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Artigo de método

Identificação rápida de Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis e Ureaplasma urealyticum por ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA

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DOI:

10.3791/68413

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20 de junho de 2025

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1The First People's Hospital of Foshan

Neste artigo

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo demonstrando o ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA e avaliamos a eficácia para detectar rapidamente Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis e Ureaplasmaurealyticum.

Resumo

Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydia trachomatis (CT) e Ureaplasma urealyticum (UU) são patógenos comuns associados a doenças sexualmente transmissíveis (DSTs). A NG é o agente causador da gonorreia, que pode resultar em vários distúrbios do sistema geniturinário, incluindo epididimite, prostatite, cervicite e infertilidade. A TC é um microrganismo responsável pela uretrite não gonocócica e doença inflamatória pélvica. A UU está associada à uretrite não gonocócica, cervicite, prostatite e infertilidade. As tecnologias moleculares atuais para a análise de NG, CT e UU são frequentemente complexas e demoradas. O teste molecular rápido para esses patógenos pode facilitar o diagnóstico precoce de DSTs. O ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA (RGT) é um método que não requer extração de ácido nucleico. Nesse processo, as amostras são lisadas para liberar fragmentos de ácido nucléico, que são então amplificados por meio de transcrição reversa e transcrição. O produto de RNA amplificado é reconhecido e capturado por sondas específicas, formando um complexo sonda-sonda de detecção de RNA que pode ser imobilizado em uma membrana de nitrocelulose via fluxo lateral para produzir bandas visíveis. Todo o procedimento leva menos de 1 h. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do RGT para a detecção rápida de NG, CT e UU. Um total de 1.416 amostras foram incluídas. A consistência de NG, CT e UU quando analisada por RGT em comparação com o método de sondagem de fluorescência da reação em cadeia da polimerase (PCR) foi de 99,03% (307/310), 99,38% (159/160) e 99,02% (303/306), respectivamente. A consistência de NG, CT e UU quando analisada por RGT em comparação com o sequenciamento de genes foi de 99,17% (238/240), 98,95% (188/190) e 98,30% (173/176), respectivamente. Em comparação com o método de cultura de isolamento de patógenos, as taxas de detecção para ensaios NG, CT e UU foram de 100,00% (9/9, 17/17, 8/8). A alta sensibilidade e especificidade, a facilidade de uso e os requisitos de tempo reduzidos tornam este ensaio ideal para a detecção rápida e precisa de NG, CT e UU.

Introdução

As infecções sexualmente transmissíveis (IST) representam desafios significativos de saúde pública global, levando a séria morbidade e mortalidade genital e reprodutiva1. A Neisseria gonorrhoeae (NG) é o agente causador da gonorreia, com aproximadamente 87 milhões de novos casos relatados anualmente em todo o mundo2. Este patógeno induz principalmente a inflamação invadindo o epitélio colunar do trato urogenital3. A Chlamydia trachomatis (CT), outro microrganismo, é responsável por uretrite não gonocócica e infecções pélvicas, sendo responsável por cerca de 130 milhões de novos casos a cada ano4. Ureaplasma urealyticum (UU), a célula auto-replicante mais simples e menor, invade prontamente o tecido cervical danificado e está associada a uretrite não gonocócica, cervicite, prostatite e infertilidade5. Todas essas infecções são frequentemente assintomáticas em pacientes do sexo feminino e masculino, mas podem levar a complicações graves se não forem tratadas prontamente. As infecções maternas podem resultar em resultados adversos graves na gravidez, incluindo natimortos, aborto espontâneo, parto prematuro e infecção fetal direta6. Portanto, o desenvolvimento de um método rápido, sensível, específico e fácil de usar para detecção de patógenos é de suma importância.

A detecção rápida e precisa de patógenos é fundamental para o diagnóstico e tratamento eficazes da doença. Os métodos tradicionais de cultura, que requerem o isolamento, cultura e identificação de patógenos, têm desvantagens significativas, incluindo serem demorados e terem baixa sensibilidade. Embora o sequenciamento de genes possua uma alta taxa de precisão, ele requer um ambiente e equipamentos complexos, tornando-o caro e também demorado. As tecnologias moleculares convencionais para a análise de NG, CT e UU têm sido amplamente aceitas; No entanto, esses métodos costumam ser complicados e demorados, exigindo instrumentação sofisticada, técnicos treinados e tempos de processamento prolongados. Portanto, há uma necessidade premente de um método de diagnóstico molecular simples e confiável para abordar as limitações das abordagens convencionais. O ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA (RGT) oferece uma alternativa rápida, sensível e específica, sem a necessidade de procedimentos complexos 7,8. Neste método, as amostras são lisadas diretamente para liberar fragmentos de ácido nucléico sem extração de ácido nucléico, e esses fragmentos são amplificados por meio de transcrição reversa e transcrição. O produto de RNA amplificado é então reconhecido e capturado por sondas específicas, formando um complexo sonda-sonda de detecção de RNA-ouro, que pode ser imobilizado em uma membrana de nitrocelulose via fluxo lateral para criar bandas visíveis9. Todo o processo leva menos de 1 h, tornando-o altamente adequado para testes laboratoriais de emergência.

Neste estudo, foram recrutadas 1.416 amostras para avaliar o uso do RGT para a detecção de NG, CT e UU. As amostras foram analisadas usando métodos de RGT, sondagem de fluorescência por PCR, sequenciamento de genes e cultura de isolamento de patógenos. Os resultados indicaram que o método RGT foi preciso e consistente com os métodos diagnósticos convencionais. Em conclusão, a alta sensibilidade e especificidade, facilidade de uso e requisitos de tempo reduzidos tornam este ensaio ideal para a detecção rápida e precisa de NG, CT e UU, sugerindo sua aplicação promissora no diagnóstico médico preliminar de doenças sexualmente transmissíveis.

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Protocolo

Este estudo foi conduzido de acordo com as diretrizes éticas e aprovação concedida pelo Conselho de Revisão Institucional do Primeiro Hospital Popular de Foshan, Província de Guangdong, China (Documento de Revisão Ética No. LR (2025) 136). Um total de 1.416 amostras de swab genital (716 de pacientes do sexo feminino, 700 de pacientes do sexo masculino) foram coletadas prospectivamente de indivíduos clinicamente suspeitos de DST que não haviam sido submetidos a antibioticoterapia nos últimos 14 dias (Tabela Suplementar 1). Para cada participante, swabs pareados foram obtidos simultaneamente e analisados em paralelo: um pelo método de teste (RGT) e outro pelo método de referência (sondagem de fluorescência por PCR, sequenciamento de genes e cultura de isolamento de patógenos, respectivamente). A concordância intermétodos foi quantificada por meio do coeficiente Kappa de Cohen (κ), com interpretação guiada pelos critérios de Landis e Koch.

NOTA: O protocolo de ensaio para TC e UU segue etapas processuais idênticas às descritas para NG, com modificações limitadas a reagentes específicos do patógeno. As formulações detalhadas do reagente são fornecidas na etapa 2.1 (Tabela Suplementar 2, Tabela Suplementar 3 e Tabela Suplementar 4).

1. Coleta de amostras

  1. Tipo de amostra aplicável: Colete swabs genitais (swab cervical feminino, swab uretral masculino).
  2. Colheita de amostras
    1. Insira o swab genital no orifício uretral masculino por 2-3 cm ou no orifício cervical feminino por aproximadamente 1-2 cm.
    2. Gire uma vez e segure por 10 s.
    3. Remova o cotonete e insira-o no tubo de coleta contendo 1 mL de solução salina normal.
    4. Quebre e descarte a cauda do cotonete e, em seguida, aperte a tampa do tubo.
    5. Registre o tempo de coleta e realize o teste imediatamente.
  3. Armazenamento e transporte de amostras
    1. Transportar amostras à temperatura ambiente (RT) dentro de 4 h ou a 2-8 °C com uma bolsa de gelo dentro de 24 h.
    2. Armazenar os grânulos celulares restantes das amostras processadas a -20 °C por 3 meses ou a -80 °C por até 6 meses, se os testes não puderem ser realizados em tempo hábil.

2. Preparação

  1. Reagentes
    1. Para reagentes do ensaio de ácido nucleico NG, consulte a Tabela Suplementar 2.
    2. Para reagentes do ensaio de ácido nucleico CT, consulte a Tabela Suplementar 3.
    3. Para reagentes do ensaio de ácido nucleico UU, consulte a Tabela Suplementar 4.
    4. Armazenamento: Armazene todos os reagentes em temperaturas que variam de -40 °C a -15 °C e os cartões de detecção em temperaturas entre 2 °C e 30 °C.
      NOTA: O tampão de amplificação e a solução de detecção devem ser equilibrados para RT antes do uso, com base nos requisitos diários de detecção. Depois de atingirem o RT, devem ser conservados a 4 °C e podem ser utilizados para a deteção seguinte. Evite congelamento e descongelamento repetidos. A enzima de amplificação deve ser armazenada a -20 °C, excepto durante o processo experimental. Um aumento na temperatura de armazenamento pode levar a um declínio ou perda da atividade enzimática.
  2. Requisitos do ambiente experimental
    1. Conduza o experimento em quatro zonas fisicamente separadas:
      1. Área de preparação do reagente: Manter a 22 ± 1°C com pressão de ar positiva (caudal de ar filtrado por partículas de alta eficiência (HEPA) ≥ 0,3 m/s). Armazene os reagentes pré-aliquotados em armários esterilizados por UV.
      2. Área de preparação da amostra: Realize todo o manuseio da amostra em uma cabine de segurança biológica Classe II pré-tratada com etanol a 70%.
      3. Área de amplificação: Opere os termocicladores em mesas antivibratórias.
      4. Área de análise do produto: Use uma bancada esterilizada por UV (30 min de exposição pré/pós uso).
    2. Regule o pessoal e o fluxo de ar em cada seção para evitar a contaminação cruzada da seguinte forma:
      1. Mantenha o fluxo de ar unidirecional da preparação do reagente para as zonas de análise do produto.
      2. Garanta pressão negativa na área de preparação da amostra (-5 Pa em relação às zonas adjacentes).
      3. Restringir a movimentação de pessoal; Descontamine as luvas com etanol a 75% antes das transições de zona.
      4. Instale portas de câmara de ar com sistemas de intertravamento (atraso mínimo de 30 s entre as aberturas).
    3. Use consumíveis específicos da zona (por exemplo, tubos de centrífuga, pontas de pipeta, etc.) e descarte os consumíveis após um único uso.
    4. Mantenha a limpeza e o controle de qualidade:
      1. Limpe as bancadas diariamente com hipoclorito de sódio a 10% seguido de etanol a 75% ou água destilada.
      2. Valide a esterilidade do consumível por meio de testes de endotoxina (ensaio de lisado de amebócitos Limulus, <0,25 UE/mL).
      3. Monitore a qualidade do ar semanalmente usando placas de decantação (ágar soja tríptica [TSA], ≤5 unidade formadora de colônias (UFC)/placa após 4 h de exposição).
  3. Qualificações do pessoal
    1. Possuir certificados ou qualificações relacionadas à tecnologia PCR para garantir a precisão e confiabilidade deste experimento.

3. Lise as células para extrair RNA

  1. Processamento de amostras
    1. Vortex o tubo de coleta de amostras a 2.600 vezes/min por 10 s para desalojar as células da cabeça do swab para a solução.
    2. Transfira 1 mL da solução para um tubo de microcentrífuga de 1,5 mL usando uma pipeta calibrada ajustada para 1000 μL.
    3. Centrifugue a 12.000 × g por 2 min a 25 °C.
    4. Aspirar 950 μl do sobrenadante sem perturbar o sedimento. Ressuspenda os pellets em 25 μL de solução residual pipetando para cima e para baixo 10 vezes usando uma pipeta calibrada de 200 μL ajustada para 50 μL.
  2. Lise de amostras e materiais de controle de qualidade
    1. Pré-equilibre o tampão de lise celular e o controle negativo a 25 ° C por 15 min.
    2. Centrifugar os materiais de controlo de qualidade a 1000 × g durante 10 s a 25 °C para garantir que todos os pós assentam no fundo do tubo.
    3. Adicione 30 μL de tampão de lise aos materiais de controle de qualidade e 20 μL às amostras.
    4. Incubar durante 10 min a 25 °C.
      NOTA: Ao usar o tampão de lise celular, é essencial misturá-lo bem. Misturar pipetando 15 vezes (ponta de 200 μL) e adicionar as partículas e o líquido ao precipitado. Lidar com o controle positivo em um gabinete de biossegurança Classe II tratado com UV, seguido de descontaminação por hipoclorito de sódio a 10%.

4. Amplificação isotérmica de RNA

  1. Pré-equilíbrio do tampão de amplificação
    1. Descongele o tampão de amplificação e equilibre a 25 °C ± 1 °C por 15 min.
  2. Configuração de controle
    1. Incluir o controlo positivo e negativo em cada ensaio experimental.
  3. Rotulagem de tubos
    1. Rotule os tubos de amplificação de acordo com o número de amostras.
  4. Montagem de reação
    1. Pipetar 17 μL de tampão de amplificação em cada tubo utilizando uma pipeta calibrada de 20 μL. Adicione 2 μL da amostra ou lisado de controle diretamente na gota tampão.
      NOTA: Certifique-se de que o lisado entre no tampão sem entrar em contato com a parede do tubo (centrifugue brevemente a 500 × g por 5 s, se necessário). Tampe imediatamente os tubos para evitar a contaminação por aerossóis.
  5. Ativação térmica
    1. Incubar os tubos em um termociclador pré-aquecido sob o seguinte programa:
      Passo 1: 95 °C por 2 min (desnaturação)
      Etapa 2: 42 °C por 2 min (recozimento do primer).
  6. Amplificação enzimática
    1. Adicione 1 μL de enzima de amplificação a cada tubo e misture agitando o tubo 5 vezes, seguido de centrifugação breve (500 × g por 5 s). Transfira os tubos para um segundo termociclador pré-aquecido a 42 °C por 45 min imediatamente.
      NOTA: Use incubadoras separadas para evitar flutuações de temperatura, uma ajustada para 95 °C e a outra para 42 °C. Para execuções com várias amostras, manter os tubos de amplificação restantes a 42 °C enquanto adiciona a enzima de amplificação ao último tubo de amplificação.

5. Ensaio de fluxo lateral

  1. Pré-equilíbrio da solução de detecção
    1. Transferir a solução de deteção para a incubadora a 42 °C durante 10 min.
  2. Homogeneização
    1. Vortex a solução de detecção a 2.600 vezes/min por 15 s até que a cor fique uniforme.
  3. Manutenção da temperatura
    1. Manter a solução de detecção a 25 °C ± 2 °C durante ≤30 min antes da utilização.
  4. Iniciação da reação
    1. Adicione 30 μL de solução de detecção a cada tubo de amplificação usando uma pipeta calibrada de 20-200 μL.
      NOTA: A ponta da pipeta deve entrar em contato com a parede do tubo em um ângulo de 45° durante a dispensação para evitar a formação de bolhas.
  5. Hibridização
    1. Misturar a solução pipetando 5 vezes para cima e para baixo e incubar numa incubadora pré-aquecida a 53 °C durante 10 min.
  6. Preparação do dispositivo de ensaio
    1. Remova os cartões de detecção das bolsas de alumínio.
      NOTA: Evite tocar na zona de aplicação de amostra.
  7. Exemplo de aplicação
    1. Transfira toda a mistura para a porta de amostra do cartão de detecção usando uma pipeta de 20-200 μL.
    2. Coloque imediatamente o cartão de detecção em uma incubadora a 42 °C por 15 min.

6. Análise de resultados

  1. Ambiente controlado para leitura
    1. Mantenha os cartões de detecção em uma incubadora pré-aquecida a 53 ° C durante a interpretação visual para estabilizar a intensidade do sinal.
  2. Protocolo de interpretação visual
    1. Leia os resultados do teste diretamente por inspeção visual das bandas nos cartões de detecção dentro de 10 a 20 minutos.
      NOTA: O resultado torna-se inválido após 20 min.
  3. Para a matriz de interpretação para interpretação do resultado RGT, consulte a Tabela Suplementar 5.
    NOTA: A interpretação visual do resultado é mostrada na Figura 1.

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Resultados

Consistência dos métodos de sondagem de fluorescência RGT e PCR
Um total de 310 amostras foram analisadas para NG, consistindo de 161 fêmeas e 149 machos. A taxa de coincidência positiva foi de 98,78% (IC95%: 93,39%-99,97%), enquanto a taxa de coincidência negativa foi de 99,12% (IC95%: 96,87%-99,89%). A taxa de coincidência geral foi de 99,03% (IC 95%: 97,20%-99,80%). O valor da consistência Kappa foi de 0,975 (IC 95%: 0,947-1,003, Z = 17,171, P ...

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Discussão

Neste estudo, o RGT foi empregado para detectar patógenos de IST, incluindo NG, CT e UU. Quando realizado sob protocolos operacionais rigorosos, o ensaio RGT demonstrou forte concordância com métodos diagnósticos estabelecidos, como sondagem de fluorescência por PCR, sequenciamento de genes e técnicas de cultura de isolamento de patógenos. A sensibilidade e a especificidade do ensaio RGT foram comparáveis ou excederam as das metodologias relatadas anteriormente, conforme evidenciado por ...

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Divulgações

Os autores não têm conflitos de interesse a divulgar.

Agradecimentos

Agradecemos à Wuhan Zhongzhi Bio-technologies Inc. pelos reagentes e orientação técnica oferecidos para este estudo.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
10% (p/v)  hipoclorito de sódioPreparação em laboratório.Preparação em laboratório.Solução diluída de alvejante para descontaminação e inativação de patógenos em equipamentos ou superfícies.
75% (v/v) de etanolAnte Food Co., Ltd (Anhui, China)http://www.antegroup.com/product_detail_cn/id/81.htmlSolução aquosa de etanol usada para desinfecção de superfície
Pipeta de volume ajustável (0,5– 10 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101004Micropipeta de canal único para manuseio preciso de volumes em escala de microlitros.
Pipeta de volume ajustável (100– 1000 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101014Pipeta de canal único calibrada para manuseio de líquidos de grande volume.
Pipeta de volume ajustável (10– 100 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101008Pipeta monocanal otimizada para volumes intermediários, comumente utilizada em protocolos de biologia molecular.
Pipeta de volume ajustável (20– 200 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101009Pipeta monocanal para transferências de médio volume, adequada para alíquotas precisas de reagentes.
Gabinete de biossegurança (HF Safe-1200)HealForce Bio-Meditech Holdings Limited (Hong Kong, China)HF Safe-1200Um gabinete de biossegurança Classe II que garante proteção de pessoal, amostra e meio ambiente durante o manuseio de microrganismos patogênicos ou culturas de células.
Tubos de centrífugaHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Arquivamento de dispositivos médicos Guangzhou Yuexiu nº 20210414Para extração de ácido nucleico, peletização de células e outros procedimentos laboratoriais.
Ensaio de ácido nucleico de Chamydia trachomatis (CT) (ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC.(Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-002Para detecção qualitativa de RNA de ácido nucleico de Chamydia trachomatis em amostras de swab genital e do trato urinário.
Incubadora CO2 ThermoFisher Scientific(Asheville, EUA) LLCSN:Usada para cultura de células, proporcionando um ambiente estável com temperatura controlada (37° C), umidade e concentração de CO2 (normalmente 5%) para garantir o crescimento celular ideal.
Placa de Cultura Corning Incorporated (Corning, EUA)50 mm &agudo; 9 mmPara cultura e expansão de células aderentes.
Kit de detecção de ácido nucleico para Chamydia trachomatis (CT) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Certificado de Registro de Dispositivo Médico Nº 20143402234Para detecção qualitativa de ácido nucleico de Chamydia trachomatis em amostras de swab genital e do trato urinário.
Kit de detecção de ácido nucleico para Neisseria gonorrhoeae (NG) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdCertificado de registro de dispositivo médico da China nº 20173401080Para detecção qualitativa de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae em amostras de swab do trato genital e urinário.
Kit de detecção de ácido nucleico em Ureaplasma Urealyticum (UU) (sondagem por PCR-fluorescência)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdCertificado de registro de dispositivo médico da China nº 20173400536Para detecção qualitativa de ácido nucleico de Ureaplasma Urealyticum em amostras de swab do trato genital e urinário.
Meio DMEMThermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, EUA)11965092Para cultura de Chlamydia trachomatis.
Pontas de Pipeta de Filtro (10 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, China)TF-10-BXLPara pipetagem precisa nos experimentos.
Ponteiras de Pipeta de Filtro (200 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, China)TF-200-BXLPara pipetagem precisa nos experimentos.
Cotonete genitalHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Hz112Cotonetes estéreis com ponta de algodão para coleta de amostras clínicas de superfícies da mucosa genital.
Soro Fetal Bovino Gibco (FBS)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, EUA)10270106Para cultura de Chlamydia trachomatis.
HaozhiMedical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Guangzhou Yuexiu Medical Device Filing No. 20210414Lâminas de vidro padrão com tratamento anti-desbotamento para a preparação de esfregaços celulares ou seções de tecido, compatíveis com protocolos de coloração de Gram.
Kit de síntese de cDNA Goldenstar RT6 Ver2Beijing Tsingke Biotech Co., Ltd (Pequim, China)TSK302SPara a síntese da primeira fita de cDNA na primeira etapa do RT-PCR em duas etapas. Ele contém todos os reagentes necessários para a síntese de cDNA a partir do RNA.
Kit de Coloração GramBaso Diagnostics,Inc. (Zhuhai, China)BA4012Um kit de coloração contendo cristal violeta, iodo, descolorante e safranina para diferenciar Neisseria Gonorrhoeae. 
IBM SPSS Statistics (V25.0)International Business Machines Corporation (Nova York, EUA)Versão 25.0Para análise de dados.
Esterilizador infravermelhoHuaxixinrui (Qingdao) Analytical Instruments Co., Ltd.MJ-200WPara descontaminação instantânea de alças ou pinças de inoculação, minimizando a contaminação cruzada em cabines de biossegurança.
Circuito de inoculaçãoBKMAM Biotechnology Co., Ltd. (Hunan, China)110306002Para transferência de amostras microbianas, estrias ou inoculação.
Microscópio Invertido (IX-51)Olympus Corporation (Tóquio, Japão)Código de Ativos de Laboratório:  71807101Para observar células aderentes ou dinâmica de células vivas em placas de cultura.
Sistema automatizado de espectrometria de massa microbiana MALDI BiotyperBruker Daltonics GmbH & Co. KG (Bremen, Alemanha)Registro Nacional de Importação de Dispositivos Médicos nº 20182222017Um sistema baseado em espectrometria de massa MALDI-TOF para identificação microbiana rápida por meio de perfil de proteína, permitindo a identificação de espécies de bactérias e fungos em laboratórios de microbiologia clínica.
Linhas celulares McCoy preservadasem laboratório.Preservado em laboratório.Para cultura de Chlamydia trachomatis.
Incubadora termostática de microplacas Leopard70-4 (capacidade de 4 placas)Leaptec Scientific Instruments (Pequim) Co., Ltd.Leopard70-4A acomodando até 4 microplacas padrão, com uma faixa de temperatura de ambiente a 70° C,  usado para as etapas de incubação.
Microscópio (OLYMPUS CX43)Olympus Corporation (Tóquio, Japão)https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/microscopes/upright/cx43-33/Para observação clínica de amostras (por exemplo, morfologia celular, espécimes corados).
Mini Banho de Metal MiniG-R100Leaptec Scientific Instruments (Pequim) Co., Ltd.MiniG-R100Para regulação rápida da temperatura durante o experimento, como aquecimento, incubação ou terminação de reações em amostras de pequeno volume.
Ensaio de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae (NG) (ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-001Para detecção qualitativa de RNA de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae em amostras de swab genital e do trato urinário.
Reagente de extração de ácido nucleicoWuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.105-SC-001Para a extração, enriquecimento e purificação de ácidos nucléicos.
Meio de Transporte de AmostrasQIAGEN N.V. (Venlo, Holanda)5128-1220Este meio é especificamente formulado para a coleta, preservação e transporte de amostras clínicas, garantindo a viabilidade da Chlamydia trachomatis  e  Neisseria gonorrhoeae  para testes diagnósticos subsequentes.
Centrífuga termostáticaBeckman Coulter, Inc. (Brea, EUA)SN: MRZ21L037Para peletização de ácido celular, microbiano ou nucleico.
TM médioShanghai Yihua Medical Science & Technology Co., Ltd (Xangai, China)O meio Shanghai Pu Medical Device Filing No. 20140081TM pode ser usado para o isolamento, cultivo e identificação de Neisseria gonorrhoeae a partir de amostras clínicas para auxiliar no diagnóstico de gonorreia.
Tripsina-EDTA (0,25%)Thermo Fisher Scientific Inc.(Waltham, EUA)25200072Para dissociação suave de células aderentes durante subcultura ou procedimentos experimentais.
Ensaio de ácido nucleico de Ureaplasma urealyticum (UU) (ensaio de fluxo lateral de amplificação de RNA)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-003Para detecção qualitativa de RNA de ácido nucleico de Ureaplasma Urealyticum em amostras de swab genital e do trato urinário.
Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma hominis Kit de Cultura de Isolamento Seletivo, Identificação e Sensibilidade a MedicamentosHebei Zhongaisheng Biotechnology Co., Ltd. (Hebei, China)Registro de Dispositivo Médico Hebei nº 20152400168Para o isolamento seletivo, cultura, identificação e determinação da sensibilidade a medicamentos de Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma hominis.
Misturador de vórticeXinkang Medical Instrument Co. Ltd (Jiangsu, China)XK80-ADispositivo de laboratório para homogeneização de amostras líquidas por agitação rápida.
300504406 Incubadora de microplacas

Referências

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