Explorando escolhas de história de vida: usando a temperatura e o tipo de substrato como fatores de interação para as preferências de larvas e fêmeas de mosca-varejeira

Summary

Neste trabalho, são detalhados dois protocolos para avaliação da fonte alimentar e preferências de oviposição em larvas e fêmeas de moscas-varejeiras. Estes compreendem quatro opções com dois fatores interagentes: tipo de substrato e temperatura. Os ensaios permitem determinar a preferência da fonte alimentar das larvas e a preferência do sítio de oviposição para as fêmeas.

Abstract

As moscas-varejeiras (Diptera: Calliphoridae) apresentam uma ampla variedade de estilos de vida larval, tipicamente classificados como parasitismo obrigatório, parasitismo facultativo e sapro-necrofagia completa. Várias espécies parasitárias, obrigatórias e facultativas, são consideradas de importância sanitária e econômica, pois suas larvas podem causar miíase (infestação de larvas em tecidos vivos). No entanto, vale ressaltar que a fêmea adulta desempenha um papel decisivo na escolha do local de oviposição e, portanto, determina em grande parte o hábito alimentar e as condições de desenvolvimento das larvas. Neste estudo, dois protocolos são propostos para testar a preferência alimentar das larvas e a preferência do local de oviposição das fêmeas, considerando dois fatores que interagem: tipo de substrato da carne e temperatura. Os dispositivos aqui apresentados permitiram testar larvas e fêmeas grávidas de Lucilia cuprina em um ensaio de quatro escolhas com duas temperaturas (33 ± 2 °C e 25 ± 2 °C) e dois tipos de substratos cárneos (carne fresca suplementada com sangue e carne podre de 5 dias de idade). Larvas ou fêmeas grávidas podem optar por escavar ou colocar seus ovos, respectivamente, em qualquer um dos seguintes: carne podre a 25 °C (simulando uma condição de espécie necrófaga), carne fresca suplementada com sangue a 33 °C (simulando uma condição de espécie parasita) e dois controles, carne podre a 33 °C ou carne fresca suplementada com sangue a 25 °C. A preferência é avaliada contando-se o número de larvas ou ovos postos em cada opção para cada repetição. A comparação dos resultados observados com uma distribuição aleatória permitiu estimar a significância estatística da preferência. Os resultados indicaram que as larvas de L. cuprina têm forte preferência pelo substrato podre a 25 °C. Por outro lado, a preferência pelo local de oviposição pelas fêmeas foi mais variada para o tipo de carne. Esta metodologia pode ser adaptada para testar a preferência de outras espécies de insetos de tamanho semelhante. Outras questões também podem ser exploradas usando condições alternativas.

Introduction

As moscas, particularmente os muscóides caliptratos (incluindo moscas-varejeiras, moscas domésticas, moscas-bot e moscas-da-carne, entre outros), exibem uma ampla gama de estilos de vida, englobando comportamentos parasitários e necrossaprófagos¹. As espécies parasitárias tipicamente causam miíase, uma infestação de tecidos vivos por larvas (larvas)². Na família Calliphoridae, tanto as espécies parasitárias obrigatórias quanto as facultativas são as principais pragas pecuárias responsáveis por perdas econômicas e precários de bem-estar animal devido às infestações de larvas 2,3,4,5,6,7.....

Protocol

As amostras de moscas foram obtidas utilizando-se armadilhas e não em animais infestados. Uma licença SISBIO (67867-1) foi emitida para coletar e manter moscas da família Calliphoridae em cativeiro em condições de laboratório. Amostras de insetos são isentas de avaliação ética em pesquisas no Brasil. Carne e sangue bovinos foram obtidos comercialmente, e nenhuma autorização ética foi necessária.

1. Preferência alimentar das larvas

1. Preparo das placas de Petri contendo ágar 2%
   1. Prepare quatro pratos de Petri com 2% de ágar. Para isso, adicione 6 g de ágar bacteriológico a 300 mL de água e derreta essa mistura ....

Results

Para demonstrar a eficácia dos métodos apresentados, os experimentos foram conduzidos utilizando uma população de laboratório de Lucilia cuprina (família: Calliphoridae), uma mosca-varejeira parasita facultativa². Todo o conjunto de dados brutos obtidos para esta espécie pode ser encontrado no Arquivo Suplementar S3 com os resultados para os testes de preferência larval e fêmea de substrato. Para avaliar se as larvas e fêmeas apresentam preferência por algum substrato, os.......

Discussion

A compreensão da evolução dos hábitos alimentares, particularmente no contexto do parasitismo em moscas-varejeiras, requer o exame das preferências de substrato ao longo de diferentes fases da vida para alimentação ou oviposição. Portanto, neste estudo, métodos robustos e diretos foram propostos para investigar preferências de substrato em larvas e fêmeas de moscas-varejeiras. Esses métodos foram testados em Lucilia cuprina, uma mosca varejeira parasita facultativa². Curiosamente, os expe.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Agar	Sigma-Aldrich	05038-500G	Para microbiologia
Cartões pretos	-	-	70x50 cm
Sangue bovino com anticoagulante	-	-	50% de sangue bovino puro com anticoagulante (3,8% de citrato de sódio) + 50% de água filtrada
Carne bovina moída	-	-	Cerca de 7-8% de gordura
Escova	-		-Feito com tubo cônico de plástico
	Falcão ou	Genérico-50	mL
Recipientes de vidro em forma de cruz	Feito à mão	NA	48x48 cm, 8 cm de altura e 8 cm de largura
Erlenmeyer	Vidrolabor	NA	500 mL
70% Etanol	Synth	A1084.01.BL	70% etanol etílico absoluto + 30% água filtrada
Cilindro graduado	Nalgon ou		Genérico-500 mL e 50 mL
Almofada de aquecimento			cm dimensões, 40 W, 127 V
Termômetro infravermelho	HeTaiDa	HTD8808	Termômetro corporal sem contato (Taxa de amostragem: 0,5 S, Precisão: ± 0,2 &graus; C, Medição: 5-15 cm)
Placa de Petri (Vidro)	Precisão	NA	150x20 mm dimensões
			(Nota: as placas de Petri podem ser de plástico se usadas apenas uma vez)
Placa de Petri PS	Cralplast	18130	60x15 mm dimensões
Pipeta de plástico Pasteur	-	-	3 mL (volume total)
Citrato de sódio	Synth	C11033.01.AG	3,8% Citrato de sódio (38 g diluído em 1L de água filtrada)
Colheres	-	-	É necessária mais de uma colher. Use um para cada tipo de substrato de carne. De preferência em aço inoxidável.
Espátula de aço inoxidável	Genérica-Extremidade	plana e extremidade de colher
Estereomicroscópio	Lentes Bioptika-WF10X		/22
Pinça	-	-	Tira
luz led branca	e fina NA	NA	4.8 W, 2x0.05 mm², 320 lúmens, Temperatura de cor:6500 K (branco)