Ligadura da Artéria Coronária Descendente Anterior em Ratos para o Desenvolvimento de Modelo de Infarto do Miocárdio Oclusivo

Resumo

O protocolo mostra o desenvolvimento de um modelo de infarto do miocárdio (IM) por meio da ligação permanente da artéria coronária descendente anterior em ratos. A sobrevivência animal pós-IM é essencial para salvar cardiomiócitos na zona isquêmica, prevenir a expansão do infarto e reduzir a inflamação e fibrose pós-miocárdica.

Resumo

A doença cardiovascular (DCV), incluindo doença cardíaca isquêmica e acidente vascular cerebral, é uma das principais causas de mortalidade e morbidade em todo o mundo. O infarto do miocárdio é uma síndrome clínica de cardiopatia isquêmica que ocorre devido à isquemia prolongada. O miocárdio isquêmico sofre alterações funcionais, metabólicas e estruturais, levando a danos irreversíveis a uma porção do miocárdio devido à necrose. Modelos experimentais de infarto do miocárdio são cruciais para a compreensão das alterações celulares, moleculares e morfológicas agudas e crônicas que ocorrem durante e pós-infarto do miocárdio e para o desenvolvimento e otimização de novos alvos ou estratégias de tratamento. O modelo cirúrgico de IM em pequenos animais que emprega o fechamento permanente da artéria coronária descendente anterior (DA) se assemelha quase ao IM humano. O objetivo deste estudo é estabelecer um modelo de IM induzido cirurgicamente envolvendo o fechamento da artéria coronária da DA de forma indelével em ratos. O protocolo experimental inclui indução inicial da anestesia com cetamina 80 mg/kg e xilazina 12 mg/kg i.p., intubação de cânula endotraqueal com otoscópio sem realização de traqueostomia sob ventilação ventilada com uso de pressão extrínseca positiva final (PEEP) para evitar o colapso dos alvéolos. Foi adotado um procedimento de toracotomia que limita as lesões causadas aos músculos esqueléticos durante a cirurgia. Essa abordagem é minimamente invasiva, repetível e reduz a mortalidade pós-cirúrgica. Nesse modelo, os animais sobreviveram 4 dias após o infarto do miocárdio para entender as alterações patobiológicas de curto prazo, principalmente a inflamação pós-infarto, a angiogênese como um processo natural de cicatrização do infarto e, finalmente, a fibrose no miocárdio infartado.

Introdução

A doença cardiovascular (DCV), composta principalmente por doença cardíaca isquêmica (DIC) e acidente vascular cerebral, é uma das principais causas de mortalidade e morbidade em todo o mundo. De acordo com a Federação Mundial do Coração, 20,5 milhões de pessoas morreram por doenças cardiovasculares em 2021 ^1,2. O infarto do miocárdio (IM), também conhecido como ataque cardíaco, é uma síndrome clínica aguda de DIC. Durante o IM, o tecido miocárdico sofre danos irreversíveis em decorrência da isquemia prolongada, que geralmente é causada por um trombo oclusivo formado sobre uma....

Protocolo

Os procedimentos experimentais foram realizados de acordo com o protocolo após aprovação do Comitê Institucional de Ética Animal (IAEC) [Protocolo nº. (AICE/KCP/2023/009)]. As diretrizes do Comitê para fins de controle e supervisão (CCSEA) e do Ministério do Meio Ambiente, Florestas e Mudanças Climáticas, Governo da Índia, foram seguidas no manejo e cuidado de animais experimentais.

1. Anestesia e intubação da cânula endotraqueal (Duração: 10-15 min)

1. Use ratos Wistar de ambos os sexos, pesando 200 - 240 g, com idade superior a 6 meses. Registre o peso dos ratos. Anestesiar o rat....

Resultados

A intubação endotraqueal é necessária para auxiliar a ventilação durante o procedimento de ligadura da DA envolvendo procedimentos torácicos de tórax aberto em ratos. O sucesso da intubação é confirmado pelos parâmetros respiratórios basais antes da cirurgia e pela manutenção da respiração, volume corrente e volume minuto estáveis durante o procedimento cirúrgico (Figura 5).

O sucesso do procedimento de ligadura da LAD foi confirmado pela avaliação da troponina T .......

Discussão

Nosso presente estudo representa a indução do Infarto do Miocárdio através do fechamento permanente da artéria coronária descendente anterior (DA) em ratos. Neste protocolo cirúrgico, o anestésico Cetamina 80 mg/kg administrado por via intraperitoneal induziu anestesia rápida, juntamente com a administração intraperitoneal de Xilazina 12 mg/kg, produziu relaxamento muscular suficiente, facilitando todo o procedimento cirúrgico de forma eficaz, bem como uma recuperação pós-operatória suav.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Cânula intravenosa de calibre 18	Kent scientific, EUA
Cânula intravenosa de calibre 20	Kent scientific, EUA
4-0 Sutura de polipropileno	Khanna Cirúrgica
Sutura de seda 6-0	Nanak Cirúrgico
8-0 sutura de seda	Nanak Cirúrgico
Pinça Adson	Nanak Cirúrgico
Aparelho de anestesia	Orquídea Científica
Câmara de indução anestésica	Orquídea Científica
Tesoura curva	Nanak Cirúrgico
Tubo de intubação endotraqueal	Kent Scientific, EUA
Creme depilatório	Nanak Cirúrgico
Almofada de aquecimento	Kent scientific, EUA
Pinça com gancho	Nanak Cirúrgico
Cetamina			Amostra de presente de KVAS, Amritsar
Micro porta-agulhas	Nanak Cirúrgico
Luvas de nitrilo	Nanak Cirúrgico
Tabela de operação
Otoscópio	Nanak Cirúrgico
Pinça de ervilha	Nanak Cirúrgico
Afastador de costelas	Nanak Cirúrgico
Pinça reta	Nanak Cirúrgico
Pinça do estreito	Nanak Cirúrgico
Touca de cabelo cirúrgica	Nanak Cirúrgico
Máscara cirúrgica	Nanak Cirúrgico
Estereomicroscópio cirúrgico	Magnus do Olimpo	24B1187	Zoom estéreo Microscópio MSZ-TR com suporte de braço boom, taxa de zoom: 1:7 zoom objetivo: 0,65 - 4,5x Ocular 10x/22 mm Ampliação: 6,5 - 45x com 10x ocular iluminação do anel LED
Pinça desdentada	Nanak Cirúrgico
Tramadol			Amostra de presente do hospital Amandeep, ASR
Pinças	Nanak Cirúrgico
Ventilador	RoVent (Kent Scientific,  EUA)	RV-04-220	Ventilador automático com controle de volume e pressão e aquecimento e monitoramento de temperatura
xilazina			Amostra de presente de KVAS, Amritsar