Uma abordagem abrangente para analisar os componentes celulares de coágulos sanguíneos cerebrais

Resumo

Este estudo descreve um método rápido e eficaz para a análise de componentes celulares de coágulos sanguíneos cerebrais através da dissolução de coágulos, coloração celular e exame de sangue de rotina.

Resumo

A trombose cerebral, um coágulo sanguíneo em uma artéria ou veia cerebral, é o tipo mais comum de infarto cerebral. O estudo dos componentes celulares dos coágulos sanguíneos cerebrais é importante para o diagnóstico, tratamento e prognóstico. No entanto, as abordagens atuais para estudar os componentes celulares dos coágulos são baseadas principalmente na coloração in situ , o que é inadequado para o estudo abrangente dos componentes celulares porque as células estão firmemente envolvidas nos coágulos. Estudos anteriores conseguiram isolar uma enzima fibrinolítica (FEs) de Sipunculus nudus, que pode degradar diretamente a fibrina reticulada, liberando os componentes celulares. Este estudo estabeleceu um método abrangente baseado na FEF para estudar os componentes celulares do trombo cerebral. Esse protocolo inclui dissolução de coágulos, liberação de células, coloração de células e exame de sangue de rotina. De acordo com esse método, os componentes celulares puderam ser estudados quantitativa e qualitativamente. Os resultados representativos dos experimentos que utilizam este método são mostrados.

Introdução

A doença cerebrovascular é uma das três principais doenças que podem ameaçar a saúde humana, dentre as quais a doença cerebrovascular isquêmica é responsável por mais de 80%. A trombose cerebral e a trombose venosa cerebral são as doenças isquêmicas cerebrovasculares mais afetadas na atualidade, causadas principalmente por coágulos sanguíneos^cerebrais1,2. Se o tratamento não for feito adequadamente, terá altas taxas de incapacidade e mortalidade e alta taxa de recorrência após a alta^hospitalar3.

Recentemente, um número crescente de estudos tem demonstrado que....

Protocolo

A pesquisa foi realizada de acordo com as diretrizes institucionais do Comitê de Ética Médica da Universidade de Huaqiao. Os coágulos sanguíneos cerebrais foram removidos cirurgicamente e coletados no Quanzhou First Hospital, afiliado à Fujian Medical University, com consentimento informado dos pacientes.

1. Pré-tratamento do coágulo sanguíneo

1. Coloque os coágulos em um prato limpo, adicione 5 mL de soro fisiológico com um tweezer, agite o prato suavemente e retire o soro fisiológico com uma pipeta.
   NOTA: Repita o enxágue três vezes.
2. Corte os coágulos em pedaços menores (menores que 5 mm x 5 mm x 5 mm)....

Resultados

Na fase inicial do processo de degradação, verificou-se que os coágulos sanguíneos tinham uma estrutura compacta vermelha, e a solução de trabalho era incolor. Após a incubação por 30 min, a solução de trabalho ficou vermelha clara, o que indicou que as células sanguíneas cruzadas foram liberadas na solução de trabalho. A maioria dos coágulos foi dissolvida ao prolongar o tempo de incubação para 5 h, e a solução de trabalho tornou-se vermelha clara. Ao contrário, não houve alteração significativa no grupo salino fisiológ.......

Discussão

O FEs é um agente fibrinolítico capaz de degradar a fibrina de forma direta e eficaz^12,16. Aqui, o sFE foi empregado para degradar a fibrina reticulada dos coágulos sanguíneos cerebrais, liberar as células fechadas dentro dos coágulos e analisar qualitativa e quantitativamente os componentes celulares dos coágulos. Os dados de microscopia e o exame de sangue de rotina indicaram que as células fechadas foram liberadas dos coágulos sanguíneos. Além disso, os tipos .......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Placa de Reação de Aglutinação	ROTEST	RTB-4003
Analisador de Hematologia Automático	SYSMEX	XNB2
Esterilizador Automático de Vapor de Pressão Vertical	SANYO	MLS-3750
(1.5 mL)	Biosharp	BS-15-M
Bancada	Incubadora de Temperatura Constante AIRTECH	BLB-1600
	JINGHONG	JHS-400
Prato de Cultura (100 mm)	Forno	de
DHG	SENXIN	DGG-9140AD
Balança Analítica Eletrônica	DENVER	TP-213
Membrana de Filtro (0.22 µ m)		Millex GP
	Cence	H1650-W
	CITOGLAS	01-30253-50
Milli-Q Referência	Millipore	Z00QSV0CN
solução salina normal	CISEN	H37022337
microscópio óptico	Nikon	ECLIPSE E100
Parafilm	Bemis	PM-996
solução salina tamponada com fosfato	Beyotime	C0221A
(1 mL)	Axygene	T-1000XT-C
(200 µ L)	Axygene	T-200XT-C
Pipettor (1 mL)	Thermo Fisher Scientific	ZY18723
Pipettor (200 µ L)	Thermo Fisher Scientific	ZY20280
Bisturi	MARTOR	23111
Oscilador de Vórtice de Pequeno Porte	Kylin-Bell	VORTEX KB3
Pinça	Hystic	HKQS-180
Wright Solução de coloração	Beyotime	C0135-500ml

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