Este estudo utilizou registros clínicos anonimizados do Hospital Popular Kunshan nº 2 e foi aprovado pelo Comitê de Ética do hospital (aprovação nº ksehllsp2024-005). O estudo seguiu os princípios da Declaração de Helsinque. Como as informações do paciente eram anonimizadas antes da análise, a exigência de consentimento informado por escrito foi dispensada pelo comitê de ética. O fluxo de trabalho de triagem, agrupamento e análise principal dos pacientes são mostrados na Figura 1. Os equipamentos laboratoriais, sistemas de banco de dados e software estatístico usados neste estudo estão listados na Tabela de Materiais.

Figura 1. Fluxograma de triagem e agrupamento de pacientes. Um total de 2.555 pacientes hospitalizados com registros diagnósticos relacionados a TCE suspeitos ou confirmados entre 2017 e 2023 foram inicialmente identificados pelo sistema eletrônico de prontuário médico do hospital. Após exclusão de pacientes com <18 anos, internações repetidas, lesão cerebral não traumática ou diagnóstico incerto, ausência de contagem de neutrófilos na admissão, ausência de variáveis clínicas ou laboratoriais basais chave ou ausência de status de mortalidade após 14 dias, 1.361 pacientes foram incluídos na análise final. Os pacientes foram então agrupados de acordo com tertiles de contagem neutrófila de admissão: tértil baixo, n = 454; tertil médio, n = 453; e tertil alto, n = 454. O desfecho primário foi mortalidade por causa total em 14 dias, incluindo 35 mortes e 1.326 sobreviventes. Por favor, clique aqui para ver uma versão ampliada desta figura.
Desenho do estudo e coorte de pacientes
Analisamos uma coorte de um único centro de pacientes hospitalizados com TCE entre janeiro de 2017 e dezembro de 2023. Pacientes potencialmente elegíveis foram identificados pelo sistema eletrônico de prontuário médico do hospital. O rastreamento foi baseado em registros de diagnóstico de alta contendo termos diagnósticos relacionados ao TCE, e o diagnóstico foi posteriormente verificado usando registros de hospitalização e achados de neuroimagem. Os termos diagnósticos relacionados ao TCE foram baseados na Classificação Internacional de Doenças, 10ª Revisão (CID-10): S06.0 (concussão), S06.1 (edema cerebral traumático), S06.3 (lesão cerebral focal), S06.4 (hemorragia epidural), S06.5 (hemorragia subdural traumática), S06.6 (hemorragia subaracnoidea traumática), S06.8 (lesão intracraniana com coma prolongado) e S06.9 (lesão intracraniana, não especificada). Um diagnóstico primário confirmado de TCE foi definido como a presença de um ou mais desses códigos CID-10 como diagnóstico primário de corrida, apoiado por achados compatíveis em tomografia computorizada craniana (TC) ou ressonância magnética (RM). No total, 2.555 pacientes hospitalizados com suspeita ou confirmação de LCT foram avaliados quanto à elegibilidade.
Para pacientes com mais de uma hospitalização durante o período do estudo, apenas a primeira admissão elegível foi mantida como o índice de hospitalização. Essa etapa foi usada para evitar registros duplicados em nível de paciente. Os pacientes foram incluídos se tivessem ≥18 anos, tivessem diagnóstico confirmado de TCE primário, contagens de neutrófilos disponíveis para admissão, apresentassem as variáveis clínicas e laboratoriais de base necessárias para análise e apresentassem status de sobrevivência confirmado de 14 dias após a admissão. As variáveis de base necessárias para inclusão foram idade, sexo, categoria diagnóstica, status operacional (craniotomia ou craniectomia descompressiva), tempo de protrombina (PT), tempo de tromboplastina parcial ativada (APTT), fibrinogênio (FIB), contagem de plaquetas (PLT), albumina (ALB), colesterol total (TC), colesterol lipoproteico de alta densidade (HDL), colesterol lipoproteico de baixa densidade (LDL) e glicose em jejum no sangue (GFB).
Os pacientes foram excluídos se tivessem menos de 18 anos, tivessem internado repetidamente, apresentassem lesão cerebral não traumática ou diagnóstico incerto, não tivessem contagem de neutrófilos de admissão, tivessem variáveis clínicas ou laboratoriais basal-chave ausentes ou tivessem estado de mortalidade em 14 dias. Valores extremos de contagem de neutrófilos foram identificados por meio de verificações de alcance e depois verificados com base nos registros laboratoriais originais. Os critérios de verificação de alcance para contagens extremas de neutrófilos foram definidos como valores abaixo de 0,5 × 109/L ou acima de 40,0 × 109/L. Os valores foram excluídos apenas quando confirmados como causados por erros de entrada de dados, erros laboratoriais de relatórios ou erros clinicamente improváveis de medição. Erros de medição clinicamente implausíveis foram definidos como contagens de neutrófilos que eram (1) incompatíveis com a contagem simultânea de glóbulos brancos e a contagem diferencial do paciente (por exemplo, contagem de neutrófilos que excedia a contagem total de glóbulos brancos) ou (2) registradas como valores não numéricos ou caracteres temporários na exportação bruta do prontuário eletrônico médico. No total, 1.361 pacientes foram incluídos na coorte analítica final.
Os pacientes foram classificados de acordo com a categoria primária de diagnóstico de TCE registrada durante a hospitalização índice. As categorias diagnósticas foram hemorragia intracraniana traumática, lesão traumática do tronco encefálico e fratura simples do crânio. Quando mais de um diagnóstico relacionado a TCE foi registrado, a categoria diagnóstica foi atribuída de acordo com o diagnóstico primário de alta. O diagnóstico primário de alta foi definido como o primeiro diagnóstico listado no resumo da alta e foi atribuído pelo neurocirurgião responsável com base na condição clinicamente mais significativa que exigiu a maior duração de internação ou o maior uso dos recursos de saúde durante a internação.
Os pacientes incluídos foram então agrupados de acordo com tertiles de contagem de neutrófilos de admissão. O tertil mais baixo era de 1,650–7,057 × 109/L, o tértil médio era de 7,057 a 10,947 × 109/L, e o tértil agudo era de 10,947–32,440 × 109/L. Os cortes dos tertis foram determinados ordenando as contagens de neutrófilos de admissão em ordem crescente e dividindo a coorte em três grupos de tamanho aproximadamente igual (n = 454, 453 e 454, respectivamente). O termo "tertéis" foi usado em todo o manuscrito porque a coorte estava dividida em três grupos.
Exposição, resultado e coleta de dados clínicos
A principal exposição foi a contagem absoluta de neutrófilos medida na admissão. Os valores laboratoriais de admissão foram definidos como os primeiros resultados laboratoriais disponíveis obtidos durante a avaliação inicial do pronto-socorro ou avaliação de admissão. As amostras de sangue geralmente eram coletadas imediatamente após a internação, e os resultados dos exames geralmente eram relatados em até 2 horas. A janela de tempo permitida para definir os valores laboratoriais de admissão era dentro de 6 horas após a chegada ao pronto-socorro ou à internação hospitalar. Se mais de um resultado estivesse disponível durante esse período inicial de avaliação, o resultado mais antigo era usado para análise. A contagem de neutrófilos foi registrada em unidades de ×109/L e analisada tanto como variável contínua quanto de acordo com grupos tertiis.
O desfecho primário foi mortalidade por todas as causas após 14 dias após a admissão índice. A morte dentro de 14 dias era codificada como 1, e a sobrevivência além de 14 dias era codificada como 0. A mortalidade a quatorze dias foi determinada a partir dos registros de óbitos hospitalares, registros de alta e do sistema de registros de acompanhamento hospitalar. Se ocorreram discrepâncias entre as fontes de dados de mortalidade (por exemplo, um paciente registrado como vivo na alta, mas registrado como falecido no sistema de acompanhamento dentro de 14 dias), o registro do sistema de acompanhamento era considerado o padrão de referência porque registrava a mortalidade pós-alta. Pacientes cujo status de sobrevivência de 14 dias não pôde ser confirmado não foram incluídos na análise final.
Variáveis demográficas e clínicas foram extraídas do sistema eletrônico de prontuário médico. Essas variáveis incluíam idade, sexo, categoria diagnóstica, status da operação e status de traqueostomia. A pontuação da Escala de Coma de Glasgow (GCS), resposta pupilar, classificação da tomografia computorizada Marshall e carga de lesão extracraniana não foram incluídas na análise porque essas variáveis não foram registradas de forma consistente no sistema eletrônico de prontuários médicos durante o período do estudo (2017–2023), especialmente entre pacientes com TCE leve ou aqueles não admitidos na unidade de terapia intensiva. Portanto, essas variáveis não puderam ser extraídas de forma confiável para a maioria da coorte. A operação foi definida como remoção de craniotomia do hematoma ou craniectomia descompressiva realizada durante a hospitalização do índice. A traqueostomia foi codificada como sim ou não, dependendo se o procedimento foi realizado durante a mesma hospitalização.
As variáveis laboratoriais de admissão foram obtidas a partir da primeira avaliação laboratorial disponível durante a emergência inicial ou avaliação de admissão. As variáveis de coagulação e hematológicas incluíram PT, APTT, razão internacional normalizada (INR), FIB, D-dímero, PLT, hemoglobina (Hb) e contagem de neutrófilos. As variáveis bioquímicas incluíam ALB, TC, triglicerídeos (TGs), HDL, LDL, apolipoproteína A-I (Apo A-I), apolipoproteína B (Apo B), cistictina C (CYS), alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), creatinina (Cr), nitrogênio ureico no sangue (BUN), ácido úrico (UA) e FBG.
Todas as amostras de sangue foram testadas no laboratório clínico do hospital de acordo com os procedimentos operacionais padrão. O exame completo de hemograma foi realizado usando um analisador hematológico automatizado, o teste de coagulação com um analisador automático e o teste bioquímico usando um analisador bioquímico automático. Todos os testes foram realizados por técnicos de laboratório treinados, com controle interno de qualidade rotineiro realizado sob o programa de controle de qualidade do laboratório clínico.
Pré-processamento de dados e comparação de linha de base
Antes da análise estatística, o conjunto extraído era verificado quanto a admissões repetidas, valores ausentes, registros duplicados, unidades inconsistentes e valores clinicamente improváveis. Admissões repetidas foram removidas, e apenas a primeira hospitalização elegível foi mantida. As unidades laboratoriais foram harmonizadas ao longo do período do estudo. Especificamente, a contagem de neutrófilos e plaquetas foi padronizada para ×109/L, hemoglobina para g/L, PT e APTT para segundos, INR foi mantida como medida sem unidades, FIB para g/L, D-dímero para mg/L, ALB, Apo A-I e Apo B para g/L, TC, TGs, HDL, LDL e glicose em jejum (FBG) para mmol/L, CYS para mg/L, ALT e AST para U/L, creatinina (Cr) e ácido úrico (UA) para μmol/L, e BUN para mmol/L. Valores improváveis foram revisados com base nos prontuários médicos originais ou relatórios laboratoriais e confirmados com base nos registros fonte. Valores clinicamente implausíveis foram definidos como valores fora dos intervalos biologicamente plausíveis para o parâmetro laboratorial correspondente (por exemplo, PT de <5 s ou >120 s, FIB de <0,1 g/L ou >20 g/L, FBG de <1,0 mmol/L ou >50 mmol/L, ou ALT/AST de >10.000 U/L). Valores adicionais implausíveis incluíam inconsistências lógicas, como uma contagem de neutrófilos que excedeu a contagem total de glóbulos brancos.
A análise principal utilizou casos completos. Os pacientes foram excluídos da coorte analítica final se tivessem contagem de neutrófilos de admissão ausente, status de mortalidade de 14 dias ausente ou covariáveis ausentes necessárias para a análise ajustada principal. As covariáveis necessárias para o modelo totalmente ajustado (Modelo 4) eram idade, categoria diagnóstica, status cirúrgico, APTT, FIBRILAÇÃO, PLT, LDL, HDL e INR. Após a seleção de coortes, todas as variáveis incluídas nos modelos de regressão sequencial estavam disponíveis para os 1.361 pacientes incluídos na análise final.
As variáveis categóricas foram codificadas da seguinte forma: sexo como homem ou mulher, operação e traqueostomia como sim ou não, categoria diagnóstica como hemorragia intracraniana traumática, lesão traumática do tronco cerebral ou fratura simples do crânio, e mortalidade em 14 dias como morte ou sobrevivência.
As variáveis contínuas foram resumidas como média ± desvio padrão nas principais tabelas descritivas. As variáveis categóricas foram resumidas como frequências e percentagens. Comparações entre grupos foram realizadas usando análise de variância ou testes não paramétricos baseados em classificação, conforme apropriado. A análise unidirecional da variância (ANOVA) foi usada para variáveis contínuas que atendiam às suposições de normalidade e homogeneidade da variância, conforme avaliadas usando o teste de Shapiro–Wilk (P > 0,05) e o teste de Levene (P > 0,05), respectivamente. O teste de Kruskal–Wallis foi usado para variáveis contínuas que não atendiam a essas suposições. Para variáveis categóricas, foi usado o teste do qui-quadrado de Pearson ou o teste exato de Fisher de acordo com a contagem de células esperada. O teste exato de Fisher foi aplicado quando qualquer contagem esperada de células na tabela de contingência era inferior a 5. Na tabela de base, o valor P foi usado como base principal para comparações entre grupos. O valor P* foi mantido apenas como referência suplementar para o teste alternativo não paramétrico ou de célula pequena correspondente, quando aplicável; a significância estatística na seção de Resultados foi avaliada de acordo com o valor P, e esses valores P não foram ajustados para comparações múltiplas.
Para facilitar a interpretação das diferenças de base, foram gerados gráficos multipainel descritivos para variáveis clínicas e laboratoriais selecionadas, incluindo idade, dímero D, glicose no sangue em jejum, fibrinogênio, tempo de protrombina, composição diagnóstica, cirurgia, traqueostomia e mortalidade em 14 dias. Essas variáveis foram selecionadas para visualização porque representavam características clinicamente relevantes e demonstravam diferenças notáveis entre tertéis neutrófilos nas análises de linha inicial. Esses gráficos foram usados para ilustrar os perfis clínicos e laboratoriais de pacientes nos grupos tertiles neutrófilos baixos, médios e altos.
Análise estatística e visualização
A regressão logística univariável foi usada pela primeira vez para avaliar associações entre variáveis candidatas e mortalidade em 14 dias. Foram relatados razões de probabilidades (ORs), intervalos de confiança (IC) de 95% e valores P. Variáveis foram consideradas para ajuste multivariável se fossem clinicamente relevantes, apresentassem associação com mortalidade em 14 dias na análise univariável, ou alterassem o OR para a contagem de neutrófilos em ≥10% quando adicionadas ou removidas do modelo. A relevância clínica foi determinada a priori com base em fatores prognósticos estabelecidos para lesão cerebral traumática e mecanismos fisiopatológicos conhecidos relatados na literatura, incluindo idade, parâmetros de coagulação, glicose e variáveis relacionadas a lipídios. O limiar para identificar variáveis associadas à mortalidade em 14 dias na análise univariável foi fixado em P < 0,10 para evitar excluir fatores de confusão potencialmente importantes dos modelos multivariáveis.
A associação entre a contagem de neutrófilos de internação e a mortalidade em 14 dias foi então examinada usando regressão logística multivariável. A contagem de neutrófilos foi analisada como uma variável contínua por aumento de 1 ×109/L. Quatro modelos sequenciais foram construídos. O Modelo 1 não era ajustado. O Modelo 2 foi ajustado para idade, diagnóstico e cirurgia. O Modelo 3 foi ajustado para idade, diagnóstico, cirurgia, APTT, FIBRILAÇÃO (FIBRILAÇÃO), PLT e LDL. O Modelo 4 foi ajustado para idade, diagnóstico, cirurgia, APTT, FIBRIL·LAÇÃO, PLT, LDL, HDL e INR. Fatores de inflação de variância (VIFs) foram usados para avaliar a potencial multicolinearidade entre covariáveis antes de ajustarem os modelos multivariáveis. Um limiar de VIF de 5 foi usado para identificar multicolinearidade potencialmente problemática.
Para examinar se a associação era não linear, modelos aditivos generalizados foram usados para avaliar a relação exposição-resposta entre a contagem de neutrófilos e a mortalidade em 14 dias. Uma spline de regressão cúbica foi usada como função de suavização com dimensão base (k) de 4. O parâmetro de suavização foi estimado usando máxima verosimilhança restrita (REML). Foi gerada uma curva de suavização ajustada para visualizar a associação entre a contagem de neutrófilos de admissão e a probabilidade prevista de mortalidade em 14 dias, com ajuste para covariáveis incluído no modelo totalmente ajustado. Quando a curva sugeria um padrão não linear, uma regressão linear por duas partes foi usada para estimar o ponto de inflexão. O ponto de inflexão (K) foi identificado usando um algoritmo recursivo que avaliou pontos de rottura candidatos na faixa percentil 5 a 95 das contagens de neutrófilos. O ponto de ruptura associado ao melhor ajuste do modelo, conforme determinado pelo Critério de Informação de Akaike, foi selecionado como o ponto de inflexão final. O modelo linear de uma linha e o modelo de duas partes foram comparados usando o teste de razão de verosimilhança. Efeitos limiar foram relatados abaixo e acima do ponto de inflexão estimado.
Os efeitos do limiar foram visualizados usando um gráfico de floresta que mostra as ORs estimadas abaixo e acima do ponto de inflexão específico do modelo, K. Os valores K eram 18,54, 3,82, 3,86 e 3,81 ×109/L nos modelos 1–4, respectivamente. Para variáveis categóricas com poucos ou nenhum evento de desfecho em um subgrupo, as ORs correspondentes foram consideradas potencialmente instáveis e interpretadas com cautela. As estimativas de OR foram classificadas como instáveis se o subgrupo contivesse menos de cinco eventos de desfecho ou se a largura do intervalo de confiança de 95% excedesse 10,0.
Foram geradas figuras para apresentar o processo de triagem do paciente, perfis clínicos e laboratoriais de base entre tertis neutrófilos, taxas de mortalidade em 14 dias entre tertéis, estimativas de regressão a partir dos modelos sequenciais, efeitos limiares e curvas de suavização ajustadas. Análises estatísticas foram realizadas usando a versão 4.5.2 do R e a plataforma online EmpowerStats. As figuras foram geradas usando os pacotes R ggplot2, patchwork, pdftools, png e escalas. Um valor P bilateral de <0,05 foi considerado estatisticamente significativo.