Errata: Um protocolo simples de ensaio de fosseta para visualizar e quantificar a reabsorção osteoclástica in vitro

Summary

Uma errata foi emitida para: Um protocolo simples de ensaio de fosseta para visualizar e quantificar a reabsorção osteoclástica in vitro. A seção Protocolo foi atualizada.

Abstract

Isso corrige o artigo 10.3791/64016

Protocol

Uma errata foi emitida para: Um protocolo simples de ensaio de fosseta para visualizar e quantificar a reabsorção osteoclástica in vitro. A seção Protocolo foi atualizada.

A etapa 1.1 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Preparação de solução estoque de cálcio (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1,37 mM NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O em tampão Tris)

Para:

Preparação da solução estoque de cálcio (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1,37 M NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O em tampão Tris)

A etapa 1.1.1 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Prepare o tampão Tris 1,0 M e ajuste o pH para 7,4 usando HCl 1 M.

Para:

Prepare o tampão Tris 50 mM e ajuste o pH para 7,4 usando HCl 1 M.

A etapa 1.1.2 do Protocolo foi atualizada de:

Coloque um copo de vidro em um agitador magnético e adicione 100 mL de tampão Tris 1,0 M.

Para:

Coloque um copo de vidro em um agitador magnético e adicione 100 mL de tampão Tris de 50 mM.

A etapa 1.2 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Preparação da solução-mãe de fosfato (11,1 mM Na2HPO4·H2O, 42 mM NaHCO3 em tampão Tris)

Para:

Preparação da solução-mãe de fosfato (11,1 mM Na2HPO4, 42 mM NaHCO3 em tampão Tris)

A etapa 1.2.1 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Coloque um copo de vidro em um agitador magnético e adicione 100 mL de tampão Tris 1,0 M.

Para:

Coloque um copo de vidro em um agitador magnético e adicione 100 mL de tampão Tris de 50 mM.

A etapa 1.2.2 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Pesar 0,158 g de Na2HPO4·H2O e 0,353 g de NaHCO3 e dissolver no tampão Tris um a um.

Para:

Pesar 0,158 g de Na2HPO4 e 0,353 g de NaHCO3 e dissolver no tampão Tris um a um.

A etapa 1.3.1 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Prepare 30 mL de solução de trabalho misturando 15 mL de tampão Tris 1,0 M, 7,5 mL de solução estoque de cálcio (etapa 1.1.4) e 7,5 mL de solução estoque de fosfato (etapa 1.2.3). Filtrar a solução com um filtro de 0,2 μm.

Para:

Prepare 30 mL de solução de trabalho misturando 15 mL de tampão Tris 50 mM, 7,5 mL de solução estoque de cálcio (etapa 1.1.4) e 7,5 mL de solução estoque de fosfato (etapa 1.2.3). Filtrar a solução com um filtro de 0,2 μm.

A etapa 1.4 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Preparação de solução de fosfato de cálcio (2,25 mM Na2HPO4·H2O, 4 mM CaCl2·2H2O, 0,14 M NaCl, 50 mM Tris base em ddH2O)

Para:

Preparação de solução de fosfato de cálcio (2,25 mM Na2HPO4, 4 mM CaCl2·2H2O, 0,14 M NaCl, 50 mM Tris base em ddH2O)

A etapa 1.4.1 do Protocolo foi atualizada a partir de:

Adicione 2 mL de HCl 1 M a 40 mL de água deionizada em um béquer com uma esfera de agitação magnética e dissolva 0,016 g de Na2HPO4·H2O, 0,0295 g de CaCl2·2H2O, 0,409 g de NaCl e 0,303 g de base Tris um por um.

Para:

Adicione 2 mL de HCl 1 M a 40 mL de água deionizada em um béquer com uma esfera de agitação magnética e dissolva 0,016 g de Na2HPO4, 0,0295 g de CaCl2·2H2O, 0,409 g de NaCl e 0,303 g de base Tris um por um.