Avaliação da Microarquitetura Óssea Trabecular em Modelo de Osteoporose em Camundongos

Junjie Li; Yuchen Hu; Haoming You; Ruxu Li; Qiang Ran; Tianxin Ouyang; Yong Huang

doi:10.3791/65880

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Artigo de método

Avaliação da Microarquitetura Óssea Trabecular em Modelo de Osteoporose em Camundongos

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DOI:

10.3791/65880

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8 de setembro de 2023

Junjie Li¹ , Yuchen Hu¹ , Haoming You¹ , Ruxu Li¹ , Qiang Ran¹ , Tianxin Ouyang¹ , Yong Huang²

¹Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Department of Orthopedics, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Neste artigo

Resumo

Este protocolo apresenta um método econômico e eficiente para avaliação quantitativa da microarquitetura óssea em um modelo de osteoporose em camundongos, combinando técnicas de coloração pela hematoxilina-eosina (HE) e microtomografia computadorizada (Micro-CT).

Resumo

A microestrutura óssea refere-se à disposição e qualidade do tecido ósseo em nível microscópico. A compreensão da microestrutura óssea do esqueleto é crucial para obter informações sobre a fisiopatologia da osteoporose e melhorar seu tratamento. No entanto, o manuseio de amostras ósseas pode ser complexo devido às suas propriedades duras e densas. Em segundo lugar, softwares especializados dificultam o processamento e a análise de imagens. Neste protocolo, apresentamos uma solução econômica e de fácil utilização para análise da microestrutura óssea trabecular. Etapas detalhadas e precauções são fornecidas. A micro-TC é uma técnica de imagem tridimensional (3D) não destrutiva que fornece imagens de alta resolução da estrutura óssea trabecular. Permite a avaliação objetiva e quantitativa da qualidade óssea, razão pela qual é amplamente considerado como o método padrão-ouro para avaliação da qualidade óssea. No entanto, a histomorfometria permanece indispensável, pois oferece parâmetros cruciais em nível celular, preenchendo a lacuna entre avaliações bidimensionais (2D) e 3D de espécimes ósseos. Quanto às técnicas histológicas, optou-se pela descalcificação do tecido ósseo e, em seguida, realizar a tradicional inclusão em parafina. Em resumo, a combinação desses dois métodos pode fornecer informações mais abrangentes e precisas sobre a microestrutura óssea.

Introdução

A osteoporose é uma doença óssea metabólica prevalente, especialmente entre os idosos, e está associada a um risco aumentado de fraturas por fragilidade. À medida que a osteoporose se torna mais comum na China¹, haverá uma demanda crescente para o estudo das estruturas ósseas de pequenos animais ^2,3. Os métodos anteriores de mensuração da perda óssea baseiam-se nos resultados da absorciometria bidimensional de raios-X de dupla energia. No entanto, isso não capta as alterações na microestrutura arquitetural do osso trabecular, que é um fator-chave para a resistência^esqu....