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Artigo de método

Um modelo de enterocolite acelerada com piroxicam em camundongos knockout com interleucina-10 para estudar alterações metabólicas induzidas por inflamação

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DOI:

10.3791/71448

⸱

11 de agosto de 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, The University of Texas Southwestern Medical Center, 2Department of Pathology, University of Texas Southwestern Medical Center, 3Department of Internal Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center

Neste artigo

Resumo

Esse protocolo utiliza piroxicam para acelerar o desenvolvimento da colite no modelo de camundongos knockout com interleucina (IL-10). O protocolo garante a sincronização com colite, resultando em resultados rigorosos e reproduzíveis, independentemente do sexo, da tensão de fundo ou das condições do vivário. Ele serve como um modelo útil para estudar alterações metabólicas durante a inflamação intestinal.

Resumo

A doença inflamatória intestinal (DII) é um distúrbio inflamatório crônico do trato digestivo que afeta mais de 10 milhões de pessoas no mundo todo. Embora pesquisas substanciais tenham se concentrado nos mecanismos imunológicos e nas consequências subjacentes à DII, pouco se entende sobre como a inflamação mucosa contribui para a desregulação metabólica, incluindo perda de peso e redução do apetite. Aqui, os autores descrevem um modelo camundongo de enterocolite acelerada por piroxicam em camundongos com interleucina-10-knockout (IL-10-KO) para estudar a desregulação metabólica induzida por inflamação. Sabe-se que camundongos IL-10-KO desenvolvem enterocolite espontânea e apresentam suscetibilidade aumentada à enterocolite desencadeada por infecções ou medicamentos. No entanto, condições de vivário e antecedentes de tensão foram relatadas como fatores de confusão no desenvolvimento da colite neste modelo. Piroxicam, um anti-inflamatório não esteroide (AINE), demonstrou desencadear ou acelerar enterocolite em modelos animais ao aumentar a exposição mucosa a bactérias luminais. Nesse protocolo, camundongos machos e fêmeas com IL-10-KO foram alimentados com uma dieta fortificada com piroxicam em vez da dieta regular de cfood. A ingestão de alimentos e o peso corporal foram medidos diariamente para refletir alterações metabólicas do corpo inteiro, juntamente com manifestações clínicas de enterocolite, como diarreia e sangramento retal. O protocolo é eficiente e reproduzível, induzindo enterocolite simultaneamente em múltiplos camundongos e permite a avaliação da desregulação metabólica em um modelo de doença inflamatória intestinal. Estudos adicionais que utilizem esse protocolo podem investigar os efeitos da enterocolite em outros componentes da desregulação metabólica, como o gasto energético e a composição corporal, revelando conexões mais amplas entre doença inflamatória intestinal e metabolismo do hospedeiro.

Introdução

Doença de Crohn e colite ulcerativa, conhecidas coletivamente como doença inflamatória intestinal (DII), são doenças autoimunes crônicas do trato gastrointestinal caracterizadas por inflamação mucosa, com manifestações clínicas incluindo dor abdominal, perda de peso, hematoquezia e diarreia. A DII afeta milhões de indivíduos em todo o mundo, com a maior prevalência em sociedadesocidentalizadas 1. Nos EUA, estima-se que mais de 3 milhões de pessoas sejamafetadas 2,3, com aumento da incidência e prevalência, especialmente entre crianças e jovens 4,5.

Os mecanismos exatos subjacentes à patogênese da DII permanecem incompletamente compreendidos, mas acredita-se amplamente que a doença resulte de uma resposta imune exagerada à microbiota intestinal em indivíduos geneticamente suscetíveis. Citocinas que modulam respostas inflamatórias desempenham papéis críticos na manutenção da homeostase intestinal e no desenvolvimento da DII. Entre elas, a interleucina-10 (IL-10) é uma citocina anti-inflamatória bem estudada que ajuda a manter a homeostase imunológica em humanos ao regular tanto os braços inato quanto o adaptativo da respostaimunológica 6,7. Notavelmente, polimorfismos em IL-10 e seu receptor (IL-10RA/B) foram identificados em bebês com II DE INÍCIO MUITO PRECOCE (VEO-IDI), apresentando-se classicamente com doença perianal nos primeiros meses devida 8. Essa associação é ainda reforçada pelo sequenciamento em larga escala do exoma em pacientes adultos com doença de Crohn, que identificou a IL-10RA como um locus de suscetibilidade à doença naDII 9 não monogênica. Além disso, uma via não genética envolvendo anticorpos neutralizadores de IL-10 foi descrita em pacientes com VEO-IBD, destacando ainda mais a importância dessa via na manutenção da homeostase imunemucosal 10.

Com base em estudos humanos que implicam a IL-10 em DII, camundongos de interleucina-10-knockout (IL-10-KO) foram desenvolvidos como modelo para estudar o papel da IL-10 na DII. Sabe-se que camundongos IL-10-KO desenvolvem enterocolite espontânea com uma resposta exagerada CD4+ Th1 a estímulos, tipicamente começando entre 8 e 12 semanasde idade. No entanto, o desenvolvimento de enterocolite espontânea em camundongos IL-10-KO pode ser imprevisível na ausência de um agenteacelerador 12,13,14, dependendo da cepa genética, composição da microbiota e condições de habitação 15,16. O uso de um protocolo confiável para induzir colite é fundamental para que o modelo IL-10-KO seja praticamente útil. Estudos anteriores utilizaram anti-inflamatórios não esteroides (AINEs), como o piroxicam, para induzir enterocolite em camundongos IL-10-KO17,18. No entanto, esses estudos focaram principalmente em alterações imunológicas, com relativamente pouca ênfase nos efeitos da enterocolite no metabolismo ou no papel do sexo na gravidadeda colite 19. Os autores aqui descrevem o uso de uma dieta fortificada com piroxicam para induzir enterocolite em camundongos IL-10-KO e caracterizam desregulação metabólica e respostas inflamatórias mucosas nesse modelo usando tanto camundongos machos quanto fêmeas. Esse protocolo mede o peso corporal e a ingestão de alimentos para refletir alterações metabólicas do corpo inteiro, bem como manifestações clínicas de colite e alterações histológicas e transcriptômicas que refletem inflamação mucosa. Esse modelo eficiente e reproduzível fornece uma ferramenta valiosa para investigar a conexão entre a DII e o metabolismo do hospedeiro.

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Protocolo

Todos os experimentos com animais foram realizados em conformidade com o protocolo aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidado e Uso de Animais (IACUC) do Centro Médico Southwestern da Universidade do Texas, de acordo com o "Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório" [Número de Aprovação: 2017-102011]. A eutanásia foi realizada de acordo com as diretrizes institucionais. Não foi necessária anestesia para os procedimentos realizados. Detalhes específicos dos materiais são descritos na Tabela de Materiais.

1. Estabelecimento do modelo de enterocolite acelerada por piroxicam em camundongos IL-10-KO

  1. Mantenha camundongos IL-10-KO em uma instalação específica livre de patógenos (SPF) em um ciclo de luz de 12 horas, com acesso ad libitum a comida e água.
  2. Individualmente, abrigam camundongos de 7–8 semanas, idade e sexo em gaiolas de microisolamento. Permita que os camundongos se acostumem ao alojamento individual e ao manuseio diário por pelo menos uma semana antes do início do experimento.
    NOTA: Certifique-se de que o peso corporal seja >20 g para machos ou >17 g para fêmeas, e que os camundongos estejam livres de feridas de luta.
  3. Atribua camundongos a um grupo experimental e um grupo controle. Para o grupo experimental, substitua o jantar padrão por comida fortificada com piroxicam. Para o grupo de controle, forneça comida padrão fresca. Adicione 50 g de chow a cada funil da gaiola.
    NOTA: Aloque pelo menos cinco camundongos por sexo para cada grupo. O alimento fortificado com piroxicam (200 ppm) foi preparado pela Teklad usando piroxicam fornecido pelos investigadores para a produção de uma dieta personalizada para animais de laboratório. Para minimizar a variabilidade de lote para lote, recomenda-se que todos os animais de um determinado experimento recebam comida do mesmo lote de produção. Quando possível, o mesmo lote também deve ser usado em experimentos para melhorar a reprodutibilidade.

2. Monitoramento do peso corporal e do comportamento alimentar

  1. Usando uma balança analítica, registre o peso corporal de cada rato. Pese cada camundongo individualmente no mesmo horário todos os dias, diariamente por 7 dias consecutivos. Informe o peso corporal diário como uma porcentagem do peso de base no dia 0 (definido como 100%).
    NOTA: Uma perda de peso superior a 20% indica estresse excessivo e risco de morte iminente. Ratos devem ser eutanasiados se esse limite for atingido.
  2. Usando uma balança analítica, registre o peso inicial do chow fortificado com piroxicam e do chow padrão em cada gaiola.
  3. Depois, meça o alimento restante em cada funil de gaiola no mesmo horário todos os dias, diariamente por 7 dias consecutivos.
  4. Calcule o consumo diário de comida subtraindo o peso diário do remédio restante do dia anterior.
    NOTA: Verifique rotineiramente a quantidade de comida e reabasteça se estiver abaixo de 10 g. A palatabilidade do piroxicam não influencia a ingestão e deve se assemelhar muito à da comida padrão.

3. Monitoramento da atividade da doença

  1. Nos dias 0 e 7, inspecionar visualmente pellets fecais de camundongos individuais e determinar a presença de sangue nas fezes.
  2. Se não houver sangue visível, faça um teste de sangue oculto nas fezes espalhando um pellet no cartão de teste e depois adicionando o reagente revelador fornecido. Resultados de pontuação de acordo com a Tabela 1.
  3. Nos dias 0 e 7, inspecione visualmente os pellets fecais recém-vazados para avaliar a consistência das fezes. Use pinças planas para ajudar a determinar a consistência. Resultados de pontuação de acordo com a Tabela 1.
  4. Nos dias 0 e 7, determine o grau de prolapso retal inspecionando a região perianal. Resultados de pontuação de acordo com a Tabela 1.
  5. Meça o peso corporal conforme descrito acima. Resultados de pontuação de acordo com a Tabela 1.
    NOTA: A pontuação do índice de atividade da doença (DAI) deve ser realizada de forma cega pelo mesmo pesquisador durante todo o experimento para garantir consistência, minimizar o viés do observador e melhorar a confiabilidade da avaliação.

4. Colheita de tecido cólico

  1. Eutanasiar camundongos por asfixia de CO2 e luxação cervical, conforme relatado em outroslugares 20.
  2. Coloque o rato em posição supina e borrife 70% de etanol no abdômen ventral.
  3. Levante a pele com pinças e use tesoura cirúrgica para cortar ao longo da linha média. Expõe a cavidade peritoneal e localiza o cólon.
  4. Expõe o cólon e o ceco usando dissecação contundente. Remova o cólon em bloco, incluindo o ceco e o manguito anal.
  5. Coloque o cólon em uma superfície plana e remova qualquer tecido conjuntivo.
  6. Meça e registre o comprimento do cólon.
  7. Após a medição do comprimento do cólon, remova o ceco cortando na junção ceco-cólon.
  8. Prepare uma seringa de 10 mL preenchida com soro salino tamponado com fosfato (PBS) com uma agulha de aço reutilizável de ponta esférica calibre 22 acoplada. Enfie a agulha no cólon e limpe o conteúdo intestinal.
  9. Coloque o cólon lavado em uma placa de Petri contendo PBS e enxágue para remover o conteúdo residual. Depois de liberado, use-o para ensaios posteriores.

5. Análise histológica

  1. Deite o cólon plano sobre uma lâmina de vidro. Use pinças para enrolar o tecido ao redor de si mesmo, começando pela extremidade distal, para formar um "rolo suíço (Swiss roll). Dessa forma, a extremidade distal/anal permanecerá no rolo interno, com as regiões mais proximais se estendendo até o rolo externo.
  2. Usando uma agulha calibre 27, prenda o cólon enrolado para manter o rolo e coloque-o dentro de um fita de tecido embutido.
  3. Para fixar tecidos, submerga cassetes de tecido em solução de formalina tamponada a 10% por 16 horas a 4 °C.
    ATENÇÃO: 10% de formalina é prejudicial se estiver em contato com a pele e pode causar queimaduras graves e danos oculares. Manuseie com cuidado com luvas protetoras e óculos científicos. O formol residual deve ser devidamente descartado seguindo as diretrizes institucionais.
  4. Após a fixação de formalina, processe os tecidos para embedding de parafina e os separe para montagem em lâminas de vidro.
    NOTA: As amostras devem ser enviadas a um laboratório de histologia com o equipamento necessário para processar cassetes de tecido em parafina, corte por perrolo, montagem de lâminas e coloração por hematoxilina e eosina.
  5. Laminas de tecido de staining com hematoxilina e eosina (HE), conforme protocolosestabelecidos 21.
  6. Utilizando o sistema de pontuação histológica descrito na Tabela 2, avalie as seguintes características histológicas em cada seção: dano tecidual por enterocolite, infiltração celular inflamatória da lâmina própria e porcentagem da área envolvida. Combine as pontuações de cada seção para gerar uma pontuação total (Tabela 2).
    Escore total = Envolvimento × Características (Dano Tecidual) + Envolvimento × Características (Infiltração Celular Inflamatória da Lâmina Própria) (1)
  7. Imagens histopatológicas representativas de danos teciduais e infiltração celular podem ser encontradas na publicação de Erben etal 22.
    NOTA: A pontuação histológica deve ser realizada de forma cega, preferencialmente por um patologista treinado, para garantir consistência e confiabilidade da avaliação.

6. Coloração imunofluorescente de tecido embutido em parafina fixada em formalina

  1. Coloque as lâminas de papel em um suporte de lâminas e em um secador de lâminas a 55 °C por 1 hora para derreter parafina.
  2. Coloque as lâminas em um suporte de tingimento e submerga sequencialmente o suporte por 3 minutos em potes de coloração com xileno. Repita essa etapa em 3 ocasiões.
  3. Submerga o suporte de tingimento por 3 minutos em potes de tingimento com 100% etanol. Repita essa etapa em 3 ocasiões.
  4. Submerga o suporte de tingimento por 3 minutos no pote de tingimento com etanol 95%.
  5. Submerga o suporte de tingimento por 3 minutos no pote de tingimento com etanol 80%.
  6. Submerga o suporte de tingimento por 5 minutos em potes de tingimento com água desionizada (DI).
    NOTA: Todos os passos anteriores devem ser realizados em uma coifa ventilada devido aos vapores de xileno. Manuseie com cuidado com luvas protetoras e óculos científicos. O xileno residual deve ser devidamente descartado de acordo com as diretrizes institucionais.
  7. Transfira as lâminas para um suporte de lâminas e submerga em um pote de coloração com solução de 1× de citrato.
  8. Coloque o pote de tingimento no suporte do prato de tingimento.
  9. Coloque o suporte para a travessa na panela de pressão.
  10. Cozinhe por 15 minutos em panela de pressão.
  11. Recupere os lâminas da panela de pressão e deixe-os esfriar até a temperatura ambiente.
  12. Incube lâminas com tampão bloqueador de 300 μL (soro de cabra 3,5% diluído em PBS) por 1 hora em uma câmara umidificada. Certifique-se de que o tecido esteja completamente coberto pelo tampão bloqueador.
  13. Expor as lâminas a 300 μL de anticorpo primário diluído em tampão bloqueador por 16 horas a 4 °C, dentro de uma câmara umidificada. Certifique-se de que o tecido esteja completamente coberto pelo anticorpo primário. O seguinte anticorpo primário foi utilizado: Anti-S100A8/S100A9 (1:500).
    NOTA: As diluições de anticorpos serão específicas do reagente e devem seguir as recomendações do fornecedor.
  14. Enxague os slides submergindo em série em PBS por 5 minutos em 3 ocasiões em um pote de tingimento.
  15. Expor as lâminas a 300 μL de um anticorpo secundário fluorescente diluído em buffer bloqueador por 1 h em temperatura ambiente, em uma câmara umidificada. Certifique-se de que o tecido esteja completamente coberto pelo anticorpo secundário. O seguinte anticorpo secundário fluorescente foi utilizado: anti-coelho Alexa Fluor 555 (diluição 1:150).
    NOTA: A partir desse ponto, as lâminas devem ser protegidas da luz para evitar o fotobranqueamento dos fluoróforos. As diluições dos anticorpos secundários serão específicas do reagente e devem seguir as recomendações do fornecedor.
  16. Enxague os slides submergindo em série em PBS por 5 minutos em 3 ocasiões em um pote de tingimento.
  17. Expõe as lâminas à coloração nuclear submergindo em solução Hoechst diluída 1:5000 em PBS por 20 minutos em um pote de coloração.
  18. Enxague os slides submergindo em série em PBS por 5 minutos em 3 ocasiões em um pote de tingimento.
  19. Limpe cuidadosamente qualquer PBS das lâminas usando um papel de papel não abrasivo. Adicione 50 μL de meio de montagem antifade e um coverslip.

7. Extração de RNA

  1. Congele bruscamente o cólon inteiro ou um fragmento em nitrogênio líquido e depois armazene a -80 °C. Alternativamente, submerga em 1,5 mL de solução preservadora RNALater e armazene conforme as instruções do fabricante.
  2. Descongele o cólon previamente congelado e coloque em uma superfície plana. Desregule e homogeneize o tecido com um homogeneizador portátil.
  3. Isole o RNA usando o kit, seguindo as instruções do fabricante.
  4. Meça a concentração de RNA usando um espectrofotômetro. RazõesA 260/A 280 > 1,8 eA 260/A 230 de 2,0–2,2 indicam pureza aceitável de RNA.
  5. Prossiga com a transcrição reversa, seguida de qPCR com corante intercalante verde SYBR.
  6. Analise os resultados usando a plataforma de quantificação ou um instrumento similar.

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Resultados

Camundongos machos e fêmeas IL-10-KO desenvolvem enterocolite após uma breve exposição a uma dieta fortificada com piroxicam (Figura 1A–E). No segundo dia, camundongos expostos ao piroxicam apresentaram perda de peso estatisticamente significativamente maior do que seus controles regulares alimentados com comida do mesmo sexo, e perda de peso comparável foi observada entre os sexos (Figura 1B). A ingestão diária...

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Discussão

A doença inflamatória intestinal é um distúrbio poligênico complexo onde modelos pré-clínicos servem como ferramentas inestimáveis para dissecar vias que contribuem para a patogênese da DII e desenvolver novas estratégias diagnósticas e terapêuticas. Atualmente, muitos modelos pré-clínicos de DII dependem da exposição química, como sulfato de dextrano sódico (DSS), oxazolona e ácido sulfônico trinitrobenzeno (TNBS), devido à facilidade de uso. Modelos genéticos que desenvolvem colite esp...

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Divulgações

Os autores não declaram divulgações pertinentes.

Agradecimentos

Gostaríamos de agradecer às instalações centrais da UTSW que contribuíram para o trabalho apresentado aqui. Esse trabalho foi apoiado pelas seguintes fontes de financiamento: NIH através do K08DK127197 (LS-D), T32DK007745 (JW) e a Southwestern Foundation através do prêmio Docstars (LS-D).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
10% buffered formalinStatLab28600-11 Galllon
27 G needlesBD305109
Anti-S100A8 + S100A9 antibodyAbcamAB288715
BalanceFisher scientificS94792DFisher Science Education Portable Balances, 300 g
Citrate bufferSigma AldrichC9999-1000mL
DI waterFisher scientificSTLSL301
Dissecting forcepsFisher scientific22-327379
Ethanol, 100% 200 proofFisher scientificNC1675398Pharmco Products ETHYL ALCOHOL 200 PROOF
Ethanol, 190 proof, 95%Fisher scientificAC615110010
Ethanol, 80%Fisher scientificT08204K7
EZ-Quick Slide Staining DishIHC worldIW-2511Staining jar
EZ-Quick Slide Staining RackIHC worldIW-2512Slide rack
Feeding needleFisher scientificNC992498622 gauge, 25 mm
Fine scissorsFisher scientific14060-11
Flat forcepsFisher scientific21-125-109
Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 555Thermo FisherAB_2535849
Handheld homogenizerFisher scientific15-340-167
HemoCueDanlee Medical Products, Inc.BCK 64151AHemoccult Dev/ Single Slide Test Cards - CLIA Waived
Hoechst 33342Invitrogen62249
IL-10 KO MiceThe Jason LaboratoryStrain #: 002251IL10-KO mice, genotype: B6.129P2-IL-10tm1Cgn/J
IVC mouse cagingAllentownMouse 500
Liquid nitrogenAirgasNI UHP300
Microscope cover glassFisher scientific12541033
NanodropThermo FisherND-ONE-W
Normal Goat serumVector labsS-1000-20
Phosphate buffered saline (PBS)Sigma AldrichD8537
Petri dishesFisher scientificFB0875713
PiroxicamSigma AldrichP0847supply to inotiv for preparation of custom animal diet
Piroxicam-fortified chowInotivCustom200 ppm
Primer: Mouse GAPDH forwardSigma AldrichN/A5' AGGTCGGTGTGAACGGATTTG 3' forward
Primer: Mouse GAPDH reverseSigma AldrichN/A5' TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA 3' reverse
Primer: Mouse IFN-G forwardSigma AldrichN/A5' ACTGGCAAAAGGATGGTGAC 3' forward
Primer: Mouse IFN-G reverseSigma AldrichN/A5' TGAGCTCATTGAATGCTTGG 3' reverse
Primer: Mouse IL-10 forwardSigma AldrichN/A5' CTTGCACTACCAAAGCCACA 3' (common)
Primer: Mouse IL-10 reverseSigma AldrichN/A5' GTTATTGTCTTCCCGGCTGT 3' (Wild type reverse)
Primer: Mouse IL-10 reverse (2)Sigma AldrichN/A5' CCACACGCGTCACCTTAATA 3' (Mutant reverse)
Primer: Mouse IL-1B forwardSigma AldrichN/A5' GCTGAAAGCTCTCCACCTCA 3' forward
Primer: Mouse IL-1B reverseSigma AldrichN/A5' AGGCCACAGGTATTTTGTCG 3' reverse
Primer: Mouse IL-6 forwardSigma AldrichN/A5' GTTCTCTGGGAAATCGTGGA 3' forward
Primer: Mouse IL-6 reverseSigma AldrichN/A5' TTTCTGCAAGTGCATCATCG 3' reverse
Primer: Mouse TNF forwardSigma AldrichN/A5' GCAGGTTCTGTCCCTTTCAC 3' forward
Primer: Mouse TNF reverseSigma AldrichN/A5' AGTGCCTCTTCTGCCAGTTC 3' reverse
QuantStudio 7 ProThermo FisherA43183
RNAlater solutionInvitrogenAM7020RNA Stabilization Solution, 100 mL
Rneasy mini kitQiagen74104
SHURDry SD-II Slide DryerGeneral dataSD-ll-120
Simport Scientific EasyDip Slide Staining RackFisher scientific22-038-494Staining rack
SlowFade Gold antifade reagentInvitrogenS36936
Staining dish supportBioSBBSB7086
Staintray IHC slide staining systemIHC worldM918-1Humidified chamber for IHC
SuperScript VILOInvitrogen11755050
SYBR Green Master mixApplied BiosystemsA46109
Tintoretriever pressure cookerBioSBBSB7008
Tissue cassettesFisher scientific 50-197-8152Research Products International Corp Tissue Processing Cassette, Pink, 500 per Case
XylenePharmco3990000001 Gallon

Referências

  1. Hracs L, Windsor JW, Gorospe J, et al. Global evolution of inflammatory bowel disease across epidemiologic stages. Nature. 2025;642(8067):458-466.
  2. Dahlhamer JM, Zammitti EP, Ward BW, Wheaton AG, Croft JB. Prevalence of Inflammatory Bowel Disease Among Adults Aged ≥18 Years - United States, 2015. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2016;65(42):1166-1169.
  3. Ng SC, Shi HY, Hamidi N, et al. Worldwide incidence and prevalence of inflammatory bowel disease in the 21st century: a systematic review of population-based studies. Lancet. 2017;390(10114):2769-2778.
  4. Caron B, Honap S, Peyrin-Biroulet L. Epidemiology of Inflammatory Bowel Disease across the Ages in the Era of Advanced Therapies. J Crohns Colitis. 2024;18(Supplement_2):ii3-ii15.
  5. Ye Y, Manne S, Treem WR, Bennett D. Prevalence of Inflammatory Bowel Disease in Pediatric and Adult Populations: Recent Estimates From Large National Databases in the United States, 2007-2016. Inflamm Bowel Dis. 2020;26(4):619-625.
  6. Rubtsov YP, Rasmussen JP, Chi EY, et al. Regulatory T cell-derived interleukin-10 limits inflammation at environmental interfaces. Immunity. 2008;28(4):546-558.
  7. Shouval DS, Biswas A, Goettel JA, et al. Interleukin-10 receptor signaling in innate immune cells regulates mucosal immune tolerance and anti-inflammatory macrophage function. Immunity. 2014;40(5):706-719.
  8. Glocker EO, Kotlarz D, Boztug K, et al. Inflammatory bowel disease and mutations affecting the interleukin-10 receptor. N Engl J Med. 2009;361(21):2033-2045.
  9. Sazonovs A, Stevens CR, Venkataraman GR, et al. Large-scale sequencing identifies multiple genes and rare variants associated with Crohn’s disease susceptibility. Nat Genet. 2022;54(9):1275-1283.
  10. Griffin H, Ceron-Gutierrez L, Gharahdaghi N, et al. Neutralizing Autoantibodies against Interleukin-10 in Inflammatory Bowel Disease. N Engl J Med. 2024;391(5):434-441.
  11. Kühn R, Löhler J, Rennick D, Rajewsky K, Müller W. Interleukin-10-deficient mice develop chronic enterocolitis. Cell. 1993;75(2):263-274.
  12. Berg DJ, Davidson N, Kühn R, et al. Enterocolitis and colon cancer in interleukin-10-deficient mice are associated with aberrant cytokine production and CD4(+) TH1-like responses. J Clin Invest. 1996;98(4):1010-1020.
  13. Mizoguchi A. Animal models of inflammatory bowel disease. Prog Mol Biol Transl Sci. 2012;105:263-320.
  14. Hart ML, Ericsson AC, Franklin CL. Differing Complex Microbiota Alter Disease Severity of the IL-10-/- Mouse Model of Inflammatory Bowel Disease. Front Microbiol. 2017;8:792.
  15. Keubler LM, Buettner M, Häger C, Bleich A. A Multihit Model: Colitis Lessons from the Interleukin-10-deficient Mouse. Inflamm Bowel Dis. 2015;21(8):1967-1975.
  16. Büchler G, Wos-Oxley ML, Smoczek A, et al. Strain-specific colitis susceptibility in IL10-deficient mice depends on complex gut microbiota-host interactions. Inflamm Bowel Dis. 2012;18(5):943-954.
  17. Berg DJ, Zhang J, Weinstock JV, et al. Rapid development of colitis in NSAID-treated IL-10-deficient mice. Gastroenterology. 2002;123(5):1527-1542.
  18. Hale LP, Gottfried MR, Swidsinski A. Piroxicam treatment of IL-10-deficient mice enhances colonic epithelial apoptosis and mucosal exposure to intestinal bacteria. Inflamm Bowel Dis. 2005;11(12):1060-1069.
  19. Holgersen K, Kvist PH, Markholst H, Hansen AK, Holm TL. Characterization of enterocolitis in the piroxicam-accelerated interleukin-10 knock-out mouse--a model mimicking inflammatory bowel disease. J Crohns Colitis. 2014;8(2):147-160.
  20. B C, K B, V B, et al. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. DGXT of the European Commission. Laboratory animals. 1997;31(1).
  21. Ellis JL, Yin C. Histological Analyses of Acute Alcoholic Liver Injury in Zebrafish. J Vis Exp. 2017;(123):55630.
  22. Erben U, Loddenkemper C, Doerfel K, et al. A guide to histomorphological evaluation of intestinal inflammation in mouse models. Int J Clin Exp Pathol. 2014;7(8):4557-4576.
  23. Holgersen K, Kutlu B, Fox B, et al. High-resolution gene expression profiling using RNA sequencing in patients with inflammatory bowel disease and in mouse models of colitis. J Crohns Colitis. 2015;9(6):492-506.
  24. Ananthakrishnan AN, Adler J, Chachu KA, et al. AGA Clinical Practice Guideline on the Role of Biomarkers for the Management of Crohn’s Disease. Gastroenterology. 2023;165(6):1367-1399.
  25. Singh S, Ananthakrishnan AN, Nguyen NH, et al. AGA Clinical Practice Guideline on the Role of Biomarkers for the Management of Ulcerative Colitis. Gastroenterology. 2023;164(3):344-372.
  26. Sifuentes-Dominguez LF, Li H, Llano E, et al. SCGN deficiency results in colitis susceptibility. eLife. 2019;8:e49910.
  27. Sellon RK, Tonkonogy S, Schultz M, et al. Resident enteric bacteria are necessary for development of spontaneous colitis and immune system activation in interleukin-10-deficient mice. Infect Immun. 1998;66(11):5224-5231.
  28. Bábíčková J, Tóthová Ľ, Lengyelová E, et al. Sex Differences in Experimentally Induced Colitis in Mice: a Role for Estrogens. Inflammation. 2015;38(5):1996-2006.
  29. Wagnerova A, Babickova J, Liptak R, Vlkova B, Celec P, Gardlik R. Sex Differences in the Effect of Resveratrol on DSS-Induced Colitis in Mice. Gastroenterol Res Pract. 2017;2017:8051870.
  30. Maite CB, Roy M, Emilie V. The Effect of Sex-Specific Differences on IL-10-/- Mouse Colitis Phenotype and Microbiota. Int J Mol Sci. 2023;24(12):10364.
  31. Dokoshi T, Seidman JS, Cavagnero KJ, et al. Skin inflammation activates intestinal stromal fibroblasts and promotes colitis. J Clin Invest. 2021;131(21):e147614.
  32. Dokoshi T, Chen Y, Cavagnero KJ, et al. Dermal injury drives a skin-to-gut axis that disrupts the intestinal microbiome and intestinal immune homeostasis in mice. Nat Commun. 2024;15(1):3009.
  33. Allard C, Zizzari P, Quarta C, Cota D. Food intake and body weight in rodent studies: the devil is in the details. Nat Metab. 2022;4(11):1424-1426.
  34. M W, R L, S S, et al. Combination therapy using intestinal organoids and their extracellular vesicles for inflammatory bowel disease complicated with osteoporosis. Journal of Orthopedic Translation. 2025;53.
  35. Y G, H Z, Y Y, et al. Injectable body temperature-responsive hydrogel for encephalitis treatment via sustained release of nano-anti-inflammatory agents. Biomaterials translational. 2024;5(3).

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