Apresentamos aqui um novo dispositivo de contusão de lesão medular automatizada para camundongos, que pode produzir com precisão modelos de contusão de lesão medular com diferentes graus.
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Artigo de método
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Apresentamos aqui um novo dispositivo de contusão de lesão medular automatizada para camundongos, que pode produzir com precisão modelos de contusão de lesão medular com diferentes graus.
A lesão medular (LM) decorrente de lesões traumáticas, como acidentes automobilísticos e quedas, está associada à disfunção permanente da medula espinhal. A criação de modelos de contusão de lesão medular por impacto na medula espinhal resulta em patologias semelhantes à maioria das lesões medulares na prática clínica. Modelos animais precisos, reprodutíveis e convenientes de lesão medular são essenciais para o estudo da lesão medular. Apresentamos um novo dispositivo automatizado de contusão de lesão medular para camundongos, o sistema inteligente de lesão medular da Universidade de Guangzhou Jinan, que pode produzir modelos de contusão de lesão medular com precisão, reprodutibilidade e conveniência. O sistema produz com precisão modelos de diferentes graus de lesão medular por meio de sensores de distância a laser combinados com uma plataforma móvel automatizada e software avançado. Usamos esse sistema para criar três níveis de modelos de camundongos com lesão medular, determinamos seus escores na escala Basso de camundongos (BMS) e realizamos ensaios comportamentais e de coloração para demonstrar sua precisão e reprodutibilidade. Mostramos cada etapa do desenvolvimento dos modelos de lesão utilizando este dispositivo, formando um procedimento padronizado. Este método produz modelos reprodutíveis de contusão de lesão medular em camundongos e reduz os fatores de manipulação humana por meio de procedimentos convenientes de manuseio. O modelo animal desenvolvido é confiável para estudar os mecanismos de lesão medular e as abordagens de tratamento associadas.
A lesão medular geralmente resulta em disfunção permanente da medula espinhal abaixo do segmento lesado. É causada principalmente por objetos que atingem a coluna vertebral e hiperextensão da coluna vertebral, como acidentes de trânsito e quedas1. Devido à disponibilidade limitada de opções de tratamento eficazes para a lesão medular, a elucidação da patogênese das lesões medulares usando modelos animais será informativa para o desenvolvimento de abordagens de tratamento adequadas. O modelo de contusão da lesão medular causada por impacto na medula espinhal resulta no desenvolvimento de modelos animais com patologias semelhantes à maioria
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Os estudos envolvendo animais foram revisados e aprovados pelo Comitê de Ética da Universidade de Jinan.
1. Anestesiização dos animais e laminectomia espinhal T10
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A laminectomia foi realizada em 24 camundongos fêmeas (8 semanas de idade), conforme descrito acima. Os camundongos do grupo sham (n=6) não foram submetidos à lesão medular, enquanto o restante dos camundongos, incluindo os grupos 0,5 mm (n=6), 0,8 mm (n=6) e 1,1 mm (n=6), foram submetidos a diferentes profundidades de impacto medular. Os escores da SNF foram registrados regularmente até 1 mês de pós-operatório (Figura 4). Houve diferenças significativas nos escores pós-operatórios de SNF de.......
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A lesão medular pode levar a déficits sensoriais e motores, que podem resultar em deficiências físicas e mentais graves. Na China, a incidência de lesões medulares em diferentes províncias varia de 14,6 a 60,6 por milhão18. O aumento da prevalência da LM colocará mais pressão sobre o sistema de saúde. Atualmente, existem limitadas opções de tratamento efetivo para a lesão medular, pois seus patomecanismos e processos de reparo ainda não estão totalmenteesclarecidos19. Há ne.......
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Os autores declaram não haver interesses financeiros concorrentes.
Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China, Nos. 82102314 (para ZSJ), e 32170977 (para HSL) e Fundação de Ciências Naturais da Província de Guangdong, Nos. 2022A1515010438 (para ZSJ) e 2022A1515012306 (para HSL). Este estudo foi apoiado pelo Programa de Tecnologia de Fronteira Clínica do Primeiro Hospital Afiliado da Universidade de Jinan, China, Nos. JNU1AF- CFTP- 2022- a01206 (para HSL). Este estudo foi apoiado pelo Guangzhou Science and Technology Plan Project, Nos. 202201020018 (para HSL), 2023A04J1284 (para ZSJ) e 2023A03J1024 (para HSL).
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 0.01M PBS (pó, pH7.2-7.4) | Solarbio Life Sciences | P1010 | |
| 2,2,2-Tribromoetanol | Macklin | 75-80-9 | |
| 4% paraformaldeído fixador de tecido | Biosharp ciências da vida | BL539A | |
| Biomicroscópio | Leica | LCC50 HD | |
| CatWalk | Noldus Tecnologia da Informação | CatWalk XT 9.1 | |
| Vidro de cobertura | CITOTEST Scientific | 10212432C | |
| Máquina de incorporação | Changzhou Zhongwei Instrumento eletrônico | BMJ-A | |
| Etanol absoluto | DAMAO | 64-17-5 | |
| FootFaultScan | Clever Sys Inc. | - | |
| Lâmina de vidro | CITOTEST Scientific | 80302-2104 | |
| Kit de Coloração de Hematoxilina e Eosina | Beyotime Biotechnology | C0105S | |
| broca de micro-moagem | FEIYUBIO | 19-7010 | |
| Fixador espinhal de camundongo | RWD Life Science | 68094 | |
| Micrótomo de parafina | Thermo | shandon finesse 325 | |
| RotaRod para camundongos | Ugo Basile | 47600 | |
| Estereomicroscópio | KUY NICE | SZM-7045 | |
| Álcool Terc-Amílico | Macklin | 75-85-4 | |
| Xileno | China Nacional Farmacêutica | # 10023418 |
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