnologia da Província de Sichuan (2022NSFSC0743) e concessão da Fundação de Ciência Pós-doutoral de Sichuan (TB2022005) a H. Huang.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Microscopia EletrônicaGerminadora66118-20Equipamento de aquecimento e desinfecção
Luvas de látexAllmedou similares
LuzesOlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261esmagado; 5 mg/kg
Instrumentos microcirúrgicos (tesouras e pinças)Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087Instrumento cirúrgico
Oftalmologia cauterySuqian Wenchong Medical Equipment Co.1.00234E + 13Instrumento cirúrgico
Algodão estéril,Yancheng Begu Technology Co.ou similar
Folha de metal estérilBiosharpou similar
Folhas estéreis3MXH003801129ou similar
Campos cirúrgicosYancheng Begu Technology Co.ou
seringas similaresYancheng Begu Technology Co.S-015301ou similar
TapeBkmamlabou
similar Dispositivo de manutenção de temperaturaHarvard Apparatus LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 mg/kg
Ciências de

Referências

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

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Reimpressões e permissões

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