Estabelecimento de um modelo de exposição à polpa murina com uma nova mordaça bucal para pesquisa de pulpite

Summary

Este artigo apresenta um protocolo simplificado para estabelecer um modelo de pulpite em camundongos usando um mordaça bucal inovador, seguido de análise histológica subsequente.

Abstract

A pulpite, uma causa comum de perda natural do dente, leva à necrose e perda de bioatividade na polpa dentária inflamada. Desvendar os mecanismos subjacentes à pulpite e seu tratamento eficiente é um foco contínuo da pesquisa endodôntica. Portanto, entender o processo inflamatório dentro da polpa dentária é vital para melhorar a preservação da polpa. Comparado a outros experimentos in vitro , um modelo de pulpite murina oferece um contexto mais autêntico e geneticamente diverso para observar a progressão patológica da pulpite. No entanto, o uso de camundongos, apesar de sua relação custo-benefício e acessibilidade, apresenta dificuldades devido ao seu pequeno tamanho, má coordenação e baixa tolerância, dificultando os procedimentos intrabucais e odontológicos. Este protocolo apresenta um novo design e aplicação de uma mordaça bucal para expor a polpa do camundongo, facilitando procedimentos intraorais mais eficientes. A mordaça bucal, composta por uma arcada dentária prontamente disponível para a maioria dos dentistas e pode agilizar significativamente a preparação cirúrgica, mesmo para procedimentos iniciais. Micro-CT, coloração de hematoxilina-eosina (HE) e coloração de imunofluorescência foram usadas para identificar alterações na morfologia e expressão celular. O objetivo deste artigo é ajudar os pesquisadores a estabelecer um procedimento mais reprodutível e menos exigente para criar um modelo de inflamação pulpar usando esta nova mordaça bucal.

Introduction

A polpa dentária, parte integrante do dente, é responsável por múltiplas funções essenciais, como fornecimento de nutrientes, formação de dentina, função sensorial e reações de defesa¹. No entanto, a polpa dentária, circundada por tecido duro, é suscetível a lesões e danos causados por cárie profunda, pulpite, trauma ou terapias subsequentes ^2,3. A ausência de polpa dentária funcional aumenta o risco de fragilidade dentária⁴. Além disso, a perda de vitalidade pulpar em dentes permanentes jovens pode afetar adversamente a maturação dentária, e as técnicas atuais d....

Protocol

Os procedimentos experimentais neste estudo foram aprovados pelo comitê de ética da Escola de Estomatologia da China Ocidental, Universidade de Sichuan (WCHSIRB-D-2021-125). Camundongos C57BL/6 adultos foram obtidos da Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China. Toda a coroa do primeiro molar superior entra em erupção 21 dias após o nascimento. Os camundongos para cirurgia devem ter mais de 21 dias com vitalidade normal¹¹. Aqui, camundongos de 6 a 8 semanas de idade foram usados para modelagem. A Figura 1 é um fluxograma que mostra o protocolo utilizado.

1. Preparo ....

Results

O procedimento descrito acima foi realizado no primeiro molar superior direito de camundongos C57BL/6 de 3, 6-8 semanas de idade, enquanto os primeiros molares superiores esquerdos foram preservados como controle. Os resultados histológicos e de imunofluorescência do controle em branco, amostras de pulpite de 12 h e pulpite de 24 h foram utilizados para demonstração.

Seguindo o protocolo de análise de TC de Goldman et ^al.15, a exposição pulpar foi confirmada por meio de.......

Discussion

Como o único tecido mole dentro dos dentes, a polpa dentária desempenha um papel crucial na manutenção da bioatividade do dente, mas permanece altamente sensível. A preservação dessa polpa vital tornou-se a abordagem inicial preferida em tratamentos endodônticos recentes, necessitando de uma compreensão abrangente dos mecanismos inflamatórios da polpa dentária¹⁶. A flutuação espaço-temporal do microambiente inflamatório e as interações entre os tipos de células residentes na pulpite dificultam sua.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
< > Animal< / strong >
camundongos C57 / B6J	Gempharmatech Experimental Animals Company	C57 / B6J	Para o estabelecimento da exposição à polpa
< forte > Equipamento< / forte >
seringa de 1 mL	Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instrumentos Co. LTD.	SB1-074 (IV)	Aplicar em injeção de drogas.
8# C+ arquivo	Readysteel	0010047	Aplicar na exposição do teto da câmara pulpar.
Solução de mistura de			10% cloridrato de cetamina+ 5% xilazina + 85% solução salina isotônica estéril.
Solução de coloração DAPI	Beyotime	C1005	Aplicar na coloração de imunofluorescência para contra-coloração do núcleo.
Peça de mão dental de alta velocidade	dental Jing yuan tecnologia de comércio eletrônico	WJ-422	Aplique na exposição à polpa.
Cortador de fio pesado	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	nenhum	Aplique o corte inarc.
Kit de coloração de hematoxilina e eosina	Biosharp	BL700B	Para a análise histológica das lâminas.
Anticorpo de IL-6	Novus	NBP2-89149	Aplicar na coloração de imunofluorescência para detectar a inflamação da polpa dentária.
Cetamina (cloridrato de cetamina)	Vet One, Boise, Idaho, EUA	C3N VT1	100mg / kg, IP. Aplicar na nestetização.
Torneira médica	3M	1530	Aplicar na imobilização de ratos.
Fio de arco ortodôntico	Xangai Wei Rong Aparelho Médico Co. LTD.	K417	Diâmetro de 8µ m
Broca dentária redonda (0,6 mm)	Shofu global	072208	Aplicar na remoção do esmalte e da camada superficial de dentina.
Alicate de dobra de laço jovem	Jirui Medical Instrument Co., Ltd.	nenhum	Aplique na flexão de arco.