Valor Preditivo da Proteína de Ligação à Heparina para Disfunção Orgânica e Gravidade da Doença na Sepse Pediátrica: Um Estudo Retrospectivo

Resumo

Este artigo descreve um fluxo de trabalho de análise retrospectiva de dados clínicos para avaliar medições seriadas de proteína com afinidade por heparina e sua associação com disfunção orgânica, gravidade da doença e desfechos em curto prazo em crianças com sepse admitidas em uma unidade de terapia intensiva pediátrica.

Resumo

A estratificação precoce de risco na sepse pediátrica ainda é difícil porque os marcadores inflamatórios convencionais não refletem completamente a lesão endotelial ou a disfunção da microcirculação. Este estudo observacional retrospectivo de centro único avaliou se a proteína com afinidade por heparina fornece informações prognósticas sobre disfunção orgânica e gravidade da doença em crianças com sepse internadas na unidade de terapia intensiva pediátrica. Foram incluídas 150 crianças com sepse internadas no Hospital Popular da Região Autônoma Zhuang de Guangxi, China. A proteína com afinidade por heparina e marcadores inflamatórios de rotina foram medidos nas primeiras 24 horas após a admissão e novamente cerca de 48 horas depois. Foram calculadas as alterações absolutas e relativas de curto prazo na proteína com afinidade por heparina. Os desfechos incluíram progressão precoce da disfunção orgânica definida pelo Pediatric Sequential Organ Failure Assessment, alta gravidade da doença, necessidade de suporte orgânico e mortalidade por todas as causas aos 28 dias. O desempenho prognóstico foi avaliado por meio de análise da curva ROC, regressão logística multivariável, regressão de Cox, avaliação de calibração e métricas de reclassificação. Níveis mais elevados basais da proteína com afinidade por heparina e trajetórias precoces desfavoráveis estiveram associados a maior disfunção orgânica, maior gravidade da doença e uso mais frequente de ventilação mecânica, terapia vasoativa e terapia de substituição renal. A proteína com afinidade por heparina demonstrou desempenho discriminativo superior em comparação com biomarcadores inflamatórios convencionais e manteve-se independentemente associada a desfechos adversos após ajuste pelos escores de disfunção orgânica e índices laboratoriais de rotina. A inclusão de métricas da proteína com afinidade por heparina em modelos contendo escores clínicos e biomarcadores padrão melhorou a discriminação e a reclassificação de risco. Esses achados sugerem que a avaliação precoce e seriada da proteína com afinidade por heparina pode fornecer informações prognósticas úteis e complementar as estruturas existentes de avaliação de risco na sepse pediátrica na unidade de terapia intensiva pediátrica.

Introdução

A sepse é uma resposta desregulada do hospedeiro desencadeada por infecção que causa disfunção orgânica com risco de vida e continua sendo uma das principais causas de mortalidade e incapacidade nas unidades de terapia intensiva pediátrica¹. Evidências clínicas e epidemiológicas recentes indicam que a sepse pediátrica continua a representar um peso global significativo, com crianças admitidas na unidade de terapia intensiva pediátrica (UTIP) enfrentando altos riscos de instabilidade circulatória, insuficiência respiratória e disfunção múltipla de órgãos². O tratamento atual enfatiza o reconhecimento precoce e intervenção oportuna, incluindo terapia antimicrobiana, ressuscitação com fluidos, suporte vasoativo, suporte respiratório e terapia de substituição de órgãos quando clinicamente indicado. Na prática rotineira da UTIP, a intensidade do tratamento e a alocação de recursos são comumente orientadas por estruturas dinâmicas de avaliação baseadas em escores de disfunção orgânica e gravidade da doença. Embora essas abordagens tenham melhorado a padronização do tratamento da sepse, a identificação precoce de crianças com alto risco durante o curso inicial na UTIP permanece difícil nessa população clinicamente heterogênea³.

As manifestações iniciais da sepse pediátrica na UTI pediátrica são frequentemente inespecíficas⁴. A estratificação de risco é ainda mais complicada por diferenças fisiológicas relacionadas à idade, comorbidades, foco da infecção, estado imunológico e exposição prévia a tratamentos. Marcadores inflamatórios tradicionais, como proteína C-reativa (CRP), procalcitonina (PCT) e contagem de células brancas do sangue (WBC), refletem a ativação inflamatória sistêmica, mas não captam completamente os processos biológicos que contribuem diretamente para a disfunção orgânica. Em particular, eles não refletem especificamente lesão endotelial, distúrbio da perfusão microcirculatória ou vazamento capilar, que são centrais para a progressão da falência orgânica relacionada à sepse⁵. Sistemas de pontuação de gravidade fornecem um quadro clínico mais amplo, mas geralmente exigem múltiplas variáveis e medições repetidas. Como resultado, o cálculo da pontuação pode atrasar-se em relação à janela inicial de tomada de decisão, na qual os clínicos precisam identificar crianças com probabilidade de desenvolver disfunção orgânica progressiva. Isso cria a necessidade de biomarcadores que sejam tanto biologicamente relevantes quanto operacionalmente viáveis para avaliação precoce de risco na UTI pediátrica⁶.

A proteína ligadora de heparina (HBP), liberada predominantemente por neutrófilos ativados, promove a permeabilidade endotelial e o extravasamento capilar e tem sido associada à hipotensão, perfusão tecidual prejudicada e disfunção orgânica em infecções graves e sepse⁷. Em comparação com biomarcadores inflamatórios convencionais, a HBP pode refletir de maneira mais direta a ruptura do eixo endotelial-microcirculatório antes que alterações acentuadas em escores clínicos compostos se tornem aparentes. A albumina, por outro lado, é afetada pelo extravasamento capilar, consumo inflamatório, permeabilidade vascular e perda proteica relacionada a doenças críticas. Portanto, a razão entre HBP e albumina pode fornecer um sinal composto que associa a ativação endotelial mediada por neutrófilos à perda da reserva proteica circulante. Essa justificativa fisiopatológica apoiou a avaliação exploratória da razão entre HBP e albumina como um índice relacionado à gravidade no presente estudo.

Estudos anteriores em pacientes com infecção grave ou sepse relataram associações entre os níveis de HBP e a gravidade da doença, necessidades de suporte orgânico e desfechos adversos. Algumas evidências também sugerem que a dinâmica de curto prazo do HBP pode melhorar a reclassificação de risco além das medições em um único ponto temporal⁸. No entanto, as evidências em populações pediátricas baseadas em UTI pediátrica permanecem limitadas. Os estudos existentes variam quanto às janelas de coleta de amostras, definições de desfechos e estratégias de limiar, e abordagens práticas para integrar medições seriadas de HBP na avaliação de risco de sepse pediátrica ainda não estão claras. Além disso, permanece inadequadamente abordado se a heterogeneidade clínica relacionada à idade modifica o valor prognóstico do HBP.

Portanto, este estudo avaliou o valor preditivo dos níveis precoces de HBP e da dinâmica a curto prazo do HBP em crianças com sepse tratadas na UTI pediátrica, utilizando uma coorte retrospectiva baseada em dados do mundo real. Comparamos o HBP com biomarcadores inflamatórios comumente utilizados, avaliamos sua associação com disfunção orgânica definida pela avaliação pediátrica de falência orgânica sequencial (pSOFA) e examinamos seu valor prognóstico adicional quando acrescentado a indicadores clínicos e laboratoriais de rotina. Resultados estratificados por idade e medidas de gravidade relacionadas ao suporte orgânico também foram considerados para abordar a heterogeneidade clinicamente relevante. Ao apresentar um fluxo de trabalho de análise de dados clínicos retrospectivos alinhado aos mecanismos de lesão endotelial e disfunção orgânica, este estudo teve como objetivo determinar se a avaliação precoce e seriada do HBP pode complementar as estruturas existentes de avaliação de risco para sepse pediátrica na UTI pediátrica.

Protocolo

Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética institucional do Hospital Popular da Região Autônoma Zhuang de Guangxi (número de aprovação IRB: KY-ZC-2023-035). A exigência de consentimento informado foi dispensada porque esta análise retrospectiva utilizou dados clínicos desidentificados coletados durante o atendimento de rotina.

Desenho do estudo e local
Este foi um estudo observacional retrospectivo de coorte único, conduzido na Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica (UTIP) do Hospital Popular da Região Autônoma Zhuang de Guangxi. Foram avaliadas todas as admissões consecutivas na UTIP entre 1º de janeiro de 2022 e 31 de dezembro de 2025. Os dados clínicos e laboratoriais foram extraídos do sistema de prontuário eletrônico, do sistema de informações laboratoriais (SIL) e do sistema de informações de terapia intensiva.

O horário de admissão na UTI pediátrica foi definido como tempo zero para todas as janelas de exposição, biomarcadores, suporte orgânico e desfechos. Antes da extração dos dados, os critérios de elegibilidade, janelas de coleta de biomarcadores, definições de desfechos, métricas de gravidade e plano de análise estatística foram previamente especificados e implementados usando um fluxo de trabalho fixo de extração (especificação de extração do LIS versão 1.0; dicionário clínico de dados versão 1.0). Após a extração, todos os registros foram desidentificados. Dois pesquisadores verificaram independentemente os carimbos de tempo e a consistência das fontes para os valores de biomarcadores, variáveis relacionadas à avaliação pediátrica de falência orgânica sequencial (pSOFA), registros de terapia vasoativa e eventos de suporte orgânico. As discrepâncias foram resolvidas mediante revisão conjunta dos registros originais. A montagem da coorte seguiu etapas previamente especificadas, incluindo triagem, confirmação de elegibilidade, confirmação da janela de biomarcadores e revisão da completude dos desfechos. O fluxo final da coorte é apresentado na Figura 1.

Participantes e critérios de elegibilidade
Crianças com idade entre 1 mês e 14 anos admitidas na UTI pediátrica com sepse eram elegíveis. Os casos candidatos foram identificados a partir dos registros de admissão na UTI pediátrica e de diagnósticos relacionados à sepse, e posteriormente confirmados mediante revisão manual dos prontuários. A sepse foi definida como infecção suspeita ou confirmada com disfunção orgânica documentada durante o atendimento na UTI pediátrica e confirmada por avaliação baseada no pSOFA.

Para garantir exposição comparável aos biomarcadores precoces, exigia-se que os pacientes incluídos tivessem a proteína com afinidade por heparina (HBP) e a proteína C-reativa (PCR) medidas nas primeiras 24 horas após a admissão na UTI pediátrica (UTIP) e apresentassem dados suficientes para o cálculo da pSOFA. Os critérios de inclusão foram idade entre 1 mês e 14 anos, admissão na UTIP com sepse, disponibilidade de HBP e PCR entre 0 e 24 horas, e dados completos para a avaliação do desfecho primário, incluindo pSOFA basal, avaliação da pSOFA às 72 horas e acompanhamento de sobrevida. Os critérios de exclusão foram ausência de HBP ou PCR basal, permanência na UTIP inferior a 24 horas, transferência de outra UTIP com mais de 24 horas de internação prévia, admissão pós-transplante ou pós-cirurgia cardíaca, e diagnóstico de sepse secundária a infecção do trato urinário. <24 h, com variáveis-chave ausentes necessárias para a adjudicação do desfecho ou com imunossupressão grave susceptível de alterar substancialmente os perfis dos biomarcadores inflamatórios. Imunossupressão grave foi definida como neoplasia hematológica ativa, uso de quimioterapia ou terapia imunossupressora relacionada a transplante, terapia prolongada com corticosteroides sistêmicos em dose imunossupressora, imunodeficiência primária ou outro tratamento imunossupressor intensivo documentado antes ou durante a admissão na UTI pediátrica. Para admissões repetidas na UTI pediátrica, somente a primeira admissão elegível foi incluída.

Definições dos desfechos e métricas de gravidade
O desfecho primário foi a progressão precoce da disfunção orgânica nas primeiras 72 horas após a admissão na UTI pediátrica, definida como um aumento de 2 ou mais pontos no pSOFA do valor basal para o maior pSOFA registrado nas primeiras 72 horas (ΔpSOFA ≥ 2). O pSOFA basal foi o primeiro escore de pSOFA registrado entre 0 e 24 horas após a admissão na UTI pediátrica; caso múltiplos valores estivessem disponíveis, foi utilizado o escore mais próximo do horário da admissão. O valor de pSOFA às 72 horas foi definido como o pSOFA máximo registrado entre 0 e 72 horas.

A alta gravidade da doença foi definida a priori como um pSOFA máximo em 72 h ≥ 8, e esse limiar foi aplicado uniformemente nas análises categóricas. Esse limiar foi pré-especificado com base na prática de estratificação de gravidade da unidade e na sua interpretabilidade clínica para a identificação precoce de sepse pediátrica de alto risco. O pSOFA também foi analisado como uma medida contínua da carga de disfunção orgânica.

Os desfechos secundários foram choque séptico, ventilação mecânica invasiva, uso de drogas vasoativas, terapia de substituição renal contínua (CRRT), mortalidade na UTI pediátrica e mortalidade por todas as causas aos 28 dias. O choque séptico foi definido como falha circulatória persistente que exigia suporte vasoativo após a ressuscitação volêmica, com hipoperfusão tecidual documentada, incluindo lactato elevado e/ou achados anormais de perfusão periférica. Os desfechos relacionados ao suporte de órgãos foram codificados como variáveis binárias dentro de janelas precoces pré-especificadas. Para fornecer uma medida mais detalhada do suporte hemodinâmico, a pontuação vasoativa-inotrópica (VIS) também foi extraída ou calculada para pacientes que receberam terapia vasoativa nas primeiras 24 horas após a admissão na UTI pediátrica. A VIS foi utilizada como variável quantitativa de intensidade do suporte de órgãos nas análises de correlação e de associação com gravidade, enquanto o uso binário de terapia vasoativa foi mantido como um desfecho clinicamente interpretável de necessidade de tratamento.

Medição de biomarcadores e coleta de dados
HBP e PCR foram medidos no laboratório central utilizando fluxos de trabalho imunoensaios automatizados padronizados, conforme os procedimentos rotineiros de controle de qualidade clínica. Os testes de biomarcadores foram realizados em amostras de sangue venoso coletadas como parte do atendimento de rotina na UTI pediátrica e processadas de acordo com o fluxo pré-analítico padrão do laboratório. Os resultados de HBP foram relatados em ng/mL e os resultados de PCR em mg/L. O HBP foi medido utilizando um ensaio imunoturbidimétrico com reforço por partículas em uma plataforma automatizada de química clínica/imunoensaio. A PCR foi medida utilizando um ensaio imunoturbidimétrico de alta sensibilidade. O fluxo analítico e os procedimentos internos de controle de qualidade seguiram um protocolo de laboratório com controle de versão (versão 2022.1 do POP do laboratório) e permaneceram inalterados na lógica analítica principal durante o período do estudo.

Os registros laboratoriais foram exportados do LIS utilizando um fluxo de trabalho com consulta bloqueada e mapeamento de campos (especificação de extração do LIS versão 1.0), incluindo tanto o horário da coleta sanguínea quanto o horário do laudo. A HBP e a PCR basais foram definidas como os primeiros valores relatados dentro de 0–24 h após a admissão na UTI pediátrica. A HBP e a PCR do dia 2 foram definidas como as medições mais próximas de 48 h dentro de uma janela fixa de 36–60 h. Essa janela do dia 2 foi utilizada de forma consistente em todas as análises dinâmicas.

A variação absoluta de HBP foi calculada como HBP do dia 2 menos o HBP basal. A variação relativa de HBP (%) foi calculada como [(HBP do dia 2 − HBP basal) / HBP basal] × 100. Se o HBP basal estivesse abaixo do limite de quantificação do ensaio ou registrado como zero após a conversão do sistema, a variação relativa de HBP não foi calculada; esses pacientes foram mantidos nas análises utilizando HBP basal e variação absoluta de HBP, mas excluídos das análises de variação percentual. A razão HBP/albumina foi calculada dividindo-se o HBP pela albumina sérica medida dentro da janela de tempo correspondente e foi avaliada como um índice composto exploratório que reflete ativação endotelial e perda proteica relacionada ao vazamento capilar.

Além da HBP e da PCR, foram extraídos marcadores inflamatórios, relacionados à perfusão e à função orgânica, rotineiramente disponíveis, para comparação e modelos multivariáveis. Estes incluíram contagem de glóbulos brancos, procalcitonina, lactato, albumina, creatinina, contagem de plaquetas, variáveis de coagulação e variáveis de função hepática, quando disponíveis. Os valores de interleucina-6 (IL-6) e interleucina-8 (IL-8) foram extraídos do LIS quando tinham sido medidos como parte da avaliação clínica rotineira dentro das mesmas janelas precoces de avaliação. A dosagem de IL-6 e IL-8 não era obrigatória para inclusão na coorte e foi utilizada apenas nas análises em que estavam disponíveis. Essa regra foi aplicada para evitar a exclusão de pacientes que seriam elegíveis, exceto pelo fato de que a dosagem de citocinas não era rotineiramente realizada em todos os casos.

Dados demográficos, comorbidades, fonte da infecção, achados microbiológicos quando disponíveis, sinais vitais na admissão à UTI pediátrica, tratamento antimicrobiano inicial, medidas de ressuscitação e intervenções de suporte de órgãos foram extraídos do prontuário eletrônico e do sistema de informações de terapia intensiva utilizando o dicionário clínico de dados predefinido (versão 1.0). As variáveis de suporte de órgãos incluíram ventilação mecânica invasiva, terapia vasoativa, terapia de substituição renal contínua (CRRT), volume de bolo de fluidos e escore VIS nas primeiras 24 horas, quando aplicável. As variáveis necessárias para o pSOFA foram coletadas dentro de janelas previamente especificadas. Caso um componente do pSOFA gerado automaticamente fosse inconsistente com os valores originais, dois pesquisadores revisaram o prontuário e recalculariam o escore utilizando as regras de pontuação previamente especificadas. O controle de qualidade dos dados incluiu validação de carimbos de tempo, triagem de duplicatas, verificações de intervalo e distribuição, verificação da fonte de valores extremos e registro de auditoria das correções manuais.

Para preservar a reprodutibilidade evitando, ao mesmo tempo, terminologia excessivamente vinculada a marcas no texto principal do protocolo, a documentação dos ensaios foi registrada por classe do método, tipo de plataforma, ambiente de software, regras de faixa relatóvel, uso de calibradores e controles e procedimentos internos de controle de qualidade. Informações detalhadas sobre reagentes, calibradores, controles e software são fornecidas na Tabela de Materiais. O controle interno de qualidade foi realizado diariamente, e somente as séries laboratoriais que atendiam aos critérios de aceitação do laboratório quanto ao coeficiente de variação foram incluídas. Valores abaixo do limite inferior de quantificação foram ajustados para o limite inferior relatóvel. Valores acima do intervalo relatóvel superior foram ajustados para o limite superior relatóvel, exceto quando um resultado repetido e validado da mesma amostra estava disponível. As unidades laboratoriais foram verificadas quanto à consistência antes da análise; nenhuma conversão de unidades foi realizada, a menos que uma divergência de unidade no LIS fosse confirmada em comparação com o relatório original.

Dados ausentes e regras de tratamento de dados
As regras de tratamento de dados foram predefinidas. Pacientes com HBP basal, PCR basal, variáveis pSOFA basais ou variáveis pSOFA às 72 horas ausentes foram excluídos das análises do desfecho primário. Pacientes com HBP do Dia 2 ausente foram mantidos nas análises de biomarcadores basais e nos resumos gerais dos desfechos clínicos, mas excluídos das análises que exigiam índices dinâmicos de HBP. Pacientes sem medições de IL-6 ou IL-8 foram mantidos em todas as análises primárias e excluídos apenas das comparações de modelos que incluíam citocinas.

A análise de casos completos foi utilizada para cada modelo multivariável, e o tamanho da amostra específico para cada análise foi informado. A imputação múltipla não foi utilizada nas análises primárias porque o estudo focou-se nas trajetórias temporais dos biomarcadores observados e na disfunção orgânica. O potencial de viés de seleção causado pela exclusão de pacientes sem HBP basal, PCR basal ou dados completos do desfecho pSOFA foi considerado ao interpretar os resultados.

Valores laboratoriais extremos não foram excluídos unicamente por critérios estatísticos. Os valores atípicos foram verificados em relação aos registros originais e mantidos se confirmados como valores reais. Apenas erros evidentes de documentação ou de entrada de unidades foram corrigidos, e todas as correções foram registradas no log de auditoria com identificadores rastreáveis.

Análise estatística
Todas as análises seguiram um plano de análise estatística pré-especificado (versão 1.0 da especificação de análise). As variáveis contínuas foram avaliadas por inspeção visual de histogramas e pelo teste de Shapiro-Wilk. As variáveis com distribuição normal foram resumidas como média ± desvio padrão e comparadas utilizando testes t para amostras independentes. As variáveis com distribuição não normal foram resumidas como mediana (intervalo interquartílico) e comparadas utilizando o teste de Mann-Whitney U. As variáveis categóricas foram resumidas como contagens (porcentagens) e comparadas utilizando o teste qui-quadrado ou o teste exato de Fisher.

Para análises descritivas, os pacientes foram estratificados por quartis da HBP basal e separadamente pela presença ou ausência de progressão precoce da disfunção orgânica (ΔpSOFA ≥ 2). Os quartis da HBP basal foram utilizados para descrever padrões de dose-resposta ao longo da distribuição observada do biomarcador, sem assumir um ponto de corte clínico universal, pois limiares pediátricos validados de HBP para gravidade da sepse ainda são incertos e podem variar conforme a plataforma do ensaio, distribuição etária e janela de coleta. A idade foi analisada como uma covariável contínua nos modelos principais. Para abordar a heterogeneidade clínica relacionada à idade, análises subgrupadas pré-especificadas também foram realizadas utilizando estratos etários de <1 ano e ≥1 ano, com verificações exploratórias adicionais por categoria etária realizadas quando o tamanho da amostra permitiu.

As associações entre as métricas da PAF, incluindo PAF basal, PAF do dia 2, variação absoluta da PAF, variação relativa da PAF e razão PAF/albumina, e os indicadores de gravidade clínica foram avaliadas por meio de coeficientes de correlação de postos de Spearman. As variáveis que refletem suporte orgânico precoce, incluindo ventilação mecânica invasiva, terapia vasoativa, TRRCC, volume de bolo de fluido, dias de ventilação, tempo de internação na UTIP e VIS, foram consideradas como correlatos da gravidade clínica e do manejo nas análises descritivas e de associação.

O desempenho discriminativo para a progressão precoce da disfunção orgânica e gravidade elevada da doença foi avaliado utilizando curvas de característica de operação do receptor (ROC). A área sob a curva ROC (AUC) e os intervalos de confiança de 95% foram calculados para HBP, PCR, procalcitonina, lactato, albumina, pSOFA, razão HBP/albumina e modelos combinados. As AUCs foram comparadas utilizando o teste de DeLong. Os valores de corte ótimos foram identificados pelo índice de Youden, e sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e razões de verossimilhança foram relatados.

A regressão logística multivariável foi utilizada para estimar associações independentes entre as métricas de HBP e os desfechos binários de gravidade, incluindo a progressão precoce da disfunção orgânica e a alta gravidade da doença. As covariáveis foram selecionadas a priori com base na relevância clínica e na disponibilidade de dados, e incluíram idade, categoria da fonte da infecção, pSOFA basal, lactato, albumina, procalcitonina, PCR, choque séptico na admissão e variáveis de suporte orgânico precoce, quando apropriado. Os modelos preditivos principais para os desfechos de gravidade precoce foram restritos às variáveis disponíveis na janela prescrita de avaliação inicial, a fim de reduzir a sobreposição temporal com a evolução dos desfechos. O valor prognóstico incremental foi avaliado mediante a adição sequencial das variáveis de HBP ao modelo clínico basal. Para a mortalidade por todas as causas aos 28 dias, foi utilizada a regressão de riscos proporcionais de Cox, e a suposição de riscos proporcionais foi verificada por meio dos resíduos de Schoenfeld. Antes do ajuste do modelo, foi avaliada a colinearidade entre os preditores candidatos, e o número de covariáveis incluídas em cada modelo foi limitado para preservar uma razão adequada de eventos por variável.

A melhoria do modelo após a adição da HBP foi avaliada utilizando métricas de discriminação, calibração e reclassificação. A calibração foi avaliada por meio de gráficos de calibração, intercepto e inclinação da calibração e escore de Brier, com o teste de Hosmer-Lemeshow relatado como uma verificação suplementar da calibração. A reclassificação foi quantificada usando o índice contínuo de melhoria na reclassificação líquida e a melhoria integrada na discriminação. As análises de sensibilidade pré-especificadas incluíram a redução da janela de coleta do Dia 2 de 36–60 h para 42–54 h, a repetição das análises com uma definição mais rigorosa de progressão da disfunção orgânica (ΔpSOFA ≥ 3), a exclusão de valores extremos de biomarcadores clinicamente atípicos após verificação da fonte e a repetição dos modelos principais após a exclusão dos pacientes sem medidas dinâmicas completas de HBP. As análises de sensibilidade foram relatadas na seção Resultados ou em tabelas suplementares, conforme apropriado.

As análises estatísticas foram realizadas no R versão 4.3.2 utilizando um ambiente de análise fixo (lançamento do ambiente de análise v1.0). Os principais pacotes foram pROC versão 1.18.5 para análises ROC, survival versão 3.5-7 para modelos de tempo até o evento e rms versão 6.8-0 para análises de calibração. A melhoria contínua da reclassificação líquida e a melhoria integrada da discriminação foram calculadas utilizando rotinas validadas implementadas no conjunto predefinido de scripts de análise (conjunto de pacotes de scripts v1.0). Todos os testes foram bicaudais e um valor de p < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados

Características basais por estratos de HBP e status de progressão da disfunção orgânica precoce
Um total de 150 crianças com sepse foi incluído na coorte final de análise. Quando os pacientes foram estratificados por quartis basais da proteína com ligação à heparina (HBP), o HBP basal aumentou de 21,1 ng/mL (intervalo interquartílico [IQR], 15,9–26,2) no Q1 para 262,8 ng/mL (IQR, 201,6–308,7) no Q4 (p < 0,001; Tabela 1). Idade, sexo, peso corporal e comorbidades crônicas foram amp...

Discussão

Esta coorte retrospectiva de unidade de terapia intensiva pediátrica (UTIP) descobriu que a proteína ligadora de heparina (HBP) estava fortemente associada à carga de disfunção orgânica e à gravidade da doença na sepse pediátrica, fornecendo informações prognósticas adicionais além dos marcadores inflamatórios convencionais⁹. Níveis mais elevados de HBP na linha de base e aumentos maiores em curto prazo foram associados a escores mais altos na avaliação pediátrica sequencial de falência de órgãos ...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Conjunto de scripts de análise	Pesquisadores do estudo	Conjunto de scripts versão 1.0	Conjunto de scripts R com controle de versão utilizado para limpeza de dados, estatísticas descritivas, análise ROC, regressão logística, regressão de Cox, análise de calibração, análise de reclassificação, análise de subgrupos e geração de figuras/tabelas.
Analisador clínico automatizado de química/ensaio imunológico	Plataforma do laboratório central do hospital	Sistema institucional, não catalogado comercialmente	Plataforma clínica de química/ensaio imunológico totalmente automatizada utilizada no laboratório central do hospital para testes rotineiros de biomarcadores. A plataforma exata foi mantida sob o laboratório’procedimento operacional padrão
Pacote estatístico base do R	Fundação R para Computação Estatística	Incluído no R 4.3.2	Utilizado para estatísticas descritivas padrão, testes de Shapiro-Wilk, testes t, testes qui-quadrado, teste exato de Fisher’testes exatos e testes não paramétricos, quando aplicável.
Dicionário de dados clínicos	Pesquisadores do estudo	Dicionário de dados clínicos versão 1.0	Dicionário de dados desenvolvido pelo pesquisador definindo variáveis demográficas, fonte da infecção, comorbidades, intervenções, variáveis de suporte orgânico, componentes do pSOFA e desfechos.
série de analisadores imunoenzimáticos cobas e	Roche Diagnostics	Dependente da plataforma; nenhum número de catálogo de reagentes único	Família de analisadores compatível com os ensaios Roche Elecsys, incluindo IL-6. Utilizada quando o teste de citocinas foi solicitado como parte do atendimento de rotina.
Sistema de informação em cuidados intensivos	Unidade de Terapia Intensiva Pediátrica, Pessoas’s Hospital da Região Autônoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, não catalogado comercialmente	Sistema de origem para o tempo de admissão na unidade de terapia intensiva pediátrica, registros de suporte de órgãos, ventilação mecânica, terapia vasoativa, volume de bolo de fluidos, terapia de substituição renal contínua e variáveis relacionadas à avaliação pediátrica de falência sequencial de órgãos.
Conjunto de dados de análise sem identificação	Pesquisadores do estudo	Conjunto de dados institucional, não catalogado comercialmente	Conjunto de dados retrospectivo com identificação removida contendo admissões pediátricas elegíveis para sepse, medições de biomarcadores, registros de suporte de órgãos, variáveis pSOFA e dados de desfecho aos 28 dias. O acesso está sujeito à aprovação ética institucional e à governança de dados.
Diluente MultiAssay	Roche Diagnostics	7299010190	Diluente de amostra listado para os fluxos de trabalho do ensaio Roche Elecsys IL-6.
Sistema de prontuário eletrônico	Pessoas’s Hospital da Região Autônoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, não catalogado comercialmente	Sistema fonte para dados demográficos, registros de diagnóstico, anotações clínicas, comorbidades, informações sobre tratamento, sinais vitais, eventos de suporte de órgãos e acompanhamento de desfechos.
Scripts para geração de gráficos e tabelas	Pesquisadores do estudo	Incluído no conjunto do pacote de script versão 1.0	Utilizado para gerar figuras para publicação, tabelas analíticas, curvas de característica operacional do receptor, gráficos de AUC dependentes do tempo e exibições de subgrupos a partir do conjunto de dados de análise bloqueado.
Kit ELISA de Interleucina-8 Humana	Thermo Fisher Scientific / Invitrogen	BMS204-3	Kit de ensaio imunoenzimático para detecção quantitativa da interleucina-8 humana. Incluído como fonte do ensaio de interleucina-8 quando o teste de interleucina-8 estava disponível no sistema de informações laboratoriais.
Kit ELISA de Interleucina-8 Humana, formato de dez placas	Thermo Fisher Scientific / Invitrogen	BMS204-3TEN	Formato de dez placas do kit ELISA de interleucina-8 humana. Listado como um formato de ensaio disponível para a medição de interleucina-8.
Sistema de informação laboratorial	Pessoas’s Hospital da Região Autônoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, não catalogado comercialmente	Sistema de origem para HBP, PCR, procalcitonina, lactato, albumina, hemograma completo, variáveis de coagulação, funções hepática e renal, interleucina-6 e interleucina-8, quando disponíveis.
Especificação de extração do sistema de informações laboratoriais	Pesquisadores do estudo	Especificação de extração LIS versão 1.0	Especificação de extração desenvolvida pelo pesquisador, definindo variáveis do biomarcador, horário da coleta de sangue, horário do laudo, janelas de amostragem, verificações de unidade e mapeamento de campos a partir do sistema de informações laboratoriais.
Procedimento operacional padrão de laboratório	Pessoas’Laboratório Central do Hospital s da Região Autônoma Zhuang de Guangxi	SOP de Laboratório versão 2022.1	Protocolo interno com controle de versão para o processamento rotineiro de biomarcadores, operação de ensaios, regras de faixa relatóvel, controle interno de qualidade e liberação de resultados.
PreciControl Multimarcador	Roche Diagnostics	5341787190	Material de controle de qualidade listado para fluxos de trabalho do ensaio Roche Elecsys IL-6.
pacote pROC para R	CRAN / autores de pacotes R	Versão 1.18.5	Pacote R utilizado para análise de curva ROC, estimativa da AUC, intervalos de confiança e testes de DeLong.
software estatístico R	Fundação R para Computação Estatística	Versão 4.3.2	Ambiente de computação estatística utilizado para todas as análises.
pacote rms do R	CRAN / autores do pacote R	Versão 6.8-0	Pacote R utilizado para modelagem de regressão, gráficos de calibração, intercepto e inclinação da calibração, e avaliação do desempenho do modelo.
Plano de análise estatística	Pesquisadores do estudo	Versão 1.0 da especificação de análise	Plano estatístico prespecificado definindo codificação dos desfechos, análises descritivas, análise de característica operacional do receptor, modelos de regressão, métricas de reclassificação e análises de sensibilidade.
pacote survival R	CRAN / autores de pacotes R	Versão 3.5-7	Pacote R utilizado para regressão de riscos proporcionais de Cox e verificação de modelos relacionados à sobrevida.