Do Tecido à Morfometria: Um Fluxo de Trabalho Passo a Passo da Golgi–Cox para Análise Neuronal e Dendrítica da Coluna em Camundongos Adultos

Pedro Francisco Rubio-de Anda; Humberto Martínez-Orozco; Sofía Y. Díaz Miranda

doi:10.3791/71384

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Artigo de método

Do Tecido à Morfometria: Um Fluxo de Trabalho Passo a Passo da Golgi–Cox para Análise Neuronal e Dendrítica da Coluna em Camundongos Adultos

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DOI:

10.3791/71384

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5 de junho de 2026

Pedro Francisco Rubio-de Anda¹ , Humberto Martínez-Orozco¹ , Sofía Y. Díaz Miranda¹

¹Department of Developmental Neurobiology and Neurophysiology, Institute of Neurobiology - UNAM

Neste artigo

Resumo

Este artigo descreve um método passo a passo para a coloração de Golgi–Cox em camundongos adultos, abrangendo preparação de solução, impregnação de tecidos, crioproteção, seccionamento, revelação e montagem. Ele enfatiza a preservação dos tecidos e a coloração homogênea e de baixo fundo, permitindo uma visualização clara da morfologia neuronal. O método rotulou os eixos dendríticos e suporta análise morfométrica quantitativa de espinhos dendríticos.

Resumo

A análise da morfologia neuronal na saúde e na doença é fundamental para entender a função cerebral e para avaliar os efeitos das intervenções experimentais. A coloração de Golgi–Cox permanece uma técnica clássica, porém altamente relevante, para visualizar árvores neuronais completas e espinhos dendríticos. No entanto, protocolos publicados frequentemente diferem em etapas processuais críticas e frequentemente carecem de detalhes metodológicos essenciais, levando a uma variabilidade substancial na qualidade da coloração e tornando a padronização laboratorial demorada e desafiadora. Aqui, é apresentado um protocolo abrangente e passo a passo do Golgi–Cox para camundongos adultos, abrangendo todo o fluxo de trabalho, desde o manuseio in vivo e processamento de tecidos até a extração de dados de imagem e morfometria. Ele detalha considerações práticas e armadilhas comuns que influenciam a eficiência da impregnação, a integridade da seção e a relação sinal-ruído, além de fornecer orientações metodológicas para melhorar a reprodutibilidade. No geral, esse protocolo permite visualização confiável e análise quantitativa de neurônios inteiros, segmentos dendríticos e espinhos dendríticos. Espera-se que esse recurso facilite a implementação da coloração de Golgi–Cox com maior consistência, transparência e rigor técnico, ao mesmo tempo em que oferece uma estrutura clara para adaptar o método a diversos ambientes laboratoriais.

Introdução

O objetivo geral do método de coloração de Golgi–Cox é permitir a visualização em alta resolução da morfologia neuronal completa, incluindo árvores dendríticas e espinhos dendríticos, em tecido cerebral^fixo 1,2,3,4. Essa técnica permite uma análise estrutural detalhada de neurônios individuais dentro de circuitos neurais complexos, tornando-a particularmente valiosa para estudos de plasticidade sináptica, neurodesenvolvimento, neurodegeneração e remodelação estrutural dependente da^{experiênc....}