A cirurgia de bypass duodenal-jejunal (DJB) pode melhorar o metabolismo da glicose e reduzir a resistência à insulina. Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo de mouse estável e confiável de DJB.
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Artigo de método
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A cirurgia de bypass duodenal-jejunal (DJB) pode melhorar o metabolismo da glicose e reduzir a resistência à insulina. Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo de mouse estável e confiável de DJB.
A prevalência de obesidade e diabetes tipo 2 é um sério problema de saúde global. A obesidade é um importante fator patogênico no diabetes tipo 2, doenças cardiovasculares e alguns tipos de câncer. A cirurgia bariátrica oferece uma opção de tratamento eficaz e de longo prazo para obesidade e diabetes. A gastrectomia vertical (SG) e o bypass gástrico em Y de Roux (BGYR) são amplamente reconhecidos como as cirurgias bariátricas mais populares. Além disso, várias cirurgias bariátricas exploratórias demonstraram efeitos terapêuticos promissores. O bypass duodenal-jejunal (DJB), especificamente adaptado para diabéticos com baixo índice de massa corporal, mostrou resultados metabólicos benéficos. No entanto, seus benefícios metabólicos independentes do peso não são totalmente compreendidos devido a modelos animais limitados. Neste artigo, descrevemos os protocolos de cuidados otimizados e as técnicas cirúrgicas para a realização da cirurgia DJB em camundongos diabéticos obesos induzidos por dieta (DIO). O uso de um modelo de camundongo contribui para uma melhor compreensão da natureza das alterações induzidas pela cirurgia de DJB, facilitando a prática clínica relacionada.
A obesidade e o diabetes tipo 2 são as doenças crônicas mais comuns no mundo, e sua prevalência está aumentando entre os jovens1. A cirurgia bariátrica é o tratamento mais eficaz para obesidade e diabetes, facilitando a estabilidade da glicose no sangue a longo prazo, além de melhorar as complicações associadas à obesidade 2,3. Existem vários tipos de cirurgia bariátrica, classificadas por reduzirem o volume gástrico ou a absorção intestinal; estes incluem restritivo, malabsortivo e combinação 4,5.
O bypass duodenal-jejunal (DJB) foi desenvolvido pela primeira vez por Rubino e Marescaux, que demonstraram que o diabetes tipo 2 poderia ser aliviado conectando o duodeno e o jejuno, em vez de reduzir o volume gástrico 6,7. O DJB preserva todo o estômago e contorna todo o duodeno e jejuno proximal. O intestino é dividido em membros biliopancreáticos, digestivos e comuns 6,8. O DJB compartilha algumas semelhanças com as cirurgias bariátricas, incluindo bypass gástrico em Y de Roux (BGYR), minibypass gástrico, bypass biliopancreático, desvio duodenal e gastrectomia vertical com DJBmais 9. Comparado ao BGYR, o DJB não requer anastomose gastrointestinal, o que reduz o tempo operatório e melhora a taxa de sucesso do procedimento. O DBI é semelhante ao BGYR na melhora do metabolismo da glicose, mas não afeta o peso corporal10. Após a cirurgia de DJB, a entrega rápida de alimentos ao intestino delgado distal estimula a secreção do peptídeo-1 semelhante ao glucagon (GLP-1), resultando em melhora do metabolismo da glicose11,12.
O uso de modelos animais é essencial para a compreensão das vias metabólicas, celulares e moleculares. Modelos animais de cirurgia bariátrica têm contribuído para a compreensão dos potenciais mecanismos subjacentes à obesidade e ao diabetes13,14. No entanto, devido às diferenças fisiológicas entre as espécies, é impossível replicar perfeitamente as doenças humanas em modelos animais15. Entre os vários modelos animais disponíveis para fins de pesquisa, o modelo de camundongo com obesidade induzida por dieta (DIO) se assemelha mais à obesidade humana e à síndrome metabólica16. Os camundongos foram selecionados para a cirurgia de DJB para determinar a viabilidade da cirurgia e fornecer técnicas para pesquisas futuras. Este manuscrito fornece um resumo abrangente dos aspectos técnicos e detalhes experimentais da cirurgia DJB.
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Todas as etapas do protocolo descritas abaixo seguem as diretrizes do Comitê de Cuidados e Uso de Animais do Hospital Geral do Comando do Teatro Sul sob o número de aprovação 2020112501.
1. Preparação geral pré-operatória
NOTA: Trinta camundongos C57BL/6 machos de 6 semanas de idade foram comprados. Os camundongos foram alojados em um laboratório Specific Pathogen-Free (SPF) sob um ciclo claro/escuro de 12 h; temperatura de 22 ± 2 °C; e umidade, 55-65%. Os ratos tiveram acesso gratuito à água e foram alimentados com uma dieta de 60% de gordura por 6 semanas para induzir a obesidade. Uma injeção intraperitoneal de estreptozotocina 40 mg/kg foi administrada por 5 dias para induzir diabetes17. Entre os trinta camundongos, vinte e dois camundongos foram rastreados para glicemia aleatória > 300 mg / dL e aleatoriamente designados para os grupos DJB (n = 15) e cirurgia simulada (n = 7). Oito camundongos foram excluídos do experimento devido à glicemia abaixo do padrão.
2. Bypass jejunal duodenal: Procedimento cirúrgico

Figura 1: Procedimento de bypass duodenal-jejunal. (A) Localização do jejuno 5 cm distal ao ligamento de Treitz. (B) Ligue duas vezes o jejuno com seda 6-0, cortada no meio da ligadura. (C) Anastomose jejunal-jejunal. (D) Faça uma incisão de 0,5-0,6 cm e suture a parede posterior. (E-F) Anastomose jejunal-jejunal completa. (G) Puxe o jejunal distal para o duodeno 1 cm abaixo do piloro. (H) Anastomose duodenal-jejunal. (I) Corte a anastomose duodenal-jejunal com uma incisão de 0,5-0,6 cm e suture a parede posterior com uma sutura contínua simples. (JK) Anastomose duodenal-jejunal completa. (L) A 2 mm da anastomose distal à duodenal-jejunal, ligar duas vezes o duodeno com seda 6-0 e cortar no meio da ligadura. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
3. Cuidados gerais pós-operatórios

Figura 2: O diagrama da cirurgia DJB. (A) Anastomose duodenal-jejunal. (B) Anastomose jejunal-jejunal. (C) Membro biliopancreático. (D) Membro digestivo. (E) Membro comum. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 3: Anatomia da cirurgia de DJB. (A) Anastomose duodenal-jejunal. (B) Anastomose jejunal-jejunal. (C) Membro biliopancreático. (D) Membro digestivo. (E) Membro comum. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
4. Avaliação pós-operatória dos parâmetros metabólicos
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Condições gerais
O tempo operatório médio para o procedimento de DJB foi de 84,5 ± 2,6 min. Quinze camundongos foram submetidos à cirurgia de DJB, nove camundongos sobreviveram. Conforme mostrado na Tabela 1, a maioria dos óbitos ocorreu durante a cirurgia ou nos 7 dias seguintes. As causas de morte pós-operatória foram sangramento (n=2) no 1º dia de pós-operatório, vazamento de anastomose (n=1) no 4º dia de pós-operatório, obstrução da anastomose (n=2) no 7º dia de pós-operatório e c...
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Em 1953, Varco et al.18 realizaram a primeira derivação jejuno-ileal como início da cirurgia bariátrica. Desde então, inúmeras cirurgias bariátricas foram realizadas por cirurgiões. Essas cirurgias resultaram em perda de peso e melhora das complicações metabólicas 4,19,20. Além disso, em 1967, Mason e Ito21 realizaram o primeiro bypass gástrico em ...
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Os autores declaram não haver conflitos de interesse.
Este estudo foi apoiado por uma bolsa do Projeto de Planejamento de Ciência e Tecnologia da Província de Guangdong, na China (nº 202002020069).
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Afastador abdominal | F.S.T | 17000-03 | Colibri Retractor -3cm, afastador faixa 1.5cm/3cm de comprimento |
| solução de pentobarbital de sódio a 1% | Guangzhou Chemical Reagent Factory | / | Dissolveu 500mg de pentobarbital sódico em pó em 50ml de soro fisiológico para obter solução de pentobarbital sódica a 1%. |
| Benzilpenicilina sódica para injeção | North China Pharmaceutical Company Ltd. | F2062121 | Penicilina |
| Buprenorfina | Guangzhou Reagente Químico Fábrica | / | Analgesia |
| Buprenorfina | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | / | Analgésico |
| Tampão de citrato de sódio de ácido cítrico | LEAGENE | R00522 | Solução tampão |
| Cotonetes | HaoZheng Medical | 60220610 | Cotonetes |
| de algodãoPasta depilatória | Veet | AAPR-S222 | Creme de depilação |
| Etiqueta de orelha | ZEYA | SUS304 | Marca de orelha |
| Cobertor elétrico | ZOSEN | ZS-CWDRT | Almofada térmica |
| Balança eletrônica | WETTLER TOLEDO | 20060902-6 | Meça o peso |
| Pó nutricional enteral | Abbott Laboratories | / | Nutrition powder |
| Eye pomada | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | / | Proteja os olhos |
| Glicosímetro | Roche | 6993788001 | Avalie a glicose no sangue |
| Graphpad Prism versão 9.4.1 | Software GraphPad | versão 9.4.1 | Software para análise estatística |
| Dieta rica em gordura (Dieta de roedores purificados com alto teor de gordura [60FDC]) | Dyets | 112252 | 60kcal% Dieta rica em gordura |
| Micro Fórceps | Jinzhong Medical | 18-1140 | Micro fórceps |
| Micro porta-agulha | Jinzhong Medical | EMT-160-Z | Porta-agulha |
| Micro Tesoura | Jinzhong Medical | YBC010 | Micro tesoura |
| Microscópio câmera | LAPSUN | E 2000 | Vídeo |
| Tesoura oftálmica | Jinzhong Medical | Y00030 | Tesoura cirúrgica |
| de Pentobarbital | Guangzhou | / | |
| injeção de cloreto de sódio | Guangzhou Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd | B21L0301 | NaCl 0,9% |
| Microscópio estéreo | ZEISS | Stemi 305 | Estereomicroscópio binocular |
| Estreptozotocin | Sigma | S110910-1g | STZ |
| Linha de sutura | LINGQIAO SUTURA | ZS-LQPMRZ5 / 0 | Prolene 6/0, Prolene 10/0 |
| Fórceps de tecido | Jinzhong Medical | H1701 | Pinça cirúrgica |
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