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Artigo de método

Estabelecimento de uma trombose do seio sagital superior induzida por cloreto férrico modificado

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DOI:

10.3791/69563

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30 de dezembro de 2025

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Neste artigo

Resumo

Este estudo apresenta um protocolo para estabelecer um modelo reprodutível e minimamente invasivo em rato da trombose do seio sagital superior induzida por cloreto férrico, utilizando um método de sutura de seda em combinação com imagem de contraste de manchas a laser e ultrassom de alta resolução para avaliação.

Resumo

A trombose venosa cerebral (CVT) é um distúrbio neurológico raro, mas potencialmente fatal. Modelos animais oferecem plataformas críticas para investigar sua fisiopatologia e avaliar potenciais terapias. Neste estudo, apresentamos um modelo modificado de tronbose do seio sagital superior (SSS) em ratos, utilizando uma técnica de sutura embebida em FeCl₃. Ratos machos de Sprague-Dawley (220-250 g) passaram por uma incisão paramediana no couro cabeludo e a criação de uma janela óssea craniana de 1 cm sobre a SSS. Comparada à incisão tradicional na linha média, essa abordagem previne a adesão entre a pele incisa, a janela óssea e a dura-máter subjacente. Além disso, evita a interferência causada por nós de sutura localizados sobre o SSS, melhorando assim a qualidade da imagem por ultrassom. Um ponto de seda 2-0 embebido em 40% deFeCl 3 foi aplicado diretamente sobre o seio expuesto por dois intervalos consecutivos de 5 minutos. Comparado ao método tradicional depapel filtro FeCl 3, essa técnica minimiza o dano químico direto ao córtex parasagital. A imagem de contraste a laser de speckle foi empregada para avaliar a perfusão venosa cerebral antes e depois da aplicação do FeCl3 . Uma redução significativa no fluxo sanguíneo confirmou trombose bem-sucedida. Sete dias após a cirurgia, a formação do trombo e as alterações hemodinâmicas foram avaliadas por meio de ultrassom de alta resolução e analisadas usando o software Vevo LAB, que forneceu dados volumétricos e hemodinâmicos do trombo. Esse modelo modificado oferece uma abordagem reprodutível, minimamente invasiva e compatível com imagens para pesquisas pré-clínicas em TVC.

Introdução

A trombose venosa cerebral (CVT) é um tipo especial de doença cerebrovascular, responsável por 0,5-3% de todos os AVCs e sendo uma causa importante de AVC em adultosjovens 1. A mudança patológica central dessa doença é a trombose nos seios venosos durais e/ou nas veias cerebrais, que leva a drenagem venosa cerebral comprometida, causando subsequentemente aumento da pressão intracraniana, edema cerebral, infarto venoso ouhemorragia 2. Para elucidar melhor seus mecanismos subjacentes e avaliar novas intervenções terapêuticas, modelos animais confiáveis e reprodutíveis são indispensáveis. C....

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Protocolo

Este protocolo foi aprovado pelo Comitê de Experimentos e Bem-Estar Experimental de Animais da Capital Medical University com a Aprovação nº AEEI-2025-138. Os reagentes e os equipamentos utilizados estão listados na Tabela de Materiais.

1. Estabelecimento de um modelo modificado de SSST de rato induzido porFeCl 3

  1. Use ratos machos de Sprague-Dawley (SD) com idades entre 6 e 7 semanas, pesando entre 220 e 250 g para o experimento. Antes dos procedimentos cirúrgicos, aclimate os ratos por 1 semana e retenha a comida por 12 horas.
  2. Prepare os seg....

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Resultados

O diagrama esquemático do modelo modificado de SSST induzido por FeCl3 é mostrado na Figura 1. Resultados experimentais demonstraram que, após a aplicação da sutura de seda saturada com FeCl3 ao SSS, o LSCI detectou uma redução significativa no fluxo sanguíneo local, indicando oclusão bem-sucedida do seio venoso e confirmando a sensibilidade do LSCI para detectar mudanças dinâmicas de perfusão (Figura 2). N.......

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Discussão

A CVT é um tipo específico de doença cerebrovascular incomum, mas potencialmente fatal1. Para investigar mais a fundo seus mecanismos patológicos e desenvolver estratégias eficazes de intervenção, os pesquisadores estabeleceram vários modelos animais de SSST, incluindo principalmente a ligadura ou oclusão deSSS 7,8,9, injeção de substância protromb.......

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Divulgações

Os autores não têm conflitos de interesse a declarar.

Agradecimentos

Esse trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (82401527).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
1 mL de seringaShenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.21-3020
Suturas de seda 2-0Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdA224
Motor de aquisição 3DFujifilm VisualSonicshttps://www.visualsonics.com/gallery/extended-3d-motor
Suturas de seda 4-0Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdA222
5% povidona-iodoShandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.https://www.lircon.cn/products_details/100.html
Seringa de 5 mLShenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.21-3023
Lâmina de barbear descartávelDongyang Jinmin Trading Co., Ltd.ST300
FeCl3MacklinI811935
Bolsa térmicaShenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.36-0001
IsofluranoCiências da Vida RWDR510-22-10
Sistema de imagem a laser de specklesCiências da Vida RWDRFLSI III
Transdutor de matriz linearFujifilm VisualSonicsUHF57x
Fita médicaSuzhou Konlida Medical Supplies Co., Ltd.B02
Micro broca craniana portátilCiências da Vida RWD78001
Suporte de agulhaCiências da Vida RWDF31025-13
Soro fisiológico normalShanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.ST341-500ml
Pomada oftálmicaShenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.19-7223
Agulhas de corte reversoShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdTJ-3-514
Plataforma de operação para roedoresShanghai Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd.30150
Lâmina do bisturiCiências da Vida RWDS31015-01
Cabo de bisturiCiências da Vida RWDS32003-12
Máquina de anestesia para pequenos animaisCiências da Vida RWDR500
Sistema de ultrassom e imagem fotoacústica para pequenos animaisFujifilm VisualSonicsVevo F2
Pinça lisaCiências da Vida RWDF12013-10
Pentobarbital de sódioSigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd.P3761
Tesoura CirúrgicaCiências da Vida RWDS14014-10
Pinças DentadasCiências da Vida RWDF12011-13
Gel de ultrassomShandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.https://www.lircon.cn/products_details/230.html

Referências

  1. Saposnik, G., et al. Diagnosis and management of cerebral venous thrombosis: a scientific statement from the American Heart Association. Stroke. 55 (3), e77-e90 (2024).
  2. Cohen, O., Pegoraro, S., Ageno, W. Cerebral venous thrombosis. Minerva Med. 112

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Reimpressões e permissões

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