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Artigo de método

Usando moxabustão separada por bolo de ervas para o tratamento de ratos com insuficiência renal crônica

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DOI:

10.3791/65783

22 de dezembro de 2023

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

A plataforma experimental de moxabustão pode fixar os ratos sem restrições, e os ratos podem ser submetidos a moxabustão multiponto no estado acordado, garantindo o bem-estar dos ratos, protegendo a segurança dos operadores, garantindo a eficácia terapêutica e melhorando a eficiência do experimento.

Resumo

No processo de moxabustão na prática clínica, os indivíduos precisam estar de bom humor e postura confortável para evitar problemas como queda de cinzas de moxa, queimaduras na pele e efeito curativo deficiente. Tais problemas também existem no experimento de moxabustão de ratos. Para simular a prática clínica, faz-se necessária a introdução de um instrumento experimental em experimentos com animais, ou seja, um dispositivo de moxabustão com ratos fixos e sincronização do tratamento com moxabustão, que pode fazer com que os ratos experimentais recebam tratamento de moxabustão de forma silenciosa e confortável sob não anestesia.

Nosso grupo de pesquisa projetou uma plataforma experimental de moxabustão de ratos. O dispositivo foi emoldurado por uma placa de madeira com uma placa de base de suporte, vários componentes fixos e componentes particionados. O dispositivo pode atingir o modo de operação de moxabustão em ratos sem ligação, evitando anestesia e escaldagem e expondo simultaneamente vários pontos de acupuntura nas costas. Esta operação pode evitar lesões físicas e mentais em ratos e operadores, o que melhora a eficiência da pesquisa e promove ainda mais o desenvolvimento e a pesquisa de experimentos com animais de moxabustão.

O dispositivo tem uma estrutura simples, é fácil de operar e popularizar, é projetado de forma abrangente e inovadora, reutilizável e é adequado para experimentos com ratos baseados principalmente em moxabustão. Este artigo apresenta principalmente a estrutura do dispositivo de plataforma experimental para moxabustão de ratos, o procedimento básico de moxabustão separada por bolo de ervas em ratos experimentais usando o dispositivo e descreve o estabelecimento de um modelo de rato de insuficiência renal crônica (IRC) e resultados experimentais representativos.

Introdução

A moxabustão apareceu com a aplicação de fogo. Médicos antigos descobriram acidentalmente que algumas partes do corpo em chamas poderiam aliviar os sintomas de desconforto. Após a prática de longo prazo, "Artemisiae Argyi Folium" foi gradualmente selecionado como o principal material de moxabustão1. A moxabustão é um dos componentes importantes da medicina tradicional chinesa e, quando justaposta à decocção da medicina tradicional chinesa e à acupuntura do ponto de acupuntura, essas três principais terapias da medicina tradicional chinesa são amplamente utilizadas em muitas doenças.

Os médicos chineses costumavam usar a moxabustão para tratar doenças já no período de Huangdi Neijing (Clássico Interno do Imperador Amarelo). Artemisiae Argyi Folium é um tipo de fitoterapia chinesa com a função de aquecer os meridianos para parar o sangramento, dissipar resfriados e aliviar a dor. É comumente usado no tratamento externo da medicina tradicional chinesa e também pode ser usado no tratamento da decocção da medicina tradicional chinesa. A moxabustão é um tipo de terapia externa2 em que moxa ou outras drogas são colocadas em pontos de acupuntura na superfície do corpo para queimar e usar o calor suave do fogo da moxabustão e o efeito das drogas para tratar doenças3.

Como um dos métodos comuns de tratamento, a moxabustão tem sido amplamente utilizada na prática clínica. Com a expansão contínua da terapia de moxabustão, um número crescente de estudos tem investigado o mecanismo da moxabustão e realizado muitos experimentos com animais 4,5.

O método de moxabustão pode ser classificado como moxabustão direta e moxabustão indireta. O método de colocar moxabustão na pele do corpo é chamado de moxabustão direta. A moxabustão indireta separa a superfície do cone de moxa e os pontos de acupuntura com drogas ou outros materiais. A moxabustão pode tratar várias doenças, como síndrome do intestino irritável6, síndrome da fadiga crônica7 e osteoartrite do joelho8.

Este artigo discute principalmente o mecanismo de moxabustão separada por bolo de ervas. A moxabustão separada do bolo de ervas pertence ao método de moxabustão indireta, no qual um cone de moxa é colocado no bolo medicinal para aplicar a moxabustão. Estudos atuais mostraram que os efeitos infravermelhos e de aquecimento produzidos pela queima do cone de moxa, a composição química do alcatrão da folha de moxa e a estimulação do ponto de acupuntura podem alcançar a prevenção e o tratamento de doenças9 , aumentando a penetração de drogas nos pontos de acupuntura. Portanto, a moxabustão separada do bolo de ervas produz principalmente um "efeito abrangente" por meio da moxabustão, drogas e pontos deacupuntura 10.

Estudos anteriores mostram que a moxabustão é um método eficaz para o tratamento da IRC 11,12,13,14,15, mas o mecanismo subjacente ainda é indefinido. Temos trabalhado em pesquisas clínicas e animais sobre IRC. Atualmente, estamos conduzindo um estudo experimental de moxabustão em ratos CRF com base na via de sinalização da proteína quinase mediada por moxabustão separada por bolo de ervas Via de sinalização da quinase endoplasmática semelhante à RNA (PERK) do estresse do retículo endoplasmático. Por meio desse experimento com animais, pretendemos explicar preliminarmente o mecanismo potencial da moxabustão no tratamento da doença renal crônica. Neste experimento, o tratamento da moxabustão separada por torta de ervas de ratos é uma operação chave.

No experimento anterior16, a tampa da gaiola de criação foi usada para amarrar e fixar os ratos. Para proteger o operador, os ratos precisam ser anestesiados antes de amarrar. No entanto, os ratos Sprague-Dawley (SD) são fáceis de temer e assustar. A operação de ligação pode facilmente causar inquietação nos ratos. Problemas como má fixação postural de ratos, desvio do posicionamento do ponto de acupuntura, aumento do tempo de experimento e lesão do operador ocorriam com frequência.

Além disso, se a amarração for muito apertada, pode facilmente causar dificuldades respiratórias em ratos, o que não é propício ao bem-estar animal. Se a ligação for muito frouxa, os ratos tendem a lutar e mover seus corpos, fazendo com que os cones de moxabustão caiam e queimem a pele, o que afeta os resultados experimentais. Com base na literatura, os experimentos com animais ainda envolvem ligação 16,17,18, e a maioria dos dispositivos experimentais só pode ser fixada, dificultando a implementação de outras técnicas, como a moxabustão19. Portanto, alcançar a integração da fixação e moxabustão no dispositivo experimental, garantindo o bem-estar animal e as especificações e eficiência experimentais, tornou-se uma das áreas de foco dos investigadores.

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Protocolo

O plano segue as Diretrizes de Cuidados com Animais da Universidade de Medicina Chinesa de Yunnan e foi aprovado pelo Comitê de Ética Animal da Universidade de Medicina Chinesa de Yunnan. O número experimental de revisão de bem-estar animal e ética é R-062021G098.

1. Dispositivo de plataforma experimental de moxabustão (Figura 1)

NOTA: Projetamos e construímos o dispositivo de plataforma experimental de moxabustão de ratos com base na distância entre os membros posteriores e anteriores de ratos e suas características comportamentais e fisiológicas.

  1. O tamanho do dispositivo de moxabustão
    1. Fabrique o dispositivo usando material de placa anti-batido e uma placa de madeira; o tamanho total é de 52 cm C x 23,5 cm L x 64 cm A e a área inferior do dispositivo é de 1222 cm2.
      NOTA: A operação de moxabustão é realizada na plataforma a esta altura, e os ratos podem ser mantidos calmos.
  2. A estrutura principal do dispositivo de moxabustão
    1. Faça a base de todo o dispositivo com material de placa anti-batido: A placa de base tem 52 cm C x 23,5 cm L com uma superfície branca. Certifique-se de que a parte inferior represente uma grande proporção do peso do dispositivo para estabilizar todo o dispositivo.
    2. Faça a plataforma elevada do dispositivo com madeira maciça, 60 cm de altura.
      NOTA: Esta é a estrutura principal de todo o instrumento, que estabiliza todo o dispositivo e suporta a colocação dos ratos em pé.
    3. Coloque cinco ranhuras de colocação acima da plataforma elevada, com um tamanho de 10 cm C x 6 cm L x 10 cm A. Use placas de intervalo (10 cm C x 1,3 cm L x 10 cm A) para separar as ranhuras de colocação, correspondendo à distância entre os membros dianteiro e traseiro do rato em pé.
  3. Os componentes do dispositivo de moxabustão
    1. Fixe duas tiras de aço inoxidável na parte superior das ranhuras de colocação. Cada tira fixa é uma barra de aço de borda igual de ângulo reto 40 cm C x 1,4 cm L (ambos os lados têm a mesma largura), com 15 furos. Três orifícios na tira fixa correspondem a cada ranhura, usados para fixar o parafuso da alça de ameixa e a mangueira móvel. A distância entre os furos adjacentes é de 7 cm.
    2. Coloque o parafuso ajustável da alça de flor de ameixa em ambas as extremidades da rede de isolamento térmico feita de aço inoxidável 304 e conecte à rede fixa de isolamento térmico e à tira fixa.
    3. Conecte a extremidade superior de cada slot de colocação com uma rede de isolamento térmico elevável cercada por uma estrutura de placa galvanizada. Conecte esta estrutura ao parafuso da alça da flor de ameixa em ambas as extremidades. Coloque o material de malha circular de aço inoxidável 304 no meio da rede de isolamento térmico para evitar que as cinzas caiam e escaldem os ratos e para fixar os ratos para facilitar a moxabustão.
    4. Fixe a extremidade inferior da mangueira móvel de aço inoxidável (34 cm de comprimento) com uma tira fixa de aço inoxidável e a extremidade superior com a placa de conexão da braçadeira do tubo.
      NOTA: A mangueira móvel é conveniente para ajustar a posição do bastão de moxa durante a operação de moxabustão da suspensão.
    5. Use a braçadeira de tubo feita de liga de alumínio para conectar a mangueira móvel de aço inoxidável e o clipe de moxa.
    6. Conecte o clipe de moxa de aço inoxidável à placa de conexão da braçadeira do tubo e fixe 8 a 10 tiras de moxa simultaneamente para moxabustão.
      NOTA: A mangueira móvel, a placa de conexão da braçadeira do tubo e o clipe de moxa podem ser usados para operação de moxabustão de suspensão em ratos.

2. Estabelecer um modelo de rato de insuficiência renal crônica

  1. Aclimatar 24 ratos machos SD livres de patógenos específicos (SPF) (com idade entre 3-4 semanas, pesando 180-200 g) por 1 semana. Mantenha a temperatura de alimentação em 18-24 °C; umidade relativa em 40-70%; e um ciclo de 12 h de luz e 12 h de escuridão. Abriga seis animais em cada gaiola e fornece acesso gratuito à água e ração comum.
  2. Estabelecer o modelo de CRF em ratos. De acordo com a tabela de números aleatórios e seguindo este protocolo, selecionar seis ratos como grupo controle e os 18 restantes como grupo modelo. Tratar o grupo controle (n = 6) com água destilada (10 mL∙kg-1dia-1) e ração normal e o grupo modelo (n = 18) com suspensão de adenina (150 mg kg-1dia-1) e ração hiperproteica por 21 dias.
  3. Observe e registre o peso corporal, o estado mental e a dieta diariamente. Após o final de 21 dias, certifique-se de que todos os animais estejam em jejum por 12 h antes da coleta de sangue orbital.
  4. Colete as amostras de sangue da órbita.
    1. Anestesiar os ratos brevemente com isoflurano. Agarre as costas do rato com a mão não dominante, segure a cabeça e o rosto do rato simetricamente entre o polegar e o indicador, exponha totalmente um lado do canto do rato e mantenha essa posição.
    2. Com a mão dominante, segure os capilares do ponto de fusão de 3 cm de comprimento entre o polegar e o indicador e gire lentamente o capilar, entrando no plexo venoso do canto interno do rato a 45 ° até que o sangue flua lentamente para fora do tubo.
    3. Colete 150-200 μL de amostras de sangue em tubos anticoagulantes de coleta de sangue de 0,5 mL, retire suavemente os capilares e pressione a órbita com algodão.
  5. Agite o tubo anticoagulante rápida e completamente. Meça a creatinina sérica plasmática (Scr) e o nitrogênio ureico no sangue (BUN) usando um analisador bioquímico automático.
    NOTA: O aumento de Scr e BUN indica o estabelecimento bem-sucedido do modelo de CRF.
  6. Divida os ratos em quatro grupos: A: seis ratos controle, sem tratamento; 18 ratos modelo divididos em grupos B: (grupo modelo: sem medicação ou moxabustão), C: (grupo losartana potássica: administrado 2,33 mg∙kg-1dia-1 por agulha de gavagem 12 G) e D: (grupo de moxabustão separada por bolo de ervas: moxabustão separada por bolo de ervas aplicada a Shenshu bilateral [B23] e Pishu bilateral [B20]).

3. Fase de tratamento

NOTA: Os grupos A e B não recebem nenhum tratamento, enquanto os grupos C e D serão tratados uma vez ao dia durante 24 dias, com dois dias de folga após 12 dias de tratamento.

  1. Preparações antes do tratamento
    1. Prepare 300 g de Radix astragali seco, 300 g de Radix Codonopsis seco, 200 g de Radix Rehmanniae Praeparata seco, 100 g de erva Epimedium de chifre curto torrado e 100 g de Cornus officinalis. Misture esses pós.
    2. Coloque 500 g de Artemisiae Argyi Folium no triturador de medicina tradicional chinesa (velocidade de 34.000 rotações/min) por 5 min, transfira o pó moído para um prato e, em seguida, peneire com uma peneira de 600 mesh. Após duas rodadas de triagem, elimine a moxa grossa e transfira a moxa fina para um saco para uso (Figura 2).
    3. Prepare o cone de moxa enchendo a moxa fina no molde para fazer um pequeno cone de moxa de 0,5 cm de diâmetro e 0,5 cm de altura. Alternativamente, malaxate a moxa entre os polegares e os dedos indicadores de ambas as mãos para formar cones de moxa ( Figura 3A ).
    4. Prepare o molde de bolo de ervas cortando uma seringa de 5 mL em quatro anéis de plástico circulares de 0,5 cm de espessura e colando os quatro anéis no mesmo plano horizontal (nos cantos de um plano quadrado com um comprimento lateral de 26 mm, Figura 3D).
    5. Faça bolos medicinais misturando o pó e a água na proporção de 1:1 e enchendo a mistura no molde de bolo de ervas (Figura 3E). Deixe o bolo medicinal na forma e guarde-o em local seco.
  2. Marcando os pontos de acupuntura
    1. Localize os pontos de acupuntura da seguinte forma: Shenshu (B23), ambos os lados da segunda vértebra lombar, um ponto de acupuntura de cada lado; Pishu (B20), o intercostal da 11ª vértebra torácica em ambos os lados, um ponto de acupuntura de cada lado (Figura 4).
      NOTA: Para a localização dos pontos de acupuntura, consulte o Manual de Acupuntura para Animais Experimentais20.
    2. Use uma luva de borracha grossa na mão não dominante para cobrir suavemente a cabeça do rato, localize os pontos de acupuntura nas costas do rato com a mão dominante e, em seguida, marque os pontos de acupuntura com um marcador de cor.
  3. Colocando os ratos
    1. Use luvas grossas de borracha. Use o polegar e os outros quatro dedos da mão dominante para beliscar levemente a pele das costas e do pescoço do rato. Use o polegar e o indicador da mão não dominante para beliscar a cauda do rato suavemente.
    2. Levante o rato, alinhe a cabeça do rato na ranhura de colocação da plataforma especial de moxabustão e mova o rato lentamente para frente. Certifique-se de que a pata dianteira do rato esteja perto da borda do slot de colocação e que o rato suba no slot.
      NOTA: Desinfete toda a plataforma de moxabustão antes de começar. Antes de pegar o rato, toque suavemente nas costas do rato ou fale com ele para acalmá-lo. Ajuste a altura da rede de isolamento de uma posição baixa (quando não estiver em uso) para a mais alta, o que é conveniente para os ratos entrarem.
  4. Fixação de ratos
    1. Coloque o polegar e o indicador de ambas as mãos no parafuso do parafuso de flor de ameixa em ambas as extremidades da rede de isolamento térmico. Desaperte o parafuso de flor de ameixa para abaixar a rede de isolamento térmico para a posição apropriada, perto da parte de trás do rato, mas sem causar compressão, e depois aperte os parafusos.
  5. Colocando a casquinha de moxa e o bolo medicamentoso.
    1. Coloque o molde preparado contendo o bolo medicinal na rede de isolamento térmico correspondente aos pontos de acupuntura de Pishu (B20) e Shenshu (B23) de acordo com as marcas dos pontos de acupuntura nos ratos. Existem quatro pontos de acupuntura, cada um dos quais corresponde a um bolo de remédios.
    2. Coloque o cone de moxa no bolo medicamentoso de forma suave e constante.
  6. Moxibustão
    1. Acenda o cone de moxa com um isqueiro e comece a moxabustão até que o cone de moxa queime e o calor residual se dissipe naturalmente (o bolo medicado úmido seca).
    2. Substitua o cone de moxa queimado por um novo cone de moxa e bolo medicamentoso no mesmo ponto de acupuntura e continue a moxabustão até que o cone de moxa queime e o bolo medicamentoso seque. Repita isso para um total de 5x em cada ponto de acupuntura.
      NOTA: Limpe e desinfete a rede de isolamento térmico elevável antes de substituí-la por um novo cone de moxa e bolo medicamentoso.
    3. Apague os cones de moxa e os bolos medicamentosos em um tanque de resíduos contendo água depois de queimar cinco cones de moxa em cada ponto de acupuntura.
      NOTA: Cada ponto de acupuntura recebe cinco cones de moxabustão; Cada cone de moxa pode ser substituído após a queima.
  7. Devolvendo o rato à gaiola
    1. Coloque a gaiola de criação vazia na frente do rato, perto da extremidade inferior da ranhura de colocação da plataforma de moxabustão, e fique parado. Bata levemente na nádega do rato para que o rato possa se mover da ranhura de colocação para a gaiola de alimentação. Depois que o rato entrar, abaixe a gaiola. Use a mão dominante para segurar o pelo nas costas do rato, segure-o com firmeza e coloque-o no chão para observação posterior.
    2. Observe se os ratos têm falta de ar, se o humor está estável e se a superfície da pele está escaldada. Se não houver anormalidade, coloque-o de volta na gaiola. Se estiver escaldado, aplique imediatamente a pomada escaldada na superfície da pele e coloque-a em uma única gaiola.

4. Fase de amostragem

  1. Após 24 dias de tratamento, prepare os ratos para 12 horas de jejum antes da amostragem.
  2. Despeje o isoflurano na máquina de anestesia a gás e anestesie os ratos com isoflurano a 2-3%. Após 2-3 min, certifique-se de que os reflexos estejam ausentes (aperte a cauda com uma pinça cirúrgica para verificar se eles não têm nenhum reflexo) e a existência contínua de batimentos cardíacos e mude para anestesia de manutenção com isoflurano a 1-1,5%.
  3. Colete 5 mL de sangue da aorta abdominal inserindo a agulha na aorta quase abdominal. Deixe o sangue repousar por 2 h, centrifugue a 2490 × g por 10 min a 4 ° C e transfira o sobrenadante sérico para um tubo de microcentrífuga de 1,5 mL para análise posterior.
  4. Anestesie profundamente os ratos por um longo período de tempo e retire sangue da aorta abdominal sob anestesia de manutenção. Além disso, eutanasiar os ratos por luxação cervical.
  5. Colha tecidos de ambos os rins retirando a fáscia renal bilateral e a gordura com tesoura e pinça cirúrgica e enxaguando com solução salina normal a 0,9%. Pesar os rins esquerdo e direito e registar o peso e a morfologia.
  6. Preserve o tecido renal cortando o rim esquerdo em seis partes e colocando-as em um tubo de centrífuga de 50 mL contendo paraformaldeído a 4% para imersão, fixação e preservação. Corte o rim direito em seis pedaços usando uma faca na direção longitudinal e duas facas na direção transversal. Coloque essas peças em seis criotubos de 2 mL e coloque-os imediatamente em nitrogênio líquido; transfira-os para um freezer a -80 °C para armazenamento.

5. Fase de detecção

  1. Use o tecido renal direito de tamanho apropriado para extração de proteínas, eletroforese em gel, transferência de membrana, bloqueio, incubação de anticorpos primários, anticorpo secundário, quimioluminescência, desenvolvimento, fixação e varredura de filmes.
  2. Use um sistema de análise de dados de imagem de gel (por exemplo, Image-Pro Plus 6.0) para analisar o valor de cinza da banda e calcular o conteúdo de cada proteína.
  3. Submeta os tecidos renais esquerdos à desidratação, clareia, inclusão em parafina, seccionamento (espessura de 4 μm), coloração com hematoxilina-eosina e tricrômico de Masson e observe as alterações patológicas21 no tecido renal sob microscópio óptico com aumento de 200x.

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Resultados

Morfologia renal
Como pode ser visto na Figura 5, em comparação com os outros grupos, o tamanho, a cor e a textura dos rins no grupo D (grupo erva-bolo-separada-moxabustão) estavam mais próximos dos do grupo normal. A morfologia renal do modelo e os grupos losartana potássica apresentaram diferentes graus de fibrose branca.

Peso do rim
A Figura 6 mostra que o peso do rim esquerd...

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Discussão

Clinicamente, o tratamento com acupuntura e moxabustão exige que os pacientes estejam calmos e relaxados, evitando raiva e fome excessivas e enfatizando a "paz". No entanto, a prática atual de experimentos de acupuntura e moxabustão ainda é baseada na premissa de amarrar animais, o que não é apenas contrário à intenção original do experimento, mas também não está de acordo com a prática clínica. Amarrar animais, deixando-os assustados e com raiva, aumentará rapidamente a adrenalina e outros hormônios em animais experimen...

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Divulgações

Os autores declaram não haver conflitos de interesse. O número de patente do dispositivo de plataforma experimental de moxabustão de ratos é ZL202320880924.X.

Agradecimentos

Agradecemos ao Professor Associado Huang e à Srta. Cui por sua orientação e apoio rigorosos a este artigo. O estudo foi apoiado por: 1. Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NSFC), 82160938, "Exploração da pesquisa de mecanismos na fibrose intersticial renal com moxabustão separada por bolo a partir do efeito interativo das vias de sinal ERK e Smad mediadas por TGF-β1"; 2. A Comissão de Saúde da Província de Yunnan "2020 Talentos de Reserva de MTC de Alto Nível" Projeto de Incubação (Desenvolvimento de MTC de Yunwei [2021] No.1); 3. Departamento de Ciência e Tecnologia da Província de Yunnan-Fundos Especiais Conjuntos de Pesquisa Básica da Medicina Chinesa (No.2019FF002-022, No.202101AZ70001-286, No.202301AZ070001-030); 4. Equipe de Inovação da Província de Yunnan Prevenindo e Tratando a Cerebopatia com Acupuntura e Tuina (2023).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Tubo bioquímico de heparina e lítio de 0,5 mLShijiazhuang Kangweishi Medical Equipment Co., LTD220518Coleta de sangue
0,9% de solução salina normalKunming Nanjiang Pharmaceutical Co., LTD/Enxágue
Tubo Eppendorf de 1,5 mLBeijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD12100024Subpacote
Tubo de criopreservação de 2 mLBaroque Biotechnology Co., LTD88-0151Rim embalado 
4 ° Refrigerador CHaier Group Co. LTDBCD-236WDGLLoja
Seringa de 5 mLSichuan New century Medical polymer products Co., LTD20211115Gavagem 
  Tubo de centrífuga de 50 mLBeijing Langeke Biotechnology Co., LTDCT-002-50ARim embalado 
Agulha de gavagem de 12 GPequim Zhongke Hengtian Technology Co., Ltd.Gavagem 12#55mm 
Placas de 96 poçosBeijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD11510Determinação da concentração de proteínas
 -80 ° C freezerThermo Fisher Scientific991Store
AdeninaBeijing Boaotuo Technology Co., LTDA0607Medicamento de moldagem
BCA desenvolvedorBiyuntian Biological Engineering Co., LTDP0010Determinação da concentração de proteína
BCL-2 reagente de anticorpo de proteínaAbcam Shanghai Trading Co., LTDab196495Western Blot
Caspase-3 proteína reagente de anticorposAbcam Shanghai Trading Co., LTDab184787Western Blot
Chemiluminescence Imaging SystemShanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., LTD100240073Pó de medicina chinesa de imagem de bandas de proteínas
O segundo hospital afiliado da Universidade de Yunnan de Medicina Chinesa/Cura
Marcadorprestained de cor de carga diretaBeijing Kangrunchengye Biotechnology Co., LTD (GenStar)M221Western Blot
Agulha de coleta de sangue descartávelLiuyang Sanli Ciência médica e desenvolvimento tecnológico Co., LTDYZB / País 0411-2010 Amostragem desangue
Recipiente de coleta de amostra de sangue venoso humano descartávelLiuyang Sanli Desenvolvimento de ciência e tecnologia médica Co., LTD20210901Amostragem
de sangueDK-30 Máquina automática de gelo de neveHenan Brothers instrument equipment Co., LTDSHDX0023para fabricação de gelo
Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTDBL520BConverta imagens latentes em filme exposto em balanças
eletrônicasShanghai Ran Hao Electronics Co., LTDJCS-31002CO peso corporal e o peso dos rins dos ratos foram medidos
Congelamento de micrótomos Thermo Fisher ScientificHM525 NX
Tianjin Micro nano core Technology Co., LTDPV2112001Z02410305Teste de função renal
Sistema de anestesia a gásZhongshi Technology Co., LtdZS-MV-1Anestesia
GlycineBeijing Soleibao Technology Co., Ltd.Cat#G8200Buffer de corrida, reagente de
coloração ocidental doTecnologia Co. de Beijing Soleibao, Ltd.G1120 Mancha
Alimentação de alta proteínaJiangsu Synergetics Biological Engineering Co., LTDXT19008Alimentação
Máquina de água ultrapura de laboratório inteligenteChongqing huachuag water treatment engineering co., LTD15LFiltração
Referência interna β-actinaJiangsu Qinke Biological Research Co., LTDAF7018Western Blot
IsofluranoJiangsu Zhongmu Beikang Pharmaceutical Co., Ltd20220701Anestesia
nitrogênio líquidoKunming Botai gelo seco vendas Co., LTD/Tecido renal congelamento
de losartana comprimidos de potássioMerck Sharp & Dohme (China) Investment Co., LTDJ20180054Cura
Moedor de tecido de alta velocidade de baixa temperaturaWuhan Servicebio technology CO., LTDSKZ3F20200191
Kit de coloração Maasonde tecido Beijing Soleibao Technology Co., Ltd.G1340que mancha
o metanolGuangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd20220519tampão ocidental
de transferência Mini-PROTEAN TetraBole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd552BR 233193Electroforese
MoxaO segundo hospital afiliado da universidade de Yunnan da medicina chinesa/
espectrofotômetro do espectro de Multiskan da curaAabsorbância e a concentração de proteína tecidual foram
detectadas tesoura operacionalZhangjiagang cidade Jinfeng veado faca de corte fábrica201118Corte a pele
ParaformaldeídoBeijing Lanjieke Biotechnology Co., LTDBL539A
Reagente de anticorpo de proteína PERKShanghai Pumai Biotechnology Co., LTD (CST China Agent)3192Western Blot
Microscópio de fluorescência positivaCarl Zeiss Suzhou Co., Ltd.5446000456Capturar imagem
Cola pré-fabricadaDerun Cheng (Pequim) Biological Co., LTD (ACE China Agent)B230418Western Blot
ProteinFind Goat Anti-Rabbit LgG (H + L), HRP ConjugadoShanghai Dinran electronic Technology Co., LTD (TRAN)HS101Western Blot
pulverizadorHefei Rongzhida pequenos eletrodomésticos Co., LTDRS-FS1401Chinês esmagado membrana
de PVDFMerckMillipore Corporation IPVH00010 Western Blot
Centrífuga refrigeradaHettich Precision Technology (Zhuhai) Co., LTDMIKRO 220RCentrífuga
RIPA lisadoBeijing Solaibao Technology Co., LTD (Solarbio)R0010tecido lítico
Jiangsu Kangjianhua Medical Supplies Co., LTD20160157Sangue do canthus interno
Pomada escaldante (pomada Zilian)Hospital Provincial de Medicina Tradicional Chinesa de Yunnan/Usado para o tratamento de queimaduras de moxabustão
Leite em pó desnatadoGuangzhou Saiguo Biotechnology Co., LTD (BIOFROXX)1172GR500Lâmina cirúrgica de tampão de bloqueio ocidental
Shanghai Medical Equipment Co., LTDJOBO10tecido renal de incisão
Shanghai Medical Equipment Co., LTDJ11010Lâmina de montagem
TS-200 Agitador orbitalHaimen Qilin Bell Manufacturing Co., Ltd.TS-8SFixação em gel
Tween 80MedChemExpressHY-Y1819  TBST 
pinçasShanghai Medical Equipment Co., LTDJD1050 Pegue a moxa
Disco de teste de função renal de drogas veterinárias * Micro núcleoTianjin Micro nano core Technology Co., LTD47031-35.5-0145-0227-62-220750Teste de função renal
Kit de substrato luminescente ECL de imagens visíveis Analisador bioquímico totalmente automático Micro tampão de transferência HE de moagem de tecido fixo para medicamentos Capilar de amostragem de Cabo de faca cirúrgica de

Referências

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