$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
A morte súbita inesperada na epilepsia (SUDEP) é uma das principais causas de morte em pacientes com epilepsia. Os mecanismos da SUDEP são pouco compreendidos, mas potencialmente envolvem disfunção autonômica, apneia e arritmias cardíacas, além de convulsões 1,2,3,4,5,6,7. Pacientes com epilepsias genéticas ligadas à canalopatia têm uma das taxas mais altas de SUDEP. Por exemplo, a SUDEP ocorre em até 20% dos pacientes com variantes no gene do canal de sódio dependente de voltagem SCN1A8, o gene responsável pela síndrome de Dravet, uma epilepsia genética com início no primeiro ano de vida. Muitos genes de canais iônicos ligados à epilepsia são expressos no cérebro e no coração, com dados laboratoriais e clínicos sugerindo que arritmias cardíacas podem estar presentes em pacientes com epilepsias genéticas ligadas à canalopatia7, 9,10,11,12, aumentando potencialmente o risco de SUDEP devido a uma arritmia cardíaca fatal induzida por convulsão ou ocorrência simultânea de convulsões e arritmias. Avaliar a SUDEP no ambiente laboratorial apresenta inúmeros desafios. Do ponto de vista cardíaco, os potenciais de ação cardíacos em camundongos são muito diferentes dos humanos13, e os modelos de miócitos cardíacos iPSC humanos14 não podem replicar as complexidades de todo o organismo. Modelos transgênicos de epilepsias genéticas em coelhos fornecem um sistema ideal para estudar a SUDEP, pois a fisiologia cardíaca do coelho replica mais de perto a do humano13,15, ao mesmo tempo em que fornece um organismo inteiro para estudar a fisiopatologia complexa. Como a SUDEP pode ocorrer já na primeira convulsão, avaliar esses modelos animais desde o início é essencial para entender o início das convulsões e arritmias cardíacas. A gravação de vídeo durante o período neonatal é um desafio, pois os filhotes de coelhos geralmente ainda estão no ninho. O registro contínuo de eletroencefalograma (EEG) ou eletrocardiograma (ECG) com um sistema tradicional com fio não é possível enquanto os kits estiverem com a barragem. É improvável que o registro intermitente capture eventos terminais raros associados à SUDEP. Portanto, recorremos ao monitoramento de telemetria implantável sem fio para fornecer registro de EEG e ECG de longo prazo, contínuo e simultâneo em kits de coelhos.
As chaves para o sucesso neste protocolo são o suporte anestésico e pós-operatório adequado para esses animais vulneráveis. Os coelhos apresentam um risco muito maior de morte anestésica (1,39%-4,8%) em comparação com cães e gatos (0,17%-0,24%) devido às características anatômicas e fisiológicas únicas16,17. Os principais contribuintes para esse aumento do risco anestésico incluem o manejo subótimo das vias aéreas e complicações pós-operatórias agudas. Múltiplos fatores contribuem para a dificuldade de intubação em coelhos, incluindo boca longa e estreita com língua larga, ângulo agudo entre a boca e a laringe, deslocamento dorsal da epiglote, aumento da suscetibilidade ao trauma laríngeo e aumento da propensão ao laringoespasmo 18,19,20. Após o episódio anestésico imediato, os coelhos correm o risco de desenvolver síndrome de estase gastrointestinal com risco de vida. Este é um problema complexo e multifatorial, e postula-se que a anestesia contribua por meio de efeitos diretos de drogas que inibem a motilidade gástrica e/ou anorexia secundária pós-procedimento por qualquer motivo (dor não aliviada, náusea, etc.)21.
A fisiologia única de recém-nascidos e bebês de coelhos agrava os desafios associados à anestesia e à cirurgia. Os coelhos têm filhotes altriciais nascidos com mecanismos subdesenvolvidos para homeostase fisiológica e considerações anatômicas especiais. O acesso intravenoso e o monitoramento são difíceis, pois a maioria dos produtos comerciais não é otimizada para o pequeno tamanho vascular, alta frequência cardíaca em repouso e pele pigmentada dos kits de coelhos com cinto holandês e cruz branca da Nova Zelândia. Como o débito cardíaco é essencialmente dependente da frequência cardíaca em neonatos22 e, em geral, a depuração do medicamento por via renal ou hepática é diminuída em comparação com adultos23, as considerações para a seleção e dosagem adequadas do medicamento são críticas. Acredita-se que a principal causa de morte anestésica em coelhos seja secundária à depressão respiratória e apneia. Além dos problemas de manejo das vias aéreas já discutidos para todos os coelhos, os neonatos apresentam um impulso respiratório deprimido diante da hipoxemia e hipercapnia, tornando esse aspecto já desafiador da anestesia mais arriscado24.
Neste protocolo, descrevemos um método bem-sucedido para implante de telemetria de EEG e ECG (Figura 1) em um modelo de epilepsia de coelho neonatal com alta taxa de sobrevida cirúrgica e anestésica. Essas informações permitirão que outros pesquisadores enfrentem modelos desafiadores de coelhos neonatais para avançar na pesquisa sobre epilepsia, arritmia cardíaca e distúrbios relacionados ao neurodesenvolvimento.