Implantação de Tumores Intradérmicos como Modelo Robusto para Estudos de Imunoterapia Intratumoral do Câncer de Múrino

Kevine Silihe Kamga; Alicia M. Santos; Steve Fiering

doi:10.3791/70281

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Artigo de método

Implantação de Tumores Intradérmicos como Modelo Robusto para Estudos de Imunoterapia Intratumoral do Câncer de Múrino

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DOI:

10.3791/70281

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2 de junho de 2026

Kevine Silihe Kamga¹ , Alicia M. Santos¹ , Steve Fiering¹

¹Department of Microbiology and Immunology, Dartmouth Geisel School of Medicine

Neste artigo

Resumo

Com o crescente interesse na imunoterapia intratumoral, a seleção de modelos tumorais acessíveis e práticos é essencial. Tumores subcutâneos são fáceis de estabelecer, mas difíceis de visualizar e manipular. Neste protocolo, descrevemos métodos para gerar tumores intradérmicos que proporcionam melhor visibilidade e acessibilidade.

Resumo

Estabelecer modelos reprodutíveis de tumores murinos é essencial para avaliar a biologia do câncer e estratégias de imunoterapia. A imunoterapia intratumoral trata tumores estabelecidos com reagentes imunoestimulantes para reverter a imunosupressão local e estimular a imunidade sistêmica antitumoral. A maioria dos estudos sobre câncer em camundongos estabelece os tumores no espaço subcutâneo, o que apresenta desafios inerentes à imunoterapia intratumoral experimental devido à incapacidade de visualizar injeções intratumorais. A injeção intradérmica de células tumorais oferece uma abordagem confiável para gerar tumores visualizáveis que apoiam a injeção intratumoral precisa e reprodutível e o monitoramento da cinética do crescimento e das respostas terapêuticas. Aqui, apresentamos uma metodologia reprodutível para estabelecer e tratar tumores intradérmicos usando o modelo murino de melanoma B16F10 em camundongos C57BL/6 como nosso exemplo. Suspensões de células tumorais são injetadas intradérmicamente e, 7 a 10 dias após a implantação do tumor, quando os tumores atingem ~60 mm³, uma injeção intratumoral de agentes imunoestimulantes ou um tratamento físico como eletroporação ou aquecimento pode ser aplicada diretamente. Isso permite a administração precisa dos tratamentos e a medição do crescimento tumoral com calibradores, evitando o desafio da variabilidade inerente de múltiplos tratamentos de tumores subcutâneos que não podem ser visualizados. Ao fornecer insights detalhados sobre essa técnica, este artigo visa apoiar a reprodutibilidade e avançar a pesquisa pré-clínica em imunoterapia intratumoral.

Introdução

Modelos de tumores múrinos constituem uma ferramenta indispensável na pesquisa do câncer. Em um modelo de camundongos ótimo, seria possível induzir tumores que imitam de perto tumores humanos tanto em níveis genéticos quanto^{morfológicos 1}. Isso possibilita a avaliação e eficiência de novas abordagens terapêuticas em diferentes áreas, incluindo a imunoterapia intratumoral (ITIT). O ITIT é um campo emergente no tratamento do câncer que consiste na administração direta de agentes imunoestimulantes no microambiente tumoral (TME). Essa administração localizada pode potencializar a ativação imunológica local, reverte....