O novo modelo de rato para trombose severa do seio venoso cerebral (CVST), construído por semi-ligadura combinada com cloreto férrico e trombina, pode imitar de forma mais eficaz o mecanismo fisiopatológico da CVST grave em humanos.
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Artigo de método
O novo modelo de rato para trombose severa do seio venoso cerebral (CVST), construído por semi-ligadura combinada com cloreto férrico e trombina, pode imitar de forma mais eficaz o mecanismo fisiopatológico da CVST grave em humanos.
A trombose do seio venoso cerebral (CVST) é um tipo distinto de AVC que afeta predominantemente jovens e mulheres grávidas. Aproximadamente 60% dos pacientes com CVST desenvolvem infarto ou hemorragia cerebral venosa, definida como CVST grave. Atualmente, diversos métodos são empregados tanto nacional quanto internacionalmente para induzir CVST em modelos animais. No entanto, esses modelos não conseguem replicar totalmente os mecanismos fisiopatológicos subjacentes ao CVST grave, limitando assim a pesquisa básica sobre essa condição. Um modelo inovador de CVST grave em ratos pode ser estabelecido por semi-ligadura em combinação com cloreto férrico e trombina. A semi-ligadura foi alcançada medindo o fluxo sanguíneo cerebral (CBF) na região de interesse (ROI) antes e depois da ligadura do seio sagital superior (SSS) usando um Imager de Perfusão Speckle (PSI). A semi-ligadura do SSS induz estase sanguínea dentro do seio venoso. A aplicação tópica de cloreto férrico na superfície do SSS leva a lesão endotelial, enquanto a injeção direta de trombomba no seio cria um estado hipercoagulável localizado. Essa abordagem imita efetivamente os três componentes principais da formação da trombose: estase, dano endotelial e hipercoagulabilidade. O modelo resultante apresenta uma carga trombótica substancial envolvendo múltiplos seios venosos simultaneamente. O trombo induzido permanece estável por pelo menos 1 semana. A coloração com cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC) demonstra que esse modelo pode produzir consistentemente infarto venoso cerebral de grande área, que persiste por até 7 dias. Esse modelo pode até induzir convulsões epilépticas em ratos, uma capacidade que modelos anteriores não conseguiram alcançar. A ruptura da barreira hematoencefálica foi observada usando coloração de azul de Evans (EB). Portanto, o modelo de CVST severo estabelecido por semi-ligadura combinada com administração de cloreto férrico e trombocina replica com maior precisão a progressão fisiopatológica do CVST severo em humanos, demonstrando estabilidade e confiabilidade.
A trombose do seio venoso cerebral (CVST) é uma forma distinta de distúrbio cerebrovascular que difere do AVC arterial. Ocorre com mais frequência em indivíduos maisjovens 1,2, especialmente emgestantes 3, e sua incidência tem aumentado de forma constante nos últimos anos. Um estudo epidemiológico realizado na Austrália indica que a incidência anual de CVST varia de 13,0 a 15,7 casos por milhãode pessoas 4. Nos Estados Unidos, a incidência de CVST apresenta uma tendência de alta com a idade. No entanto, a idade máxima de início p....
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O protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Experimentos e Bem-Estar Animal Experimental da Capital Medical University (AEEI-2020-119) em Pequim, China, e foi realizado em conformidade com os regulamentos do Comitê de Cuidado e Uso Animal da instituição.
1. Preparação animal
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Processo de modelagem
A Figura 1A mostra o SSS do rato, conforme indicado pela seta. O rostral e o caudal do SSS foram semiligados (Figura 1B), seguidos pela aplicação de fio embebido em cloreto férrico na superfície das regiões ligadas (Figura 1C). A trombina foi posteriormente injetada nos segmentos ligados para induzir trombose. A área denotada pela seta, onde a trombina foi .......
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Um modelo inovador de CVST severo construído por semi-ligadura combinada com cloreto férrico e trombona não pode apenas simular estase sanguínea e lesão endotelial, mas também o estado hipercoagulável do sangue, ou seja, simula os três elementos da formação datrombose 25. O que é ainda mais empolgante é que o modelo de rato desenvolvido com esse método é capaz de apresentar convulsões epilépticas. Convulsões epilépticas representam uma manifestação clínica notável.......
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Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.
Agradecemos ao Instituto de Doenças Críticas do Cérebro da Capital Medical University pelo apoio técnico. Este estudo foi apoiado pela Fundação de Ciências Naturais de Pequim (Nº 7182064).
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 2,3,5-cloreto de trifeniltetrazólio | Sigma-Aldrich | ||
| 40% cloreto férrico | Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., China | ||
| Evans blue | Sigma-Aldrich | ||
| Bolsa térmica | Aparelho de Harvard Holliston, MA, EUA | 50-7061-f, | |
| Broca dentária de alta velocidade | Saeshin, Busan, Coreia do Sul | Strong-207B | |
| Medidor de speckle a laser | Sistema PSI PeriCam, Suécia | ||
| Microscópio | Carl Zeiss, Inc., Berlim, Alemanha | ||
| Sutura de poliamida | Fábrica de Microaparelhos Ningbo Chenghe, China | ||
| Quadro estereotáxico | David Kopf Instruments, Tujunga, Califórnia, EUA | ||
| Trombona | Chang Chun Lei Yunshang Pharmaceutical Co., Ltd., China |
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