Aqui, descrevemos os métodos de tratamento modificados para a síndrome do sagui emaciante (WMS, também conhecida como doença inflamatória intestinal (DII)) com ácido tranexâmico. Também apresentamos como administrar os agentes terapêuticos por via oral, subcutânea e intravenosa.
Artigo de método
Modificação dos métodos de tratamento para síndrome de sagui emaciante com ácido tranexâmico e medidas de suporte
Neste artigo
Resumo
Resumo
A síndrome do sagui debilitante (WMS), uma doença grave em colônias de saguis-comuns (Callithrix jacchus) em cativeiro, está associada a uma alta taxa de mortalidade. A causa específica da WMS ainda não está clara e existem poucos tratamentos eficazes. Anteriormente, havíamos relatado uma terapia com ácido tranexâmico com medidas de suporte como um tratamento útil para WMS. No presente estudo, descrevemos o método modificado: uma combinação de 0,1 mL de ácido tranexâmico a 5% por via subcutânea cinco vezes por semana, 2,0 mL de formulação de aminoácidos por via intravenosa três vezes por semana, 5,0 mL de solução de Ringer com lactato com 0,1 mL de uma formulação vitamínica por via subcutânea três vezes por semana e administração oral de 0,1 mL de uma formulação de ferro cinco vezes por semana. Também descrevemos como administrar a solução por via intravenosa pela veia safena com uma ponta de contenção do animal, bem como os métodos detalhados para administração oral e subcutânea. Os métodos modificados têm eficiência comparável ao método original de tratamento WMS.
Introdução
A síndrome do sagui debilitante (WMS) é uma doença grave exclusiva das colônias de saguis comuns em cativeiro. Os principais sintomas são perda de peso, diminuição da massa muscular, anemia, hipoalbuminemia e enterite crônica 1,2,3,4. Alguns estudos relataram que 60,5% dos saguis em cativeiro sacrificados tinham evidências de enterite crônica5, e 31-44% das mortes envolveram essa doença6. A alta prevalência dessa doença exigiu seu tratamento eficaz.
Em 2016, relatamos que o ácido tranexâmico com medidas de suporte foi um tratamento eficaz para WMS7. Além disso, a perda de proteína intestinal de saguis afetados por WMS foi significativamente atenuada com este tratamento8. Embora o protocolo de tratamento original tenha sido definitivamente eficaz, ele incluiu um volume um tanto alto de injeção intravenosa, uma alta dose de formulação vitamínica e contenção diária. Como os saguis são suscetíveis à captura e contenção das mãos, essas ações devem ser menos frequentes. Assim, objetivamos reduzir a carga pesada para os animais com alguma modificação.
No presente artigo, forneceremos os métodos modificados: injeção subcutânea de ácido tranexâmico não diluído 5 vezes por semana (em vez de injeção intraperitoneal de solução de ácido tranexâmico diluído 5 vezes 7 vezes por semana), 2,0 mL de formulação de aminoácidos para injeção intravenosa (em vez de 3,0 mL), 0,1 mL de formulação vitamínica para injeção subcutânea (em vez de 0,5 mL), e administração oral de formulação de ferro 5 vezes por semana (em vez de 7 vezes por semana).
Protocolo
O presente estudo foi realizado com a aprovação (W2023-2-041) do Comitê de Experimentos com Animais do RIKEN (Saitama, Japão) e foi conduzido de acordo com as Diretrizes Institucionais para Experimentos com Animais. No presente estudo, foram utilizadas seis fêmeas de saguis (2-6 anos de idade).
1. Critérios para o início do tratamento
- Iniciar o tratamento quando qualquer um dos seguintes critérios for observado: i) peso corporal < 300 g ou diminuição de >20 g no peso corporal por mês; ii) hipoalbuminemia (albumina sérica < 3,8 g/dL); iii) anemia (hematócrito < 35%); iv) diarreia crônica sem Clostridium difficile, Escherichia coli enteropatogênica ou protozoários intestinais; e v) uma aparente diminuição da massa muscular.
NOTA: Devido à desidratação e subsequente hemoconcentração acompanhada de WMS, os valores de albumina sérica e hematócrito podem ser artificialmente elevados nos animais afetados.
2. Administração oral
- Misture 0,1 mL da formulação de ferro (consulte a Tabela de Materiais) com um pedaço de pão de ló.
- Dê o purê ao sagui tratado.
NOTA: Certifique-se de que o sagui tratado engoliu completamente o purê.
3. Administração subcutânea
- Pegue o sagui afetado pelo WMS na gaiola doméstica segurando a cauda suavemente.
- Segure a parte superior do corpo do animal pelas costas com a outra mão.
- Traga o animal para a sala de tratamento.
- Deixe o animal se agarrar ao peito ou braço do assistente.
- Limpe a área das costas do animal com um cotonete embebido em álcool.
- Injete 0,1 mL de ácido tranexâmico (solução a 5%, consulte a Tabela de Materiais) nas costas por via subcutânea usando uma agulha 26 G 5x por semana.
- Injete 5,0 mL de lactato de Ringer (consulte a Tabela de Materiais) com 0,1 mL de uma formulação vitamínica (consulte a Tabela de Materiais) por via subcutânea usando uma agulha de 26 G 3x por semana.
NOTA: Cada injeção deve ser feita em cada ponto diferente dentro de 1 min.
4. Administração intravenosa de formulação de aminoácidos
- Pegue o sagui afetado pelo WMS na gaiola doméstica segurando a cauda suavemente.
- Segure a parte superior do corpo do animal pelas costas com a outra mão.
- Traga o animal para a sala de tratamento.
- Peça ao assistente que contenha a parte superior do corpo do animal segurando a base de ambos os braços e contenha a parte inferior do corpo segurando a base de ambas as pernas com a outra mão. Peça ao assistente para colocar o polegar prendendo a parte inferior do corpo do animal na parte anterior do joelho do animal para evitar que ele dobre.
- Limpe o bezerro do animal com um cotonete embebido em álcool.
- Injete 2,0 mL da formulação de aminoácidos (consulte a Tabela de Materiais) por via intravenosa através da veia safena usando uma agulha borboleta 27 G três vezes por semana.
NOTA: A injeção deve ser feita o mais lentamente possível até 2 min. - Após a injeção, peça ao assistente para pressionar a área com algodão absorvente até que o sangramento pare.
5. Medição do peso corporal
- Após o tratamento (injeção intravenosa e/ou subcutânea), pesar o animal com uma caixa de transporte uma vez por semana para monitorar o peso corporal.
NOTA: Pese o sagui mais ou menos ao mesmo tempo, pois o peso corporal é afetado pela presença de alimentos.
6. Análise completa do hemograma (CBC) e testes de química sérica
- Pegue o sagui afetado pelo WMS na gaiola doméstica segurando a cauda suavemente.
- Segure a parte superior do corpo do animal pelas costas com a outra mão.
- Traga o animal para a sala de tratamento.
- Peça ao assistente que contenha a parte superior do corpo do animal segurando a base de ambos os braços e a parte inferior do corpo segurando a base de uma das pernas com a outra mão.
- Peça ao médico para segurar a perna do animal que não está presa.
- Limpe a região inguinal do animal com um cotonete embebido em álcool.
- Colete 0,4 mL de sangue da veia femoral usando uma agulha 26 G mensalmente.
- Use 0,05 mL da amostra de sangue para análise de hemograma, incluindo hematócrito.
- Deixe o resto da amostra de sangue repousar por 1 h em temperatura ambiente e centrifugue a 1.800 × g por 20 min.
- Use o soro para testes químicos, incluindo albumina.
NOTA: O volume da amostra de sangue pode ser reduzido minimizando o número de parâmetros para o teste de química sérica. Ajuste o volume da amostra de sangue de acordo com a condição individual do sagui.
Resultados
Os métodos de tratamento modificados resultaram em aumento do hematócrito (Figura 1A), albumina sérica (Figura 1B) e peso corporal (Figura 1C) nos saguis afetados pela WMS. Diferenças significativas no hematócrito (P < 0,05, teste de Wilcoxon com sinais de pares), albumina sérica (P < 0,05, teste de Wilcoxon com sinais de pares) e peso corporal (P < 0,05, teste de Wilcoxon com sinais de pares) foram observadas entre pré e pós-tratamento.
Os efeitos do tratamento na aparência também foram observados. A Figura 2 mostra a aparência de um sagui afetado pelo WMS. Antes do tratamento, foram observados tabefação, dorso arqueado, pêlo áspero (Figura 2A) e alopecia (Figura 2B), enquanto nenhuma aparência anormal foi observada após o tratamento (Figura 2C,D).
Figura 1: Alterações (pré vs pós-tratamento) no hematócrito, albumina sérica e peso corporal em um sagui que recebeu o tratamento modificado. (A) Valores de hematócrito, (B) valores de albumina sérica e (C) peso corporal. As linhas tracejadas indicam os valores dos critérios. Abreviaturas: Htc = hematócrito; Alb = albumina sérica; PC = peso corporal. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: Aparência representativa do sagui afetado por WMS. (A) Aparência do animal pré-tratamento: tabefação, dorso arqueado e pêlo áspero são observados. (B) Cauda do animal pré-tratamento: alopecia é observada. (C) Aparência do animal pós-tratamento. (D) Cauda do animal pós-tratamento. Abreviatura: WMS = síndrome do sagui emaciante. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Discussão
Em 2016, relatamos que o ácido tranexâmico com medidas de suporte foi um tratamento eficaz para WMS, que foi o primeiro relatório a demonstrar a terapia WMS sem o uso de glicocorticóides. Em humanos, os glicocorticóides são considerados o tratamento mais eficaz da DII. No entanto, a predonizolona, um dos glicocorticóides mais comumente usados, não é adequada para o tratamento da WMS devido aos seus efeitos adversos. Embora a budesonida, um glicocorticóide, tenha sido relatada para o tratamento da WMS9, a terapia foi relativamente ineficaz em animais com formas agudas de WMS. O ácido tranexâmico é um inibidor da plasmina que tem efeitos anti-inflamatórios, e nenhum efeito colateral notável foi observado em nossos métodos originais. No entanto, embora o protocolo de tratamento original tenha sido definitivamente eficaz, ele impôs uma carga pesada para animais e cuidadores.
No presente estudo, os métodos de tratamento modificados para WMS foram conduzidos para diminuir a carga fisiológica do animal e a carga de trabalho dos cuidadores. Nos métodos modificados, a via de administração do ácido tranexâmico foi alterada (de intraperitoneal para subcutânea), o que contribuiu para reduzir o risco de lesão dos órgãos abdominais. A solução de ácido tranexâmico não foi diluída neste protocolo para reduzir o risco de contaminação e o tempo de preparo. Nos métodos originais, 3,0 mL da formulação de aminoácidos foram injetados por via intravenosa. No entanto, o volume foi um pouco grande, pois recomenda-se a administração de 5,0 mL/kg em bolus10. Portanto, o volume foi reduzido nos métodos modificados.
A formulação vitamínica utilizada neste protocolo contém vitaminas B e C. No método original, 0,5 mL da formulação vitamínica contém 2,5 mg de cloridrato de cloreto de tiamina, que era 2,5 vezes a necessidade de primatas não humanos alojados em laboratório11. No presente método, foi administrado 0,1 mL da formulação vitamínica, que contém 1,0 mg de cloridrato de cloreto de tiamina. A frequência de administração da formulação de ferro e da solução de ácido tranexâmico foi reduzida nos métodos modificados, o que contribuiu para a redução da sobrecarga para os animais e também para os cuidadores.
Conforme escrito na seção Resultados Representativos, houve efeitos significativos do tratamento nos métodos modificados. O prazo médio de tratamento foi de 37,8 ± 25,34 dias, menor que o dos métodos originais (56 dias). Como os saguis são sensíveis ao estresse mental, os tratamentos prolongados têm o efeito oposto no animal, como redução do apetite. Assim, recomendamos que os cuidadores decidam de forma abrangente o momento do término do tratamento com base não apenas no valor de cada parâmetro, mas também no comportamento do animal.
Divulgações
Os autores não têm conflitos de interesse a divulgar.
Agradecimentos
Esta pesquisa foi parcialmente apoiada pela Agência Japonesa de Pesquisa e Desenvolvimento Médico (AMED) no âmbito do projeto Mapeamento Cerebral por Neurotecnologias Integradas para Estudos de Doenças (Brain / MINDS) (Número de Concessão JP23dm0207001).
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Seringa de 1,0 mL | Terumo Corporation, Tóquio, Japão | SS-01T | Para injeção subcutânea de ácido tranexâmico |
| Seringa de 10 mL | Terumo Corporation, Tóquio, Japão | SS-10SZ | Para administração intravenosa de formulação de aminoácidos |
| 26 G Needle | Terumo Corporation, Tóquio, Japão | NN-2613S | Para injeção subcutânea |
| 27 G Agulha borboleta tipo D | Terumo Corporation, Tóquio, Japão | SV-27DL | Para administração intravenosa de formulação de aminoácidos |
| Seringa de 5 mL | Terumo Corporation, Tóquio, Japão | SS-05SZ | Para injeção subcutânea de lactato de Ringer e formulação de vitaminas |
| Injeção de aminoleban | Otsuka Pharma Factory Inc., Tóquio, Japão | 1942 | Para injeção subcutânea de lactato de Ringer e formulação |
| C-PARA | Takata Pharma Co., Ltd., Saitama, Japão | 120-31960-0 | Formulação de vitaminas |
| FCV Liquid | Minerva Corporation, Saitama, Japão | Formulação de ferro | |
| Lactec Injection | Otsuka Pharma Factory Inc., Tóquio, Japão | 0714 | Ringer' s lactato |
| Injeção de vasolamina | Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tóquio, Japão | DBASOS | Ácido tranexâmico |
Referências
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