Avaliação Quantitativa do Potencial de Remoção de Carbono de Macroalgas: Um Protocolo Padronizado para Estimativa de Biomassa e Cálculo de Remoção de Carbono

Resumo

Este estudo apresenta um protocolo padronizado e reprodutível para estimar a biomassa macroalgal e calcular seu potencial de remoção de carbono. O fluxo de trabalho harmoniza amostragem, cálculo e relatórios para melhorar a comparabilidade entre estudos, sendo demonstrado em comunidades representativas de kelp e sargaço no norte e sul da China.

Resumo

Macroalgas são um componente importante dos sistemas de carbono azul. No entanto, seu potencial de remoção de carbono continua difícil de comparar entre estudos porque os projetos de amostragem em campo, modelos de estimativa de biomassa e fluxos de trabalho contábeis variam substancialmente. Este estudo apresenta um protocolo padronizado e reprodutível para estimar a biomassa macroalgal e quantificar a remoção de carbono, integrando características biológicas macroalgas, métodos de levantamento ecológico marinho e princípios de contabilidade do ciclo do carbono em um fluxo de trabalho unificado. O protocolo especifica parâmetros de amostragem consistentes, etapas de cálculo harmonizadas e registro e relatórios padronizados de dados para melhorar a comparabilidade entre estudos e facilitar a síntese regional. Demonstramos a aplicabilidade do protocolo usando estudos de caso representativos de uma comunidade offshore de algas no norte da China e de uma comunidade de sargassums da baía no sul da China, representando táxons contrastantes e habitats costeiros rasos típicos. Usando esse fluxo de trabalho, a variabilidade relativa dentro da equipe permaneceu abaixo de 10%, e o erro relativo entre equipes permaneceu abaixo de 15%, consistente com os limiares de variabilidade estabelecidos. No geral, o protocolo oferece uma estrutura operacionalmente transparente para gerar conjuntos de dados macroalgas de carbono azul comparáveis entre locais e equipes de pesquisa, apoiando levantamentos de recursos e avaliações de remoção de carbono.

Introdução

Carbono azul refere-se ao carbono capturado e armazenado em ecossistemas marinhos. É caracterizado por armazenamento de longo prazo e alta eficiência de sequestro, tornando-se um componente importante do ciclo global do carbono e um mecanismo natural crítico para mitigar as mudanças^climáticas. Dentro dos sistemas de carbono azul, as macroalgas estão amplamente distribuídas pelas zonas costeiras, intermarés e subtidais e fixam o_CO2 atmosférico em carbono orgânico por meio da fotossíntese. Parte dessa produção pode ser exportada para águas mais profundas ou offshore, onde pode contribuir para o armazenamento de carbono de longo prazo, enquanto outra parte permanece em biomassa^{em pé 2}.

No entanto, as avaliações atuais do potencial de remoção de carbono das macroalgas ainda são limitadas por uma padronização metodológica^{limitada 3}. Essa limitação se reflete principalmente em três aspectos. Primeiro, os métodos de estimativa de biomassa diferem substancialmente entre os estudos. Por exemplo, o tamanho do quadrado e o esforço amostral variam amplamente (por exemplo, 0,25 m² a 4 m²) e, em alguns casos, a replicação não é implementada, levando a grandes flutuações nas estimativas de biomassa baseadas em área. Segundo, o fluxo de trabalho de cálculo do carbono azul (ou remoção de carbono) e a seleção de parâmetros são frequentemente inconsistentes, gerando resultados contábeis divergentes mesmo sob condições ecológicas semelhantes. Terceiro, não existe um protocolo uniforme para registro e relatórios de dados, reduzindo a comparabilidade entre os resultados da pesquisa e limitando a síntese^{regional 4}.

Uma abordagem padronizada é necessária para macroalgas porque sua via de remoção de carbono difere da de plantas costeiras enraizadas, como manguezais e gramíneas. Em vez de depender principalmente do enterramento de sedimentos no local de crescimento, a remoção de carbono das macroalgas está mais intimamente ligada ao rápido acúmulo de biomassa e à exportação offshore de matéria orgânica. Esse mecanismo, aliado à alta produtividade e rápida rotatividade, torna a consistência metodológica especialmente importante ao comparar locais e espécies entre as regiões⁵.

Para suprir essa lacuna, desenvolvemos um protocolo padronizado completo que integra características biológicas macroalgas, métodos de levantamento ecológico marinho e contabilidade do ciclo do carbono em um fluxo de trabalho unificado. O protocolo é organizado em cinco módulos: (1) princípios de projeto e escopo de aplicação, (2) estimativa padronizada de biomassa, (3) cálculo padronizado de carbono azul, (4) controle de qualidade e gestão de dados, e (5) verificação do protocolo. Validamos a aplicabilidade usando estudos de caso representativos de uma comunidade de kelp offshore do norte e de uma comunidade de sargassum da baía do sul, ilustrando o uso entre espécies, histórias de vida e habitats costeiros^{rasos 6}.

Neste estudo, a captação de carbono por macroalgas é chamada de remoção de carbono, em vez de sequestro de carbono a longo prazo. Como as macroalgas geralmente crescem em substratos duros sem sepultamento direto de sedimentos no local, elas não atendem inerentemente a um critério de armazenamento de >100 anos. Apenas uma fração do carbono derivado de macroalgas pode alcançar sequestro em escala centenária por meio da exportação e subsequente enterramento de detritos.

Protocolo

Use esse protocolo para gerar estimativas comparáveis de biomassa macroalgal e remoção de carbono entre locais e equipes de pesquisa. Uma visão geral do fluxo de trabalho completo é mostrada na Figura 1.

1. Noções básicas do projeto de protocolos

1. Princípios de design
   1. Alinhe a amostragem e a estimativa de biomassa com características biológicas macroalgas e contexto ecológico local (por exemplo, forma de crescimento, estrutura da comunidade e dinâmicas de nutrientes/sazonais) para garantir que as medições reflitam variabilidade natural.
   2. Selecione a janela de amostragem para corresponder ao período local de crescimento vigoroso das macroalgas-alvo e evite amostras durante períodos de dormência ou decadência.
   3. Determine o teor de carbono usando métodos validados de análise elementar. Documente a preparação da amostra, as configurações analíticas e os procedimentos de calibração, e aplique o mesmo método consistentemente em todas as^{amostras 7}.
   4. Estime a taxa de remoção de carbono usando uma estrutura de cálculo pré-definida. Parametrize termos relacionados à fotossíntese usando entradas ambientais localmente apropriadas (por exemplo, duração da luz e temperatura da água) e fontes de dados fisiológicos quando aplicável.
   5. Escreva cada etapa como uma instrução operacional inequívoca e especifique critérios de aceitação (limiares de QC) para medições de campo e laboratório, garantindo reprodutibilidade entre regiões e^{equipes 8}.
   6. Use equipamentos de laboratório e de campo comuns disponíveis (por exemplo, balanças, forno de secagem, analisador elementar, fita métrica) e reporte especificações-chave (por exemplo, resolução da balança, temperatura de secagem).
   7. Otimize os procedimentos sem remover os requisitos de controle de qualidade e priorize etapas que afetem materialmente a biomassa, o teor de carbono e os cálculos das produções.
2. Escopo de aplicação
   1. Aplique esse protocolo a macroalgas acopladas e flutuantes (por exemplo, kelp e sargassum).
   2. Não aplique este protocolo a microalgas ou algas planctônicas.
   3. Limite a aplicação a águas costeiras rasas (por exemplo, áreas costeiras próximas à costa, baías e zonas intertidais) onde a amostragem seja operacionalmente viável. Estabeleça um limite de profundidade de alvo de <20 m para operações rotineiras de amostragem.
   4. Não aplique este protocolo a comunidades macroalgais de águas profundas onde as condições de amostragem e os requisitos de equipamentos excedem a capacidade convencional^{de levantamento 9}.

2. Processo padronizado de estimativa de biomassa

1. Preparação preliminar
   1. Determine os períodos de amostragem com base nas condições ambientais locais e na fenologia específica da espécie, em vez de meses do calendário.
   2. Defina o "período de crescimento vigoroso" como o período de máxima acumulação de biomassa e atividade fotossintética, com base em observações locais ou evidências regionais.
   3. Selecione o tempo de amostragem usando informações fenológicas específicas do local em sistemas de baixa e alta latitude. Documente a base para a seleção temporária (por exemplo, registros locais de monitoramento ou estudos regionais⁾¹⁰.
2. Configuração e amostragem de quadrados
   1. Coloque o quadro quadrático de forma estável sobre o substrato em cada ponto de amostragem (Figura 2). Certifique-se de que a diferença de altura vertical dentro da estrutura seja <5 cm (verifique usando uma régua ou referência fixa).
   2. Selecione locais de amostragem para representar a heterogeneidade espacial da comunidade macroalgal dentro da área de estudo. Para zonas intertidais, posicione os quadrados dentro de 1 hora após a maré baixa para minimizar a dessecação e os efeitos relacionados à exposição ao ar nas medições de biomassa e carbono.
   3. Estabeleça pelo menos 3 a 5 sítios (ou blocos) por área de estudo, dependendo da extensão do habitat e da heterogeneidade. Em cada local, amostre 3 quadrados replicados (total mínimo: 9-15 quadrados por área de estudo).
   4. Definir a área quadrática de acordo com a morfologia da espécie e a forma de crescimento (por exemplo, 1 m² para comunidades dominadas por kelp; 2 m² para macroalgas flutuantes ou dispersamente distribuídas⁾¹¹.
   5. Realize uma verificação inicial de variabilidade usando os três primeiros quadrados de cada local. Se o coeficiente de variação (CV) da biomassa seca por unidade de área exceder 10%, adicione quadrados até que o CV caia para ≤10%. Os principais parâmetros padronizados de amostragem e os limiares de aceitação são resumidos na Tabela 1.
   6. Coloque as amostras coletadas no gelo imediatamente após a colheita. Mantenha a temperatura de transporte entre 5 e 10 °C para reduzir a degradação térmica.
   7. Entregue as amostras ao laboratório em até 24 horas após a coleta. Se o transporte exceder 24 horas, mantenha amostras em água do mar para comparar a salinidade do local e monitore a condição da amostra regularmente.
3. Medição do parâmetro de biomassa
   1. Medição de peso fresco
      1. Retire amostras dos sacos e enxágue delicadamente com água desionizada 2-3 vezes para remover sedimentos e sais presos. Limite o tempo total de enxágue a ≤30 s para reduzir a perda de água dos tecidos. Colete biomassa de cada quadrado de forma consistente (incluindo holdfasts, stipes e blades, a menos que o desenho do estudo especifique o contrário).
      2. Drene a umidade da superfície usando papel absorvente. Substitua o papel 2-3 vezes até que não reste água visível na superfície da amostra.
      3. Coloque a amostra em um recipiente pré-pesado (por exemplo, béquer ou placa de Petri). Pese usando uma balança eletrônica com precisão de ≥0,01 g. Registre a massa bruta após a estabilização e calcule o peso líquido fresco (g) subtraindo a massa do recipiente.
      4. Pese cada amostra três vezes consecutivas. Use a média como peso fresco final. Se quaisquer duas leituras diferirem em >2%, verifique a condição da amostra (por exemplo, água pingando ou colocação instável) e repita a pesagem até que o critério seja atendido.
   2. Medição de peso seco
      1. Após a medição de peso fresco, selecione aleatoriamente três subamostras representativas de cada amostra quadrática. Certifique-se de que cada subamostra pese >10 g. Subamostras secas a 60 °C. Após cada intervalo de secagem, resfrie as subamostras até temperatura ambiente em um dessecador antes de pesar.
      2. Armazene o material restante para análise do teor de carbono. Se a análise ocorrer em até 24 horas, refrigere a 4-10 °C em recipientes selados e rotulados e mantenha as amostras no escuro. Para armazenamento mais longo, congele a −20 °C.
      3. Continue secando até atingir peso constante. Defina peso constante como uma diferença de ≤0,05 g entre duas medições consecutivas. Registre o peso seco (g) da subamostra.
      4. Calcule a razão seco/fresca (R_df) como (peso seco) / (peso fresco) para cada subamostra. Se o CV de R_df for ≤5%, use a média R_df para converter o peso fresco total em peso seco total para aquele quadrado. Se o CV exceder 5%, aumente o número de subamostras para cinco e reestime R_df.
   3. Medição da altura e cobertura da planta
      1. Selecione aleatoriamente 10 indivíduos representativos (esporofitos/frondes) em cada quadrado. Meça a altura do talo (cm) desde o ponto de fixação até o tecido vivo intacto mais alto (excluindo pontas quebradas/erodidas). Registre as alturas individuais e calcule a altura média quadrática (Havg).
      2. Para algas agrupadas, selecione de 3 a 5 agrupamentos, meça a altura média por agrupamento e calcule o Havg geral.
      3. Meça a cobertura usando o método da grade. Subdivida o quadrado em 100 grades iguais (10 cm × 10 cm).
      4. Conte o número de grades em que a cobertura de algas-alvo excede 50% (N). Calcule a cobertura como C (%) = (N/100) × 100 e reporte até um^{decimal 21}. Onde N é o número de grades a partir de 100.
4. Modelo de cálculo de biomassa
   1. Cálculo da biomassa por unidade de área: Todas as equações, variáveis e unidades de relatório usadas no fluxo de trabalho de cálculo da biomassa são resumidas na Tabela 2.
      1. Calcular o peso fresco por unidade de área (FW_por, g/^{m 2}): (1)
      2. Calcule o peso seco por unidade de área (DW_por, g/^{m 2}): (2)
         Onde A é a área do quadrado (m²), FW_tot é o peso fresco total do quadrado (g).
         NOTA: Se existirem múltiplas réplicas em um ponto de amostragem, calcule FW_por e DW_por cada réplica e reporte a média como o valor do ponto de amostragem
   2. Estimativa da biomassa populacional
      1. Determine a área de distribuição populacional (S,^{m 2}). Se houver imagens de sensoriamento remoto disponíveis, combine levantamentos de campo com imagens de sensoriamento remoto para obter coordenadas de fronteira, delinee a fronteira populacional em software GIS e calcule S conforme¹². Se imagens de sensoriamento remoto não estiverem disponíveis, meça o comprimento e a largura da população com uma fita métrica. Estima S usando a fórmula da área retangular e divide áreas irregulares em múltiplos retângulos para cálculo separado antes de somar para obter o total de S.
      2. Calcule a biomassa populacional total (B, t): (3)
         Onde 10⁶ converte gramas em toneladas métricas. (t; 1 t = 10,3 kg).
      3. Se a biomassa diferir entre sub-regiões populacionais (por exemplo, áreas marginais vs. núcleo), calcule DW_por para cada partição separadamente, multiplique pela área de cada partição e some os resultados para obter B.
   3. Cálculo dinâmico da biomassa
      1. Calcular a taxa de crescimento (r, ^dia-1): (4)
         Onde_{a extremidade} DW é o peso seco por unidade de área no final do período (g/m²), o_início do DW é o peso seco por unidade de área no início do período (g/m²), e t é o tempo de crescimento (dias).
      2. Calcule a biomassa média anual (DW_{avg_year}, g/^{m 2}) como a média de DW_i de todos os eventos de amostragem dentro de um ano:
         (5)
         Onde n é o número de amostras por ano (adimensional), referindo-se ao número total de eventos de amostragem independente realizados dentro de um ano (por exemplo, levantamentos sazonais ou mensais), i é um índice que representa cada tempo de amostragem dentro de um ano usado para calcular a biomassa média anual, e DW_i é o peso seco por unidade de área do i-ésimo evento de amostragem (g/m²).

3. Processo padronizado de cálculo do carbono azul

1. Determinação do teor de carbono
   1. Coloque as amostras secas que já atingiram peso constante (ou seja, o material reservado para análise do teor de carbono) em um triturador e moa por 2-3 minutos para homogeneizar o material. Use um moedor mecânico ou um pilão para obter partículas uniformes adequadas para análise de carbono.
   2. Peneie o material homogeneizado através de uma peneira de 100 malhas (tamanho da abertura ≈150 μm). Colete a fração do peneira e transfira-a para frascos pré-numerados e pré-secos.
   3. Armazene as amostras pré-tratadas em um dessecador para minimizar a absorção de umidade. Conclua a determinação do teor de carbono em até 7 dias.
   4. Verifique a absorção de umidade durante o armazenamento e aplique uma correção de massa seca quando necessário. Pese uma aliquota da amostra pré-tratada armazenada como_{m antes}, depois sece novamente no forno a 60 °C até peso constante e pese como_{m depois}.
   5. Calcule a taxa de absorção de umidade (MR, %) como: (6)
      Ao informar o teor de carbono, expresse os valores com base em massa seca verdadeira usando RM quando a captação de umidade não for negligenciável.
2. Método de referência: Análise elementar
   1. Calibre o analisador elementar usando um material de referência certificado antes da determinação da amostra. Garanta que o erro de calibração seja <0,5%.
   2. Defina as condições de operação: temperatura de combustão de 950 °C, temperatura de redução de 650 °C e vazão de gás transportador de 200 mL/min.
   3. Pese de 5 a 10 mg da amostra pré-tratada em uma cápsula de estanho pré-pesada, depois dobre e compacte a cápsula para evitar vazamentos durante a combustão.
   4. Carregue a cápsula no analisador elementar e permita que o instrumento complete combustão, redução, separação e detecção automaticamente.
   5. Repita a determinação três vezes para cada amostra. Use o valor médio como o teor final de carbono (C, %)
      (7)
      Onde m_C é a massa de carbono na amostra (mg), m_amostra é a massa total da amostra analisada (mg).
   6. Se o desvio padrão relativo (RSD, %) das três medições exceder 1%, remeça até que o critério de aceitação seja atingido. Calcule a RSD como:
      (8)
      Onde SD é o desvio padrão das três medidas C e C̄ é sua média.
3. Método alternativo: queima (perda por ignição)
   1. Use esse método apenas quando um analisador elemental não estiver disponível. Indique claramente esse método no relatório e aplique o procedimento de correção descrito em 3.3.5.
   2. Coloque de 5 a 10 g de amostra seca pré-tratada em um cadinho. Seque a 60 °C até peso constante, depois queime em uma fornalha de abafamento a 550 °C por 4-6 horas. Resfrie em um dessecador e pese o resíduo.
   3. Calcule C (%) como: (9)
      Onde m₀ é a massa seca da amostra antes da queima (mg),_{m cinza} é a massa do resíduo após a queima (mg).
   4. Para cada lote, determine C para 3 a 5 amostras representativas usando análise elementar. Ajustar uma equação de correção entre C derivado da combustão e C da análise elementar e aplicar a equação de correção a todos os resultados derivados da combustão do mesmo lote.

4. Cálculo da taxa de remoção de carbono

1. Taxa de remoção de carbono baseada na taxa de crescimento
   1. Calcular a taxa de remoção de carbono (CR, g C ^{m-2 d-1}): (10)
      Onde ΔDW é o crescimento da biomassa por unidade de área (_extremidade DW−DW_inicial, g m⁻²). C é o teor de carbono (em decimal, por exemplo, 35,2% = 0,352), t é o tempo de crescimento (dias).
      NOTA: Use os mesmos nós de início e fim usados para_{DW start} e_{DW end} para definir t e registrar as datas de amostragem e o comprimento do intervalo para reprodutibilidade.
2. Taxa de remoção de carbono baseada na produtividade primária (método de garrafa clara-escura)
   1. Prepare frascos de incubação pareados (claros e escuros). Enxágue as garrafas três vezes com água do mar do local, depois encha com água do sal do local, minimize o espaço de cabeça e rotule as garrafas com antecedência.
   2. Coloque material macroalgal representativo em cada garrafa. Use uma quantidade de biomassa que evite o aglomerado e permita que as algas mantenham uma orientação natural durante a incubação.
   3. Calibre o medidor de oxigênio dissolvido (DO) conforme as instruções do fabricante, usando água saturada de ar como referência. Confirme que o erro de medição é ≤0,1 mg L⁻¹.
   4. Meça o DO inicial nas garrafas claras e escuras e registre os valores (DO₀, _branco e DO₀, _preto, mg L⁻¹).
   5. Incube as garrafas por 24 horas sob condições quase naturais de temperatura e luz no local da amostragem. Mantenha as garrafas intactas durante a incubação e evite superaquecimento devido à exposição solar direta ou artefatos de sombreamento.
   6. Meça o DO final na garrafa clara e na escura (DO₁, _branca e_{DO 1}, _preta, mg L⁻¹).
   7. Calcule as mudanças do DO como: (11)
      (12)
   8. Calcule a produção líquida de oxigênio como: (13)
      Onde V é o volume de água do mar (L).
   9. Converter a produção de oxigênio em fixação de carbono (C_fix, mg C): (14)
      Onde O_líquido é a produção líquida de oxigênio (mg_{O 2}), 0,375 é o coeficiente (1 mg_O2 corresponde a 0,375 mg C fixo)
   10. Calcule a taxa de remoção de carbono com base na produtividade primária (_{produtividade} CR, g C m⁻² d⁻¹) como:
       (15)
       onde 1000 converte mg em g, A é a área amostral (projetada) (m²) e t é o tempo de incubação (dias).
       NOTA: Durante a incubação, certifique-se de que as algas permaneçam em estado natural e evite distúrbios físicos. Registre a temperatura da água do mar e as condições aproximadas de luz durante a incubação para relatar consistência.
3. Integração e correção dos dois métodos
   1. Calcule o CR médio como: (16)
   2. Calcule o erro relativo (RE) como: (17)
      NOTA: Se RE < 10%, use CRavg como CR final. Se RE ≥10%, verifique os nós de tempo e a consistência operacional (por exemplo, correspondência da definição do intervalo de crescimento, tempo de incubação e estimativa da área amostral) e repita as etapas de medição ou cálculo que mais contribuem para a discrepância.
   3. Calcule o CR corrigido (_{CR corr}, g C m⁻² d⁻¹) como: (18)
      Enquanto a_média CR é a taxa de remoção de carbono medida (g C m⁻² d⁻¹),_{a luz} T é a duração da luz medida (h). T_{light_stand} é a duração padrão da luz (h).

5. Conversão do armazenamento e fluxo de carbono

1. Calcule o armazenamento de carbono (_{armazenamento} C, t C): (19)
   Onde B_{avg_year} é a biomassa populacional média anual (t), e C é o teor de carbono (decimal)
2. Defina o fluxo anual de carbono (Fc, t C ano-1) como sumidouro de carbono de longo prazo corrigido (CS_{long_corr}):
   (20)
3. Converter Fc para equivalente a CO₂ : (21)
   onde 1 t C = 3,67 t CO₂. As relações entre armazenamento de carbono, taxa de remoção de carbono, métricas de sumidouro de carbono e conversões de fluxo usadas neste protocolo são resumidas na Figura 3.

6. Sistema de controle de qualidade

1. Controle de qualidade na fase de amostragem
   1. Fornecer treinamento unificado ao pessoal de amostragem para garantir operações padronizadas para configuração de quadrados, coleta de amostras e registro de parâmetros (consulte a Tabela 1).
   2. Administre uma avaliação após o treinamento. Exigir que o erro de layout do quadrado seja <5% e o erro de medição do peso fresco seja <2%. Permitir que o pessoal participe da amostragem de campo somente após a aprovação na avaliação.
   3. Calibre balanças eletrônicas usando pesos padrão (por exemplo, 100 g ou 500 g) antes de cada sessão de amostragem. Registre os resultados da calibração na tabela de calibração do instrumento. Recalibre o balanço se ele for movido durante a amostragem.
   4. Calibre localizadores GPS em um local com coordenadas conhecidas antes de fazer a amostragem. Certifique-se de que o erro de posicionamento seja <5 m. Se as medições forem feitas sob sombra ou sinal ruim, registre o desvio e as coordenadas corretas durante o processamento^{de dados 13}.
   5. Calibre termômetros de água e medidores de salinidade diariamente usando soluções padrão. Certifique-se de que o erro de calibração da temperatura da água seja <0,2 °C e o erro de calibração de salinidade seja <0,2.
   6. Meça a temperatura e a salinidade da água do mar ambiente em cada local de amostragem no momento da coleta e registre os valores no banco de dados.
   7. Defina três quadrados replicados para cada ponto de amostragem. Se o coeficiente de variação de DW_por cada três quadrados exceder 10%, adicione mais dois quadrados replicados e repita até que o coeficiente de variação seja <10%.
   8. Manter todas as amostras coletadas sob condições de refrigeração (5-10 °C) até que o processamento laboratorial seja concluído para permitir determinação adicional de réplicas quando necessário.
   9. Defina três determinações paralelas para peso fresco, peso seco e teor de carbono para cada amostra quadrada. Exija que o desvio padrão relativo seja <5% e repita a determinação caso o critério não seja atendido.
2. Controle de qualidade na fase de análise experimental
   1. Realize o pré-tratamento e análise da amostra em um ambiente de laboratório limpo para minimizar a contaminação por poeira e reagentes orgânicos.
   2. Limpe e desinfete superfícies experimentais diariamente usando álcool e seque/esterilize equipamentos reutilizáveis com^{antecedência 14}.
   3. Verifique a pressão do gás portador do analisador elementar antes de cada uso e certifique-se de que ela exceda 0,5 MPa. Inicie a medição somente quando a flutuação de temperatura do forno de combustão for <5 °C.
   4. Limpe o tubo de combustão após concluir cada lote de medições e depois que o forno esfriar até uma temperatura de operação segura para minimizar a contaminação por amostras^{cruzadas 15}.
   5. Zero saldos eletrônicos antes do uso. Meça o peso fresco e o peso seco três vezes. Exigir que o desvio padrão relativo seja ≤2% para peso fresco e ≤5% para peso seco. Determine o teor de carbono pelo menos três vezes por amostra e aplique o critério de aceitação especificado na Seção 3 (determinação do teor de carbono).
   6. Realizar incubações primárias de produtividade pelo menos em duplicação por local e repetir incubações quando os limiares de erro de medição forem ultrapassados.
3. Revisão de dados
   1. Designe dois revisores para auditar dados experimentais. Exigir que o primeiro revisor verifique a completude dos registros originais (metadados de amostragem, parâmetros do instrumento e resultados de medição).
   2. Exigir que o segundo revisor verifique a precisão dos cálculos (por exemplo, R_df, DWper, CR e conversões subsequentes).
   3. Registre problemas identificados durante a auditoria e implemente remedições ou recálculos quando necessário.
   4. Registre registros de calibração de instrumentos, desvio padrão relativo de determinações paralelas e notas anormais de tratamento de dados como evidências de QC, e vincule esses registros de QC a cada lote de amostragem no^{banco de dados 16}.

7. Gestão de dados

1. Estabeleça um modelo padronizado de banco de dados antes do trabalho de campo e use o mesmo modelo em vários locais e equipes.
2. Registre informações de amostragem, incluindo nome da área de estudo, número de bloco, coordenadas GPS dos pontos de amostragem, data da amostragem, pessoal de amostragem e condições climáticas.
3. Registre parâmetros ambientais, incluindo temperatura da água, salinidade, profundidade da água, duração da luz (luz T₎ e concentração de oxigênio dissolvido, quando disponível.
4. Registre dados de biomassa, incluindo área quadrada (A), peso quadrático fresco (FW_tot), peso seco quadrático (DW_tot), razão seca-fresca (R_df), biomassa por unidade de área (DW_per), área de distribuição populacional (S) e biomassa populacional total (B).
5. Métricas de carbono azul recorde, incluindo teor de carbono (C), taxa de remoção de carbono (CR), sumidouros de carbono de curto prazo (CS_short), sumidouros de carbono de longo prazo corrigidos (CS_{long_corr}), armazenamento de carbono_{(armazenamento de} C) e fluxo de carbono (Fc).
6. Registrar dados de controle de qualidade, incluindo registros de calibração de instrumentos, desvio padrão relativo de determinações paralelas e instruções anormais de processamento^{de dados 16}.
7. Documente os rótulos do estágio de crescimento de forma consistente (por exemplo, período de crescimento vigoroso vs. não vigoroso) e registre o mês/ano de cada campanha de amostragem.

Resultados

Caso 1: Avaliação do potencial de remoção de carbono da população de algas marinhas do norte

Área de estudo e períodos de amostragem: A amostragem de campo foi realizada na área de aquicultura de algas offshore de Qingdao, província de Shandong (profundidade da água: 5-8 m). As medições foram coletadas durante um período de crescimento vigoroso (maio de 2022) e um período de crescimento não vi...

Discussão

A principal força desse protocolo é que ele aborda diretamente a variação metodológica nas avaliações existentes do potencial de remoção de carbono de macroalgas. Na prática, diferenças nas especificações de quadrados, abordagens de medição e modelos de cálculo podem levar a estimativas de sumidouros de carbono que variam por um fator de dois a três, mesmo dentro do mesmo sistema^{costeiro 17}. Ao padronizar a sequência operacional, definições de parâmetros e lógica ...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Balanço eletrônico	METTLER TOLEDO	ML204T	Para pesar amostras
Analisador elementar	Thermo Fisher	FlashSmart	Para análise do teor de carbono
Forno	Memmert	UN55	Para secar amostras
Dispositivo GPS	Garmin	GPSMAP 65s	Para locais de gravação
Medidor de oxigênio dissolvido	YSI	ProODO	Para medir os níveis de DO