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Artigo de investigação

Osthole melhora a artrite de rato através do eixo miR-34a/bcl-2

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DOI:

10.3791/69624

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15 de maio de 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Jiangsu Key Laboratory of New Drug Research and Clinical Pharmacy, and Public Experimental Research Center, Xuzhou Medical University, 2Department of Joint Surgery, Shuyang Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O osthole (OST) é um composto natural com extensas atividades farmacológicas. Este estudo sugere que a OST alivia os efeitos da Osteoartrite do Joelho (KOA) por meio do eixo miR-34a/Bcl-2, como demonstrado em estudos in vivo e in vitro em ratos, e fornece novas ideias e direções para suas aplicações de medicamentos patenteados e clínicas.

Resumo

A osteoartrite do joelho (KOA), também chamada de artrite hipertrófica ou degenerativa, é um distúrbio articular prevalente. As estratégias atuais de manejo clínico incluem terapia farmacológica, intervenção física, procedimentos cirúrgicos e tratamentos complementares. Embora essas abordagens possam aliviar os sintomas do KOA até certo ponto, elas frequentemente trazem limitações, como efeitos colaterais, eficácia limitada ou invasividade. O osthole (OST), um derivado natural da cumarina, tem sido amplamente estudado por suas propriedades medicinais, especialmente no alívio da dor nas articulações e na melhoria da função articular. Neste estudo, foram empregados ensaios CCK8, microscopia eletrônica de transmissão (TEM), coloração H&E e análise bioquímica sérica para demonstrar que a OST exerce efeitos protetores sobre condrócitos tanto in vitro quanto in vivo, sem toxicidade significativa observada. Investigações subsequentes usando TEM, coloração por laranja acridina, citometria de fluxo e western blot revelaram que a OST promove a autofagia e suprime a apoptose em condrócitos. Estudos mecanicistas adicionais por meio de qRT-PCR e ensaios com repórteres de luciferase indicaram que a OST regula negativamente o miR-34a, aumentando assim a expressão de Bcl-2 e inibindo a apoptose via a via miR-34a/Bcl-2. Em resumo, esses achados indicam que a OST protege os condrócitos tanto em modelos celulares quanto animais, atenuando o estresse induzido pelo LPS e reduzindo a inflamação e a apoptose em ratos KOA. A regulação para baixo do miR-34a e o subsequente aumento da expressão de Bcl-2 contribuem para seu efeito antiapoptótico. Esses resultados fornecem uma base teórica para o desenvolvimento de medicamentos patenteados baseados em OST e sua potencial tradução clínica na terapia com KOA.

Introdução

A Osteoartrite do Joelho (KOA) é uma doença articular comum também conhecida como artrite hipertrófica, hipertrófica ou senil do joelho. É causada pela degeneração da cartilagem articular e por alterações na estrutura ao redor da articulação. De acordo com estudos epidemiológicos, a osteoartrite do joelho é uma doença comum, especialmente emidosos 1. Sua incidência está intimamente relacionada à idade, peso, genética, lesão nas articulações e assim por diante. Funções fisiológicas também podem ser afetadas, incluindo movimento articular limitado, redução da força muscular e marcha anormal. Atualmente, no tratamento da osteoartrite do joelho, os métodos mais comuns incluem terapia medicamentosa, fisioterapia, cirurgia e terapiaadjuvante 2. Os medicamentos frequentemente incluem analgésicos, anti-inflamatórios não esteroides e medicamentos para artrite crônica para reduzir a dor e controlar a inflamação. A fisioterapia inclui compressas quentes, compressas frias, massagem e exercícios específicos de reabilitação para melhorar a função motora das articulações e reduzir a dor. O tratamento cirúrgico pode incluir cirurgia artroscópica, substituição articular artificial ou reparo morfológico ósseo articular para restaurar a estrutura e a função articular. Além disso, terapias complementares como acupuntura, fisioterapia e medicina tradicional chinesa também são amplamente utilizadas.

No entanto, embora esses tratamentos ofereçam algum alívio dos sintomas e da condição da osteoartrite do joelho, ainda existem limitações. O tratamento medicamentoso pode apresentar reações adversas e problemas de dependência; A fisioterapia exige um processo contínuo de reabilitação, e os resultados variam conforme a diferença individual; O tratamento cirúrgico é arriscado, o processo de recuperação é longo e requer uma consideração cuidadosa; E, embora a terapia adjuvante tenha recebido ampla atenção e aplicação, ainda há poucos apoios científicos para sua eficácia, é necessário estudar profundamente o mecanismo regulatório da terapia adjuvante. Na terapia adjuvante, as medicinas tradicionais chinesas para o tratamento da osteoartrite do joelho têm sido amplamente utilizadas em muitas áreas e têm se mostrado úteis. Devem existir alguns componentes da medicina tradicional chinesa que ainda não são bem conhecidos, mas que foram comprovados por meio de práticas de longo prazo e estudos de acompanhamento. Atualmente, muitos medicamentos chineses acumularam ampla experiência no tratamento da osteoartrite do joelho, como Cibotiumbarometz 3, Ligusticum wallichii Franchat4, Angelica pubescens5, entre outros. Essas ervas têm efeitos analgésicos e anti-inflamatórios que podem aliviar a dor de forma eficaz e reduzir a inflamação.

A OST é um composto semelhante à cumarina, amplamente usado na medicina como extrato natural deervas 6. Possui muitas atividades farmacológicas e é apoiado por inúmeros estudos. Estudos mostraram que o cndídio possui muitas atividades farmacológicas, incluindo antitumorais, antiinflamatórios, hiperglicemia, agregação antiplaquetária e neuroproteção, além de ter potenciais efeitos terapêuticos em muitas outrasdoenças 7. Foi relatado que a OST pode promover a apoptose das células cancerígenas ao regular a autofagia, que inibe a apoptose das células do carcinoma do ovário por autofagia mediada por LC3 e piroptose dependente deGSDME 8; A OST induz apoptose das células HT-29 por meio de estresse do retículo endoplasmático e autofagiacelular 9; A OSTs promove a apoptose do câncer colorretal por meio da supressão da sinalização AMPK/Akt, induzindo autofagia celular, ROS eferroptose 10; A OST pode inibir o crescimento do câncer colorretal ao regular a autofagia e a transdução de sinal mediada pormitocôndrias 11. Ao mesmo tempo, a OST é particularmente significativa no alívio da dor nas articulações e na melhoria da função articular, principalmente reduzindo a resposta inflamatória e aliviando a dor articular. E seus ingredientes ativos podem reduzir a liberação de substâncias inflamatórias e inibir a degeneração da cartilagem articular causada pela artrite. Comparado aos medicamentos ocidentais comuns, a OST é mais segura e tem baixa toxicidade, e o uso prolongado não gera resistência a medicamentos. Foi relatado que o osthole potencializa a osteogênese em osteoblastos ao elevar o fator de transcrição osterix via sinalização cAMP/CREB in vitro e invivo 12; A OST suprime o desenvolvimento da osteoartrite no joelho ao potencializar a autofagia ativada pela viaAMPK/ULK1 13; Cnidium lactone inibe a diferenciação dos osteoclastos por meio da via de sinalização 14 do p38 MAPK e PI3K-Akt e do c-Fos/NFATc1; Cnidium lactone previne a perda óssea em um modelo de rato ovariectomizado por meio da via de sinalização estrogênio-α/BMP-2/Smad 15; A OST melhora a osteoporose ao aumentar a autofagia das células-troncomesenquimatosas 16. No entanto, a observação e análise indicaram que a maioria dos estudos permaneceu no fenótipo, ou não revelou o mecanismo de regulação da via de sinalização da participação em medicamentos em nível molecular, o que também foi uma das razões pelas quais compostos extraídos da medicina tradicional chinesa são difíceis de serem amplamente aceitos. Portanto, é de grande importância explorar mais a fundo o mecanismo de regulação biológica do Osthole em nível molecular para seu medicamento patenteado e aplicação clínica.

MiRNA é um pequeno RNA que regula a função biológica inibindo a expressão dos genes-alvo. Muitas medicinas tradicionais chinesas são conhecidas por exercer seus efeitos biológicos regulando o miRNA. Da mesma forma, a OST também foi relatada como influenciando a expressão dos miRNA. Primeiro, a OST desempenha um papel biológico antitumoral por meio do miRNA. Foi relatado que a OST inibiu a proliferação celular e induziu a apoptose celular por meio da diminuição da expressão de CPEB2 por meio da regulação positiva do miR-424 no carcinomaendometrial 17; A OST suprime a proliferação e acelera a apoptose das células de glioma humano por meio da regulação para cima de miR-16 e da regulação para baixo de MMP-9-18; A OST apresenta efeito antitumoral no retinoblastoma ao inibir a via PI3K/AKT/mTOR e regular o eixo hsa_circ_0007534/miR-214-3p19. Segundo, a OST também pode afetar os processos fisiológicos dos órgãos corporais por meio da regulação do miRNA, que a OST alivia a remodelação vascular pulmonar ao modular a reprogramação metabólica lipídica mediada por miR-22–3p 20; A OST protege ratos contra lesões por isquemia/reperfusão do miocárdio por meio da regulação negativa do miR-30a e promoção da autofagia21; A OST protege os cardiomiócitos H9c2 contra danos induzidos pelo trastuzumabe ao aprimorar a autofagia através da via de sinalização p38MAPK/mTOR22. Terceiro, a OST pode desempenhar um papel neuroprotetor por meio do miRNA, que estimulou a diferenciação das células-tronco neurais em neurônios em um modelo celular da doença de Alzheimer por meio da regulação positiva do miR-9 e resgatou a prejuízo funcional dos neurônios do hipocampo em camundongos transgênicosAPP/PS1 23; A OST diminui os níveis de beta-amiloide por meio da regulação para cima de miR-107 na doença de Alzheimer 24. No entanto, não foi relatado que o miRNA possa ser regulado por OST para tratar osteoartrite do joelho. A literatura mostrou que o miR-34a potencializa a apoptose dos condrócitos e facilita o desenvolvimento da osteoartrite ao direcionar a DLL1 e regular a via PI3K/AKT 25. O RNA longo não codificante MEG3 regula a progressão da osteoartrite regulando o eixo miR-34a/Klotho 26; A regulação negativa do miR-34a promove a proliferação e inibe a apoptose das células osteoartríticas da cartilagem de rato ativando a via PI3K/Akt 27. Portanto, o KOA poderia ser tratado com OST via regulamentação miR-34a? Portanto, é hipotetizado que a OST pode tratar a osteoartrite do joelho regulando o miRNA.

Em resumo, a OST é um composto natural com extensas atividadesfarmacológicas 28. Anteriormente, o grupo de pesquisa confirmou que a OST pode melhorar a osteoartrite no joelho em ratos, mas a transdução celular do sinal e os mecanismos moleculares subjacentes a esse efeito biológico não foram totalmente esclarecidos. Neste artigo, ao estudar mais a fundo as vias de sinalização de miRNA, autofagia e apoptose da OST, pretende-se esclarecer o mecanismo da OST no tratamento da osteoartrite do joelho e fornecer novas ideias e direções para sua medicina patenteada e aplicação clínica.

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Protocolo

Todos os estudos foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidado e Tratamento de Animais da Universidade Médica de Xuzhou. Os reagentes e os equipamentos utilizados estão listados na Tabela de Materiais.

1. Modelo animal

Ratos adultos machos e fêmeas Sprague-Dawley (SD) pesando entre 250 e 300 g foram adquiridos no Centro Experimental de Animais da Universidade Médica de Xuzhou. Os ratos eram criados em uma sala especial livre de patógenos. Os procedimentos experimentais com animais, incluindo tratamento, cuidado e escolha de desfechos, seguiram as diretrizes "Pesquisa em Animais: Relatando Experimentos In Vivo". Experimentos com animais foram realizados com randomização. Ratos SD foram agrupados em quatro grupos (n = 8 por grupo): grupo normal (sem cirurgia, alimentação normal) (grupo normal), grupo simulado (cirurgia simulada: incisão de pele e músculo sem transeção do ligamento cruzado anterior [ACLT], seguida de gavage salino), grupo KOA/NC (cirurgia ACLT + gavage salino), grupo KOA/OST (cirurgia ACLT + gavage OST). O modelo KOA do joelho do rato foi construído usando o método de transeção do ligamento cruzado anterior (ACLT), conforme descritoanteriormente 29. O grupo com soro fisiológico foi administrado via gavage, e o grupo OST recebeu OST via gavage por 4 semanas. A dose de OST é de 50 mg/kg de peso corporal (dissolvido em PEG 400 e diluído com soro fisiológico), e a frequência de administração é uma vez ao dia por 4 semanas na subseção de ratos. Depois, ratos foram eutanasiados para análise (seguindo protocolos institucionalmente aprovados). Os tecidos eram imediatamente congelados em nitrogênio líquido ou fixados em paraformaldeído a 4%.

2. Cultura celular

A linha celular de condrócitos humanos (C28/I2) foi obtida da American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). As células foram cultivadas conforme as diretrizes do ATCC e usadas em até 6 meses.

Condições da cultura: meio DMEM/F-12 suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina-estreptomicina, incubado a 37 °C em uma incubadora umidificada com 5% de CO2 .

Tratamentos: As células foram semeadas em 1 × 106 células/poço em placas de 6 poços; após 24 horas de aderência, foram tratados apenas com LPS (1 μg/mL) ou com OST (100 μM) por 24 horas.

3. Ensaios para viabilidade celular

Células condrócitos foram coincubadas com OST ou LPS em diferentes concentrações em placas de 96 poços. O ensaio CCK8 reflete a viabilidade celular ao detectar absorvância (OD450 nm) usando um leitor de microplacas, com valores de OD mais altos indicando células mais viáveis.

Gradiente de concentração de OST: 0, 25, 50, 100, 200, 400 μM (incubado por 24 horas). O ensaio CCK8 mostrou viabilidade celular de >90% em todas as concentrações, confirmando a não toxicidade do composto.

Gradiente de concentração de LPS: 0, 0,1, 0,5, 1, 2 μg/mL (incubado por 24 horas). O grupo LPS de 1 μg/mL tinha ~50% de viabilidade celular (em comparação com o grupo Ctrl), então essa concentração foi escolhida para experimentos subsequentes.

4. Coloração por hematoxilina e eosina (H&E) e coloração com Safanin O

Os tecidos eram embutidos com parafina, desencerados, reidratados e tingidos com reagentes H&E e Safranin O/Fast Green conforme as instruções do fabricante. Condições de coloração: a concentração de trabalho da AO foi de 1 μg/mL; As células foram incubadas a 37 °C por 5 minutos no escuro.

Método quantitativo: A taxa de positividade do AVO foi calculada contando células contendo pontos laranja em 5 campos aleatórios (×ampliação de 400) por amostra usando o software ImageJ. Em seguida, as seções eram capturadas sob um microscópio BX43 (ampliação ×400).

5. Citometria de fluxo

As células foram colhidas e ressuspensas em solução de Annexin-V FITC/PI para análise de apoptose. Condições de incubação: As células foram ressuspensas a 1 × 106 células/mL em solução de Annexin-V FITC/PI (KeyGEN) e incubadas em temperatura ambiente por 15 minutos no escuro.

Estratégia de gate: Espalhamento direto (FSC) vs. portas de espalhamento lateral (SSC) eram usadas para excluir detritos de células; As células FITC⁺/PI⁻ da Annexin-V foram definidas como apoptóticas precoces, e as células FITC⁺/PI⁺ da Annexin-V como apoptóticas tardias. O gráfico de gate está incluído no Arquivo Suplementar 1 (dados brutos de citometria de fluxo). As células foram coletadas por um citômetro de fluxo. Os dados foram analisados usando o software Flow Jo.

6. Transfecção de plasmídeos e mimetismo

MiR-34a mimic (34a-mimic) e controle-mimic não específico (NC) foram obtidos de uma fonte comercial. As células foram transfectadas com plasmídeos usando LipofectamineTM 3000 conforme as instruções do fabricante.

7. Mancha de laranja acridina

A autofagia geralmente era avaliada por coloração com acridina laranja nas células. Após as células tratadas com LPS ou OST em concentrações específicas por 24 horas, elas foram incubadas com AO (1 μg/mL) a 37 °C por 5 minutos no escuro. As imagens foram capturadas usando um microscópio confocal a laser. A taxa de positividade do AVO foi calculada contando células contendo pontos laranja em 5 campos aleatórios (×ampliação de 400) por amostra, usando o software ImageJ. Os dados são reportados como média ± SD de três experimentos independentes.

8. Observação com microscópio eletrônico de transmissão

As amostras foram fixadas em 2,5% de glutaraldeído e 1% de tetróxido de ósmio, depois desidratadas, enxaguadas e impregnadas. Após a polimerização, as amostras foram cortadas em seções de 70 nm de espessura usando um ultramicrônomo. A ultraestrutura das células foi observada por microscopia eletrônica de transmissão.

9. Imunoblotting

Anticorpo monoclonal de camundongo (Abs) contra Bcl-2 (#68103), anticorpo policlonal de coelho contra LC3 (#14600-1-AP), IL-6 (21865-1-AP) e anticorpo monoclonal de camundongo contra β-Actin (#66009-1-lg) foram adquiridos da Proteintech. Os ABS secundários conjugados com IRDye 800CW Cabra (policlonal) anti-Rabbit IgG (H+L) ou IRDye 800CW Cabrita (policlonal) anti-Mouse IgG (H+L) foram obtidos comercialmente. As células foram lisadas em um ensaio de lise de célula inteira, separadas por eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida. As proteínas foram detectadas usando o Abs primário e o correspondente Abs. A carga proteica era de 30 μg por pista; diluições primárias de anticorpos: Bcl-2 (1:1000), LC3 (1:1500), β-tubulina (1:5000); anticorpos secundários (IRDye 800CW) foram usados em 1:10.000, IL-6 (1:800). Em seguida, as bandas proteicas foram capturadas pelo sistema de imagem a laser de quimioluminescência aprimorada. As bandas proteicas foram quantificadas pelo software ImageJ.

10. Reação em Cadeia Quantitativa em Tempo Real da Polimerase (qRT-PCR)

RNAs totais foram isolados de células usando o reagente Trizol. CDNAs derivados de RNAs totais foram sintetizados usando o kit regente de cDNA e analisados pelos métodos SYBR Green. CDNAs derivados de miRNAs foram sintetizados usando o kit de cDNA de primeira fita miRcute mais miRNA e analisados pelo kit qPCR miRcute plus miRNA. Todos os procedimentos foram realizados de acordo com o protocolo do fabricante. A expressão do transcrito alvo foi calculada usando o método 2-△△CT . GADPH e U6 foram usados como controle de carga para mRNA e miRNA, respectivamente. A sequência do primer está listada na Tabela 1.

11. Ensaios de repórteres de Luciferase

Plasmídeo repórter psiCHECK2-Bcl-2-3′UTR (WT) e plasmídeo repórter psiCHECK2-Bcl-2-3′UTR com um mutante no local de ligação do miR-34a (Mut). Os repórteres e o imitador de miR-34a foram co-transfectados em células de condrócitos usando LipofectaminaTM 3000. As células foram colhidas e lisadas após 24 horas de transfecção. A intensidade da luciferase foi então medida usando o kit Dual-LumiTM Luciferase Reporter Gene Assay conforme as instruções do fabricante.

12. Testes de análise da marcha

O sistema MGT-PR foi usado para observar os movimentos em movimento dos membros de ratos em cada grupo. Antes dos testes, os ratos foram autorizados a se adaptar ao ambiente da pista. Os dados da marcha durante a caminhada livre foram registrados, com três testes válidos consecutivos para cada rato. Os parâmetros analisados incluíram comprimento do passo, duração do balanço e coordenação entre os membros posteriores direito e esquerdo.

13. Análise estatística

Os experimentos foram realizados em triplicado e repetidos independentemente pelo menos três vezes. A análise estatística foi realizada usando o software GraphPad Prism 9. Os dados foram apresentados como média ± SD. As diferenças estatísticas foram avaliadas por ANOVA unidirecional (teste post hoc de Tukey) para comparações múltiplas, ou pelo teste t de Student bidirecional para duas comparações experimentais em grupos. As diferenças foram aceitas como significativas em p < 0,05.

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Resultados

Células condrócitos protegidas por OST tanto in vitro quanto in vivo
Como produto natural, o perfil de segurança da OST exige uma investigação minuciosa. Este estudo avaliou primeiro sua citotoxicidade em condrócitos in vitro usando o ensaio CCK8. Os resultados indicaram que a OST não apresentou toxicidade em relação aos condrócitos mesmo em uma concentração de 400 μM (Figura 1A). Para examinar os e...

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Discussão

Acima de tudo, a OST protegeu os condrócitos do estresse induzido por LPS in vitro e aliviou inflamação e apoptose em ratos KOA in vivo. Esses efeitos protetores estavam associados à regulação descendente do miR-34a e a um consequente aumento na expressão de Bcl-2, consistente com o papel proposto do eixo miR-34a/Bcl-2 na mediação da ação da OST.

Neste estudo, foi constatado que a OST promove a autofagia das células condrócitos e diminui a ap...

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Divulgações

Os autores não têm conflitos financeiros de interesse.

Agradecimentos

Essa pesquisa foi financiada pelo Laboratório Chave de Novos Medicamentos e Medicina Clínica (XZSYSKF2021037) da Universidade de Jiangsu. Os experimentos deste artigo foram parcialmente realizados no Centro Público de Pesquisa Experimental e no Centro de Animais de Laboratório da Universidade Médica de Xuzhou. Agradecimentos são estendidos a Fuxing Dong, Kejia Zhang, Jinxia Kuai e Min Zhang pela ajuda entusiasmada.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Tetróxido de ósmio a 1%Tecnologia Ruixin
2,5% de glutaraldeídoTecnologia Zhongjingkeyi
Laranja acridinaSigmaAmresco 0360
Solução Fitc/PI Annexin-VKeyGENKGA107
BCL-2Proteintech#68103
Kit de Contagem de Células-8VICMED39.VC5001L
QuimioluminescênciaOdyssey CLX
Microscópio confocalLeicaSTELLARIS 5
DMEM/F-12HyClone12.SH30023-01
Kit de ensaio gênico Dual-LumiTM Luciferase ReporterBeyotimeRG088
Kit regente de cDNA FastKingTIANGENKR116-03
Citômetro de fluxoBDFACS Canto II
Linha celular de condrócitos humanosColeção de Cultura do Tipo AmericanoYTLK280144
LC3Proteintech#14600-1-AP
LipofectaminaTM 3000InvitrogenL3000015
LipopolissacarídeosSigma29.L2880
Ensaio de liseKeyGENKGP704-100
Leitor de microplacasBioTekSinergia 2
Kit de cDNA de primeira fita miRcute mais miRNATIANGENKR211-02&ZWNJ;
Kit qPCR miRcute mais miRNATIANGENFP411-02
OstholeMedchemexpressO815127-25g
Eletroforese em gel de SDS-poliacrilamidaNCM BiotechP2012
SoroClark BiociênciaFB15015
SYBR GreenTIANGENFP217-01‌
Microscopia eletrônica de transmissãoFEITecnai G2
Ultra-microtomeLeciaUC7
Microscópio de fluorescência verticalOlympusBX43
β-ActinProteintech#66009-1-LG

Referências

  1. Kan, H. S., et al. Non-surgical treatment of knee osteoarthritis. Hong Kong Med J. 25 (2), 127-133 (2019).
  2. Dantas, L. O., Salvini, T. F., McAlindon, T. E. Knee osteoarthritis: Key treatments and implications for physical therapy. Braz J Phys Ther. 25 (2), 135-146 (2021).
  3. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1-15 (2022).
  4. Li, H., et al. Intra-articular injection of a nanosuspension of tetramethylpyrazine dihydroxynaphthalenate for stronger and longer-lasting effects against osteoarthritis. J Biomed Nanotechnol. 17 (6), 1199-1207 (2021).
  5. Qiang, R., et al. Carbon quantum dots derived from herbal medicine as therapeutic nanoagents for rheumatoid arthritis with ultrahigh lubrication and anti-inflammation. ACS Appl Mater Interfaces. 15 (32), 38653-38664 (2023).
  6. Sun, M., Sun, M., Zhang, J. Osthole: An overview of its sources, biological activities, and modification development. Med Chem Res. 30 (10), 1767-1794 (2021).
  7. Yang, S., et al. Osthole: An up-to-date review of its anticancer potential and mechanisms of action. Front Pharmacol. 13, 945627(2022).
  8. Liang, J., et al. Osthole inhibits ovarian carcinoma cells through LC3-mediated autophagy and GSDME-dependent pyroptosis except for apoptosis. Eur J Pharmacol. 874, 172990(2020).
  9. Zhou, X. H., Kang, J., Zhong, Z. D., Cheng, Y. Osthole induces apoptosis of HT-29 cells via endoplasmic reticulum stress and autophagy. Oncol Lett. 22 (4), 726(2021).
  10. Zhou, X., Kang, J., Zhang, L., Cheng, Y. Osthole inhibits malignant phenotypes and induces ferroptosis in KRAS-mutant colorectal cancer cells via suppressing AMPK/Akt signaling. Cancer Chemother Pharmacol. 92 (2), 119-134 (2023).
  11. Song, J., et al. Osthole impairs mitochondrial metabolism and the autophagic flux in colorectal cancer. Phytomedicine. 125, 155383(2024).
  12. Zhang, Z. R., et al. Osthole enhances osteogenesis in osteoblasts by elevating transcription factor Osterix via cAMP/CREB signaling in vitro and in vivo. Nutrients. 9 (6), 588(2017).
  13. Ma, T., et al. Osthole suppresses knee osteoarthritis development by enhancing autophagy activated via the AMPK/ULK1 pathway. Molecules. 27 (23), 8624(2022).
  14. Liang, J. Y., Wu, W. L., Chen, Y. X., Liu, H. The efficacy and potential mechanism of cnidium lactone to inhibit osteoclast differentiation. Artif Cells Nanomed Biotechnol. 47 (1), 3087-3093 (2019).
  15. Wang, Z., Bao, H. W., Xu, Y. J. Cnidium lactone prevents bone loss in an ovariectomized rat model through the estrogen-α/BMP-2/Smad signaling pathway. J Cell Biochem. 121 (10), 4567-4576 (2020).
  16. Zheng, X., et al. Osthole improves therapy for osteoporosis through increasing autophagy of mesenchymal stem cells. Exp Anim. 68 (4), 347-355 (2019).
  17. Lu, K., Lin, J., Jiang, J. Osthole inhibits cell proliferation and induces apoptosis through decreasing CPEB2 expression via upregulating miR-424 in endometrial carcinoma. J Recept Signal Transduct. 40 (1), 89-96 (2020).
  18. Lin, K. A. I., et al. Osthole suppresses proliferation and accelerates apoptosis of human glioma cells via upregulation of microRNA-16 and downregulation of MMP-9. Mol Med Rep. 12 (3), 4592-4597 (2015).
  19. Lv, X., et al. Osthole exhibits an anti-tumor effect in retinoblastoma through inhibiting the PI3K/AKT/mTOR pathway via regulating the hsa_circ_0007534/miR-214-3p axis. Pharm Biol. 60 (1), 417-426 (2022).
  20. Niu, Z., et al. Osthole alleviates pulmonary vascular remodeling by modulating microRNA-22-3p mediated lipid metabolic reprogramming. Phytomedicine. 96, 153840(2022).
  21. Lu, W. Osthole down-regulates miR-30a and promotes autophagy to protect rats against myocardial ischemia/reperfusion injury. Turk J Thorac Cardiovasc Surg. 27 (2), 178-184 (2019).
  22. Hou, H., Yang, Y., Chen, R., Guo, Z. Osthole protects H9c2 cardiomyocytes against trastuzumab-induced damage by enhancing autophagy through the p38MAPK/mTOR signaling pathway. Toxicol In Vitro. 93, 105704(2023).
  23. Li, S. H., et al. Osthole stimulated neural stem cells differentiation into neurons in an Alzheimer’s disease cell model via upregulation of microRNA-9 and rescued functional impairment of hippocampal neurons in APP/PS1 transgenic mice. Front Neurosci. 11, 340(2017).
  24. Jiao, Y., et al. Osthole decreases beta amyloid levels through upregulation of miR-107 in Alzheimer’s disease. Neuropharmacology. 108, 332-344 (2016).
  25. Zhang, W., et al. miR-34a enhances chondrocyte apoptosis, senescence and facilitates development of osteoarthritis by targeting DLL1 and regulating PI3K/AKT pathway. Cell Physiol Biochem. 48 (3), 1304-1316 (2018).
  26. Xiong, G., et al. Long non-coding RNA MEG3 regulates the progress of osteoarthritis by regulating the miR-34a/Klotho axis. Ann Transl Med. 10 (8), 454(2022).
  27. Tao, H., Cheng, L., Yang, R. Downregulation of miR-34a promotes proliferation and inhibits apoptosis of rat osteoarthritic cartilage cells by activating PI3K/Akt pathway. Clin Interv Aging. 15, 373-385 (2020).
  28. Zafar, S., et al. Osthole: A multifunctional natural compound with potential anticancer, antioxidant and anti-inflammatory activities. Mini Rev Med Chem. 21 (18), 2747-2763 (2021).
  29. Zhang, H., Zheng, W., Li, D., Zheng, J. miR-146a-5p promotes chondrocyte apoptosis and inhibits autophagy of osteoarthritis by targeting NUMB. Cartilage. 12 (10), 1467S-1477S (2021).
  30. Lu, R., et al. Oroxin B alleviates osteoarthritis through anti-inflammation and inhibition of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway and enhancement of autophagy. Front Endocrinol. 13, 1060721(2022).
  31. Lv, X., et al. miR-34a-5p was involved in chronic intermittent hypoxia-induced autophagy of human coronary artery endothelial cells via Bcl-2/beclin 1 signal transduction pathway. J Cell Biochem. 120 (11), 18871-18882 (2019).
  32. Ma, L., et al. Knee osteoarthritis therapy: Recent advances in intra-articular drug delivery systems. Drug Des Devel Ther. 16, 1311-1347 (2022).
  33. Zhang, W., et al. GelMA hydrogel as a promising delivery system for osthole in the treatment of rheumatoid arthritis: targeting the miR-1224-3p/AGO1 axis. Int J Mol Sci. 24 (17), 13210(2023).

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