Aqui, apresentamos um protocolo inovador, fácil de construir e de baixo custo para recircular alojamentos de peixes-zebra.
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Aqui, apresentamos um protocolo inovador, fácil de construir e de baixo custo para recircular alojamentos de peixes-zebra.
O peixe-zebra é um organismo-modelo popular para realizar estudos in vivo , em parte por serem considerados baratos para abrigar e manter. No entanto, sistemas de habitação comercial geralmente são proibitivamente custosos para grupos de pesquisa menores. Existem múltiplos sistemas de alojamento personalizados para peixes-zebra, mas apresentam problemas com condições de água inconsistentes, baixas taxas de reciclagem e tanques de alojamento frágeis. Essas questões de projeto reduzem a viabilidade desses sistemas para programas de pesquisa de longo prazo. Neste artigo, apresentamos um suporte personalizado para recirculação de peixes-zebra, que é inovador, acessível e fácil de construir. Esse sistema, quando combinado com nosso projeto de aquário de alojamento publicado anteriormente, permite o abrigo de peixes-zebra em qualquer estágio do desenvolvimento. Existem múltiplos níveis de filtração e esterilização, que estabelecem condições estáveis de água, permitindo o estabelecimento de uso prolongado do peixe-zebra para pesquisa e ensino. O sistema descrito abaixo é usado por nosso laboratório para abrigar peixes-zebra há 9 anos, representando múltiplas gerações de peixes alojados e centenas de experimentos.
Peixes-zebra são um organismo-modelo comum usado em pesquisas biológicas. Eles são tolerantes a muitas condições ambientais e se reproduzem facilmente com alto número defilhotes 1. Eles são um ótimo modelo para uma ampla gama de pesquisas biológicas, incluindo saúde humana, inflamação, genética etoxicologia 1,2,3,4,5,6,7. Eles também oferecem uma opção econômica com requisitos relativamente baixos de manutenção. No entanto, criar um sistema de habitação para peixes-zebra pode ser intimidador, especialmente para quem tem menos experiência – muitos fatores devem ser levados em consideração, como taxas de recirculação, qualidade da água e os desafios de abrigar peixes-zebra em múltiplas etapas de seu desenvolvimento.
Sistemas comerciais de habitação de peixes-zebra costumam ser caros, o que pode representar uma barreira significativa para laboratórios menores ou para aqueles com financiamento limitado. Esses sistemas podem custar dezenas de milhares de dólares, especialmente com adições como comedouros automáticos e autolimpeza, mas essas adições são desnecessárias para laboratórios com orçamento limitado, assim como para aqueles que esperam utilizar o peixe-zebra em uma sala de aula. Para esse tipo de instalação, construir um sistema de moradia para peixes-zebra é muito mais razoável. Outros artigos foram publicados com planos de construção personalizados, mas cada um tem suas desvantagens. Kim et al. demonstraram um método para criar um sistema fácil de construir com 80tanques 8. Na época da publicação, custava cerca de $500 para ser construído, mas atualmente seria muito mais caro. Paige et al. criaram um plano destinado a melhorar o método mencionado anteriormente, mas o custo de construção foi de $15009. Além disso, a manutenção de uma colônia de 150 peixes era estimada em US$ 1000 a cada3 meses.
Neste artigo, estabelecemos um método para construir um sistema de alojamento e filtragem recirculante para peixes-zebra, que, quando combinado com o projeto de tanquede alojamento publicado anteriormente 10, é significativamente mais barato do que os sistemas comercialmente disponíveis. Além disso, é simples de construir com algumas ferramentas comuns. O sistema, quando utiliza 30 tanques individuais (~70% da capacidade), também é relativamente silencioso, produzindo cerca de 60 dBA de som, equivalente a uma conversa normal ou11 na televisão. Com algumas modificações simples ou rodando com menos tanques, acreditamos que o sistema poderia ser usado diretamente em sala de aula sem distrair os alunos. O projeto geral do sistema de recirculação é o seguinte: a água aquecida e condicionada é bombeada de um depósito de drenagem através de uma linha principal de abastecimento de água, que a leva para cima pelo centro do rack de alojamento. Válvulas esferóricas ligadas à linha principal de fornecimento fornecem água para um deflector, que fornece água com vazão ajustável para os tanques individuais em cada nível. Para evitar o acúmulo excessivo de pressão na linha principal de suprimento, o sistema utiliza uma linha de liberação de pressão com uma válvula esfera ajustável para devolver o excesso de água ao sumideiro. A água que entra nos tanques pelo defletor recircula dentro dos tanques, com o "transbordamento" capturado por uma calha ligeiramente inclinada que passa pelo centro do suporte de alojamento em cada nível. A água do canal então flui para um tubo de retorno vertical, que a retorna à bacia de sumidouro, onde é limpa por um filtro de cilindro multiestágio e esterilizada com luz UV.
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O protocolo descrito aqui foi previamente aprovado para uso pelos Comitês Institucionais de Cuidado e Uso de Animais tanto da Northern Michigan University quanto da Shenandoah University.
NOTAS: Será necessário um serrote para cortar a tubulação de PVC para a parte de retorno de água do sistema. Esse protocolo usava uma ferramenta rotativa, mas outros tipos de serras serão suficientes para a maioria dos cortes, além daqueles necessários para os tubos de retorno do tanque. Para cortar o tubo de vinil transparente para as linhas de abastecimento de água, foi usado um canivete. Para apertar braçadeiras de mangueira, é necessário usar uma chave de fenda. Para conectar os retornos do tanque de PVC ao suporte de retorno de PVC, será necessário um furadeiro com uma broca de 3/16" (0,47 cm) (também funcionam brocas um pouco maiores/menores). Para evitar lesões, é preciso ter cuidado ao usar ferramentas elétricas. O protocolo a seguir descreve a produção de um suporte de carcaça que será combinado com o projeto detanque 10 publicado anteriormente. Se um tanque alternativo for utilizado, alterações no abastecimento de água e nas instruções de retorno de água do tanque serão necessárias para se adequar às especificações do tanque.
1. Montar a estrutura da carcaça (Figura 1A)
2. Suporte de suporte para sistema de retorno de tanque (Figura 1A)
3. Montagem do sistema de retorno de água (Figura 1B-D)
NOTA: Os tubos de retorno de água recebem água dos tanques individuais e a levam para o tubo de retorno vertical que transporta a água para o sumidouro, onde é filtrada e, por fim, recircula de volta ao sistema.
4. Montar a bacia de sump
NOTA: A bacia de sumidouro limita flutuações na condutividade, pH, níveis de nitrato/nitrito e temperatura atuando como reserva de água (Figura 1A). Múltiplos estágios de filtração também ocorrem na bacia de sump.
5. Montagem da linha principal de abastecimento de água (Figuras 1A,F)
NOTA: A linha principal de suprimento pode ser construída e desmontada rapidamente para limpeza devido à falta de adesivos. Para evitar vazamentos, toda a tubulação de vinil pode ter braçadeiras de mangueira acopladas. Esses podem ser adicionados após a primeira reinicialização do sistema e a avaliação de vazamentos.
6. Montagem da linha de liberação de pressão (Figura 1A, painel esquerdo)
7. Montagem das linhas de abastecimento de água do tanque (Figura 1E)
NOTA: As linhas de abastecimento de água dos reservatórios transportam água da linha principal para os tanques individuais.
8. Preparar o sistema para operação
NOTA: As medidas subsequentes devem ser tomadas para garantir a saúde e a sobrevivência dos peixes que serão alojados no sistema. Esse processo deve ocorrer pelo menos uma semana antes da adição dos peixes ao sistema.
9. Manutenção de rotina
10. Solução de problemas comum
11. Considerações adicionais
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O protocolo apresentado aqui criará um sistema de alojamento recirculante de três níveis para peixes-zebra (Figura 1). Quando combinado com o design modular de aquáriode peixes-zebra 10, publicado anteriormente, o sistema pode facilmente acomodar de 30 a 36 aquários individuais, com cada grande aquário capaz de comportar ~40 peixes com densidade inferior a 10 peixes adultospor litro e 1. No total, o sistema de habitação pode acomodar mais de 1....
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O sistema de habitação recirculante descrito aqui pode ser construído no total por menos de $1500. O custo anual é estimado em apenas $75, assumindo que não sejam necessárias substituições importantes de componentes, com todos os componentes disponíveis por varejistas locais e online. Não são necessárias ferramentas ou habilidades especiais para concluir a construção deste projeto, o que o torna acessível para a maioria montá-lo, embora seja essencial modificar o comprimento dos materiai...
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Os autores não têm nada a revelar.
Os autores gostariam de agradecer aos muitos estudantes que ajudaram a manter e modificar o sistema de moradia nos últimos 9 anos.
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| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0.17" inner diameter clear vinyl tubing 20 ft | Lowes | 814315 | |
| 1-1/2" PVC pipe cap x3 | Lowes | 23899 | |
| 2" PVC pipe cap x1 | Lowes | 23900 | |
| 3/4" inner diameter clear vinyl tubing 5 ft | Lowes | 879267 | |
| 3/4" to 1/2" threaded elbow and 1/2" adaptor | Lowes | 23931 | |
| 3/4" x 3/4" x 1/2" Tx4 | Lowes | 3311539 | |
| 3/8" hose barb nylon T coupler x3 | Lowes | 877110 | |
| 3/8" inner diameter clear vinyl tubing 5 ft | Lowes | 879263 | |
| 40 gallon sump basin | Tractor Supply | 2229846 | |
| 5/8" inner diameter clear vinyl tubing 10 ft | Lowes | 814320 | |
| AAwipes 8-in-1 Aquarium Test Kit | Amazon | B0D2RG3LXR | |
| Attmu 50 pcs reusable fastening straps | Attmu | 8350503624091 | |
| Bacto-sure high-density foam filter (2-pack) | Pets Warehouse | 8729780257055 | |
| Cascade CCF3UL Canister Filter, 100 Gallon, 265sph | Aquatic Warehouse | 30172015946 | Comprado na Amazon |
| Charlotte pipe 10 ft PVC pipe 1-1/2" diameter x2 | Lowes | 23830 | |
| Charlotte pipe 2-in x 2-in PVC DWV sanitary T | Lowes | 23395 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 1-1/4" diameter | Lowes | 23982 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 2" diameter | Lowes | 23832 | |
| Charlotte pipe 5 ft PVC pipe 3/4" diameter | Lowes | 23990 | |
| Honeforest TDS meter | Walmart | B073713G5F | |
| Industrial strength rack 48 x 24 x 72 | Lowes | 23395 | |
| Ispinner 28 pcs worm gear hose clamps | Home Depot | 313206783 | |
| JoyTube plastic hose barb reducer pipe fittings 5/8" to 3/8" pack of 3 | Amazon | B08DNJY57G | |
| LASCO 2-in x 2-in x 2-in dia Elbow PVC fitting | Lowes | 23910 | |
| Pond pump submersible (2100 GPH) | Amazon | B004DFMZME | |
| Qmseller stainless steel aquarium valve x6 | Amazon | B07PDSVH3N | |
| Submersible aquarium heater | Amazon | B0DLG8VSL8 | |
| Tetra whisper easy to use air pump for aquariums | Amazon | B0009YF4FI | |
| UV light sterilizer Coralife Turbo Twist UV sterilizer, 6x | Coralife | 96316156005 | Comprado na Amazon |
| Uxcell drip irrigation barbed value for 5/8" double male barbed valve aquarium water flow control - 3 pcs x2 | Harfington | 1003460 | Comprado na Amazon |
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