A regulação negativa da LINC00426 promove a progressão da doença renal diabética (DKD) ao induzir apoptose nas células renais e aumentar a inflamação.
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Artigo de investigação
* These authors contributed equally
A regulação negativa da LINC00426 promove a progressão da doença renal diabética (DKD) ao induzir apoptose nas células renais e aumentar a inflamação.
O estudo investiga o valor diagnóstico da LINC00426 no diabetes tipo 2 (DT2) e na doença renal diabética (DKD), juntamente com seus efeitos regulatórios nas células renais. O estudo incluiu 280 pacientes com DMT (146 casos de DKD) e 186 controles saudáveis que visitaram durante o mesmo período. A reação em cadeia quantitativa da polimerase em tempo real por transcrição reversa (RT-qPCR) confirmou que a LINC00426 sérica está reduzida em pacientes com DT2DM e DKD. A análise da característica operacional do receptor (ROC) avaliou o valor diagnóstico da LINC00426 para T2DM e DKD. A regressão logística multivariada identificou fatores de risco independentes para DKD. LINC00426 apresentaram valor diagnóstico para ambas as doenças e se correlacionaram negativamente com a razão albumina-creatinina da urina (UACR). Sua redução de regulamentação previu independentemente o desenvolvimento do DKD. Um ambiente de alta glicose (HG) inibe a expressão LINC00426 nas células HK-2 e HGMC. O ensaio CCK8, citometria de fluxo e ensaios imunossorvedores ligados a enzimas confirmaram que a HG também suprimiu a proliferação enquanto promovia apoptose e inflamação. Em contraste, a superexpressão de LINC00426 aumenta a capacidade proliferativa das células HK-2 e HGMC, inibe a apoptose e reduz as respostas inflamatórias. A regulação negativa da LINC00426 pode agravar a progressão da DKD ao inibir a proliferação das células renais (HK-2 e HGMC) e promover a apoptose e respostas inflamatórias.
Diabetes mellitus tipo 2 (DT2) é um distúrbio metabólicocrônico 1. Relatórios indicam que a DM T2 e suas complicações se tornaram uma preocupação significativa de saúde públicaglobal 2,3, representando ameaças à saúde humana e ao desenvolvimento social. Devido a hábitos de vida pouco saudáveis adquiridos aolongo do tempo 4, a prevalência de DT2 tem aumentadoanualmente 5. A nefropatia diabética (DN) foi renomeada para doença renal diabética (DKD) em 2007 6,7
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Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética Médica do Terceiro Hospital Xiangya da Central South University. Todos os pacientes e suas famílias expressaram apoio e assinaram formulários escritos de consentimento informado.
Coleta de Amostras
O tamanho da amostra foi calculado usando o software G*Power. O nível de significância (α) foi definido em 0,05, o poder estatístico (1-β) em 0,8, o tamanho do efeito (f) em 0,25 e uma taxa de evasão de 10% foi considerada. Os resultados do cálculo indicaram que pelo menos 123 participantes por grupo eram necessários ao estudar as populações do gru....
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Comparação das características basais entre indivíduos saudáveis e pacientes com diabetes tipo 2
O estudo incluiu 280 pacientes com DM 2 e 186 indivíduos saudáveis como controles. A análise dos prontuários médicos dos participantes (ver Tabela 1) revelou que a idade média do grupo controle foi de 58,91 ± 17,63 anos, em comparação com 59,50 ± 17,14 anos para os pacientes com DM T2. No entanto, não houve diferenças significativas de gênero ou obesidade .......
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A DKD representa uma complicação microvascular grave no DT2. Sua manifestação mais antiga é a presença de microalbuminúria; detectar isso nos estágios iniciais poderia potencialmente atrasar a progressão do DKD. No entanto, a microalbuminúria carece de sensibilidade na análise de urina de rotina e, consequentemente, é frequentementenegligenciada. Este estudo constatou que LINC00426 é reduzida em pacientes com DT2 e possui valor diagnóstico tanto para DMO2 quanto p.......
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Não há conflito de interesses neste estudo.
Não aplicável.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 0.25% trypsin | Gibco | 25200056 | |
| Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | Beyotime | C1062S | |
| Antibiotics for cell culture | Gibco | R-015-10 | |
| Aristo specific protein detector | GOLDSITE | GPP-100 | |
| Bax Antibody | Cell signaling Technology | 2772 | |
| BCA protein assay kit | Beyotime | P0013B | |
| Bcl-2 (124) Mouse Monoclonal Antibody | Cell signaling Technology | 15071 | |
| beta-Actin (13E5) Rabbit Monoclonal Antibody | Cell signaling Technology | 4970 | |
| Blood glucose monitor | Yuwell | 710 | |
| Caspase-3 Antibody | Cell signaling Technology | 9662 | |
| CCK-8 reagent | Sigma | 96992 | |
| ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix | Vazyme | Q711 | |
| Chloroform | Sigma-Aldrich | C2432 | |
| Clarity Western ECL Substrate | Bio-Rad | 1705061 | |
| Constant-temperature cell incubator | SaiLun | DHP-9032 | |
| D-Glucose | MedChemExpress | HY-B0389 | |
| Flow cytometer | Beckman coulted | CytoFLEX | Chloroform |
| Fluorescent quantitative PCR instrument | Roche | Light Cycler 96 | |
| Foetal bovine serum | Sigma-Aldrich | F0193 | |
| Fully automated glycated haemoglobin analyser | Hanyu medical | HLC-723G11 | Phenol |
| Gene PCR amplifier | Bio Rad | S1000 | |
| Glomerular mesangial cells, HGMC | Sunncell Biotechnology Co., Ltd. | SNP-H252 | |
| Human Basic IL-1 beta ELISA Kit | Invitrogen | ECH002 | |
| Human IL-6 ELISA Kit | Invitrogen | EH2IL6 | |
| Human kidney epithelial cells, HK-2 | Sunncell Biotechnology Co., Ltd. | SNL-165 | |
| Human TNF alpha ELISA Kit | Invitrogen | KAC1751 | |
| IkappaB alpha (L35A5) Mouse Monoclonal Antibody | Cell signaling Technology | 4814 | |
| K-SFM medium | Invitrogen | 17005-042 | |
| Lipofectamine 3000 | Invitrogen | L3000015 | |
| Mannitol | Sigma-Aldrich | M9647 | |
| Multifunctional enzyme-linked immunosorbent assay reader | TECAN | GENios Plus | |
| NF-kappaB p65 (D14E12) Rabbit Monoclonal Antibody | Cell signaling Technology | 8242 | |
| non-fat milk | Biosharp | BS102-500g | |
| Opti-MEM™ I Reduced Serum Medium | Invitrogen | 31985062 | |
| P3000 Reagent | Invitrogen | L3000-015 | |
| PBS buffer | Sangon Biotech | E607080 | |
| Phenol | Sigma-Aldrich | P1037 | |
| Phospho-NF-kappaB p65 (Ser536) (93H1) Rabbit Monoclonal Antibody | Cell signaling Technology | 3033 | |
| Primary cell complete medium | Sunncell Biotechnology Co., Ltd. | SNPM-H252 | |
| Prime Script RT reagent Kit | Takara | RR037A | |
| PVDF membranes | Merck Millipore | SE1M003M00 | |
| rotease and phosphatase inhibitor cocktail | Beyotime | P1045 | |
| Trizol | Invitrogen | 15596026CN | |
| Ultraviolet spectrophotometer | Thermo | Nanodrop 2000 |
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