É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de investigação

A Ruscogenina Suprime a Progressão do Carcinoma Nasofaríngeo ao Regular Negativamente a KDM1A para Coinduzir Ferroptose e Apoptose

58 visualizações

⸱

DOI:

10.3791/72523

⸱

3 de setembro de 2026

1School of Stomatology and Optometry, Hubei University of Science and Technology

Neste artigo

Resumo

Este protocolo tem como objetivo avaliar a eficácia antitumoral da ruscogenina em células de carcinoma nasofaríngeo. Ele detalha metodologias abrangentes — incluindo ensaios de viabilidade, migração, apoptose e ferroptose — para elucidar sistematicamente como este composto induz morte celular dupla ao direcionar-se e downregular KDM1A.

Resumo

O carcinoma nasofaríngeo (NPC) é uma malignidade altamente agressiva. O composto natural rusco-genina (Rus) apresenta potencial anti-câncer. Este estudo esclarece o mecanismo específico de ação no carcinoma nasofaríngeo (NPC), investigando seus efeitos sobre células de NPC e a via molecular subjacente. A linhagem celular humana de carcinoma nasofaríngeo (NPC), C666-1, foi tratada com diversas concentrações de Rus. Uma série de ensaios in vitro foi realizada para avaliar viabilidade celular, proliferação, migração, invasão, apoptose e ferroptose. O papel da desmetilase específica de lisina 1A (KDM1A) foi investigado por meio de Western blot e acoplamento molecular, e seu papel mediador foi validado por meio de experimentos de resgate com superexpressão. A rusco-genina reduziu de maneira dose-dependente as capacidades proliferativa, clonogênica, migratória e invasiva das células C666-1. Mecanicamente, o tratamento com Rus induziu tanto apoptose, evidenciada pela ativação da caspase efetora-3 e uma alteração no sentido de sinalização pró-apoptótica por meio do equilíbrio Bax/Bcl-2, quanto ferroptose, marcada por elevada peroxidação lipídica e ferro intracelular. Esses efeitos antitumorais foram fortemente correlacionados com a subregulação de KDM1A. Crucialmente, a superexpressão forçada de KDM1A atenuou significativamente a apoptose e ferroptose induzidas por Rus e reverteu a supressão dos fenótipos malignos, confirmando o papel mediador essencial de KDM1A. A rusco-genina inibe a progressão maligna do carcinoma nasofaríngeo por meio da subregulação de KDM1A, promovendo assim apoptose e ferroptose. Esses achados identificam o eixo Rus-KDM1A como um alvo terapêutico promissor para o tratamento do NPC.

Introdução

O carcinoma de nasofaringe (NPC) é um tipo de câncer causado pela cooperação entre fatores genéticos e ambientais1. Embora a radioterapia tenha apresentado avanços notáveis no tratamento, a sobrevida geral dos pacientes com NPC permanece insatisfatória. Isso provavelmente ocorre porque as células do NPC podem proliferar rapidamente e são altamente propensas a metastatizar para linfonodos regionais e órgãos distantes2. Portanto, é essencial investigar os mecanismos moleculares que promovem a progressão do NPC. Recentemente, a ferroptose, uma nova modalidade de morte celular, regulada por Fe2⁺ e peróxidos lipídicos de maneira dependente de ferro, tem sido identificada como criticamente envolvida no NPC3. As evidências atuais demonstraram que a ferroptose desempenha um papel importante no NPC, e sua indução pode potencializar a radioterapia do câncer4,5.

Devido à baixa toxicidade e aos menores efeitos colaterais, fórmulas herbáceas chinesas têm sido amplamente utilizadas no tratamento do câncer há milhares de anos6,7. Como um tipo de medicamento com múltiplos componentes, múltiplos alvos e efeito sinérgico, as prescrições da medicina tradicional chinesa (MTC) têm sido usadas como terapia complementar eficaz na prevenção e no tratamento do câncer, incluindo o carcinoma nasofaríngeo (NPC)8,9,10. Radix ophiopogonis (RO), a raiz da planta herbácea perene Ophiopogon japonicus, tem demonstrado aliviar eficazmente o NPC como terapia adjuvante11,12. Ruscogenina (Rus), o principal componente da RO, tem mostrado potentes efeitos anticâncer13. Em modelos murinos de câncer colorretal, a Rus pode melhorar lesões nas junções firmes e inibir a migração tumoral14. Importante, a Rus também pode reduzir a viabilidade de células de câncer pancreático por indução de ferroptose. No entanto, o efeito da Rus sobre o NPC ainda é desconhecido.

A epigenética é o principal campo de pesquisa na patogênese do câncer e fornece múltiplos tratamentos eficazes15. Como uma das modificações epigenéticas mais bem estudadas, a metilação de histonas está envolvida no desenvolvimento do câncer e também é um alvo importante no design de fármacos16. A modulação dinâmica da metilação de histonas é mediada por metiltransferases e desmetilases17. A KDM1A é uma desmetilase de lisina das histonas que tem sido identificada como criticamente envolvida na carcinogênese devido ao seu papel na modulação epigenética18. Além disso, descobriu-se que a KDM1A é uma oncoproteína com alta expressão em diversos tipos de câncer, como câncer de pulmão e de pâncreas19. Guo et al. relataram que o aumento da KDM1A pode suprimir a expressão da fosfatase e homólogo de tensina (PTEN) e aumentar a proliferação e migração de células do carcinoma nasofaríngeo, ao mesmo tempo que inibe a apoptose20. Paralelamente, também foi observado que a superexpressão da KDM1A pode reprimir a ferroptose no câncer de pulmão21. A análise no banco de dados Super-PRED indicou que a KDM1A é um alvo potencial da Rus.

Apesar do potencial anti-tumoral reconhecido da Rus em outros cânceres, seu papel específico e mecanismos moleculares na carcinoma de nasofaringe permanecem completamente não estabelecidos, representando uma lacuna significativa na pesquisa. Além disso, embora relatos anteriores tenham ligado separadamente a KDM1A à proliferação tumoral e à resistência à ferroptose, nenhum estudo até agora explorou se o direcionamento da KDM1A pode simultaneamente desencadear múltiplas vias de morte celular no CPN. Portanto, este estudo fornece uma justificativa sólida para a hipótese de que a Rus possa suprimir a progressão maligna das células do CPN por meio da desregulação direta da KDM1A.

Este estudo teve como objetivo preencher essa lacuna por meio da avaliação sistemática do efeito da Rus sobre a proliferação, migração e invasão de células de CFP. A principal novidade desta pesquisa reside na descoberta de uma estratégia de duplo mecanismo. O foco foi a capacidade da Rus de induzir simultaneamente tanto a apoptose clássica quanto a ferroptose dependente de ferro. Ao validar o novo eixo de sinalização Rus-KDM1A, este estudo amplia significativamente o conhecimento atual, demonstrando como um único composto natural pode superar a resiliência tumoral por meio do bloqueio simultâneo de múltiplas vias, oferecendo uma justificativa pré-clínica promissora para a terapia direcionada do CFP.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

Cultura celular, tratamento e transfeção

A linhagem celular de carcinoma nasofaríngeo humano (NPC), C666-1 (RRID: CVCL_M597), e a linhagem celular epitelial nasofaríngea humana não maligna, NP69 (RRID: CVCL_F755), foram adquiridas de um fornecedor comercial. Ambas as linhagens celulares foram autenticadas por meio de perfis de repetições em tandem curtas (STR) e confirmadas como livres de contaminação por micoplasma antes do uso. Para cultura de rotina, as células C666-1 foram cultivadas em meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro bovino fetal (FBS) e 1% de penicilina-estreptomicina. As células NP69 foram cultivadas em meio livre de soro para queratinócitos, suplementado com 10% de FBS, 10 ng/mL de fator de crescimento epidérmico recombinante e 1% de penicilina-estreptomicina. Ruscogenina (Rus; pureza ≥ 98%) foi adquirida de um fornecedor comercial. Ambas as linhagens celulares foram mantidas em incubadora umidificada a 37 °C sob 5% de CO₂. Para tratamentos, as células foram expostas à ruscogenina (Rus) em concentrações variadas (10, 20, 50 µM) por 24 h22. Para transfeção, plasmídeos que codificam a desmetilase específica de lisina 1A para superexpressão (oe-KDM1A) e um vetor vazio controle negativo correspondente (oe-NC), adquiridos de um fornecedor comercial, foram transfectados em células C666-1 quando a confluência celular atingiu 70–80%. Especificamente, 2,5 µg de DNA plasmidial e 5 µL de um reagente de transfeção baseado em lipídeos foram diluídos separadamente em 150 µL de meio com baixo teor de soro, misturados suavemente, incubados por 20 min à temperatura ambiente e, em seguida, adicionados a cada poço de uma placa de 6 poços, conforme protocolo do fabricante. As células foram incubadas por 48 h a 37 °C, e a eficiência de transfeção foi posteriormente confirmada.

Ensaio com o kit de contagem de células-8 (CCK-8)

A viabilidade celular após o tratamento com Rus foi quantificada utilizando o ensaio CCK-8. Para este procedimento, as células foram inicialmente semeadas em placas de 96 poços e cultivadas durante a noite. O ensaio foi iniciado pela adição de 10 µL da solução CCK-8, e após 2 h de incubação, a alteração colorimétrica resultante foi medida como densidade óptica (OD) em 450 nm utilizando um leitor de placas.

Ensaio de formação de colônias

Para avaliar a sobrevivência clonogênica, células C666-1 foram semeadas em placas de 6 poços e cultivadas por 14 dias. Após o período de incubação, as colônias resultantes foram fixadas com metanol a 100% durante 10 minutos e, em seguida, visualizadas com violeta cristal a 0,5% por 30 minutos. O número de colônias coradas foi então quantificado por meio de imagem microscópica e contagem.

Western blot

Para análise por Western blot, as proteínas totais foram primeiramente extraídas de células com tampão RIPA, e os lisados resultantes foram centrifugados (12.000 × g) para coletar o sobrenadante. Um ensaio BCA foi utilizado para quantificar os níveis de proteína. Quantidades iguais de proteína total (30 µg por poço) foram carregadas e separadas por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio a 10% (SDS-PAGE). Após a separação, as proteínas foram transferidas para membranas de fluoreto de polivinilideno (PVDF) em uma voltagem constante de 100 V durante 90 min sobre gelo. As membranas foram então bloqueadas com albumina sérica bovina a 5% (BSA) preparada em solução salina tamponada com Tris contendo 0,1% de Tween 20 (TBST), durante 2 h à temperatura ambiente. Em seguida, as membranas foram incubadas durante a noite a 4 °C com os seguintes anticorpos primários diluídos no tampão de bloqueio (todos na proporção de 1:1000): Ki67, PCNA, MMP2, MMP9, Bcl-2, Bax, KDM1A, SLC7A11, GPX4, ACSL4, TFR1 e β-actin. Por fim, após uma incubação de 2 h com anticorpos secundários conjugados à HRP, as bandas imunorreativas foram visualizadas utilizando um reagente de detecção por quimioluminescência amplificada (ECL), e a análise densitométrica foi realizada com software de análise de imagens.

Ensaio de arranhão em ferida

Para o ensaio de cicatrização de ferida, as células C666-1 foram cultivadas até atingirem 80% de confluência em placas de 6 poços. Uma ferida uniforme foi criada na monocamada por meio de raspagem com uma ponteira de pipeta de 200 µL. As células destacadas foram removidas com uma lavagem com PBS, após a qual o meio de cultura foi substituído por meio sem soro para uma incubação de 24 h. Imagens da área da ferida foram capturadas em 0 h e 24 h utilizando um microscópio de luz para avaliar a migração celular.

Ensaio Transwell

A invasão celular foi avaliada utilizando câmaras de transwell (com poros de 8 µm) previamente recobertas com 50 µL de matriz da membrana basal. A capacidade invasiva das células C666-1 foi determinada usando câmaras de transwell. Os compartimentos superiores foram semeados com células suspensas em meio sem soro, enquanto os poços inferiores continham DMEM com 10% de FBS. Após 24 h de incubação, as células remanescentes no lado apical da membrana foram cuidadosamente removidas. Para quantificação, as células na superfície basolateral foram fixadas em metanol, coradas com violeta cristal a 0,1% e contadas a partir de imagens capturadas por microscopia de luz.

Citometria de fluxo

A apoptose foi quantificada utilizando citometria de fluxo. Para preparar as amostras, as células C666-1 foram coletadas, lavadas com PBS gelado e, em seguida, ressuspendidas em 100 µL de tampão de ligação. As células foram então coradas simultaneamente com Annexina-V-FITC (20 µg/mL) e iodeto de propídio (PI). Esta coloração foi realizada durante 15 min no gelo, protegida da luz. Os dados foram adquiridos imediatamente em um citômetro de fluxo para determinar a porcentagem de células apoptóticas.

Detecção da atividade da caspase-3

A atividade da caspase-3 foi medida utilizando um kit de ensaio comercial de acordo com as instruções do fabricante. Resumidamente, as células C666-1 foram lisadas e os sobrenadantes foram coletados após centrifugação a 14.000 × g. Após uma incubação de 2 h com o reagente fornecido, a absorbância de cada sobrenadante foi quantificada a 405 nm.

RT-qPCR

O RNA total foi purificado de células C666-1 utilizando um reagente comercial de extração de RNA. O RNA obtido foi transcrito reversamente em cDNA de primeira fita utilizando um kit comercial, de acordo com o protocolo do fabricante. A análise da expressão gênica foi posteriormente realizada por PCR quantitativa (qPCR) em um sistema de PCR em tempo real com uma mistura mestra baseada em SYBR Green. O método comparativo de Ct (2⁻△△Ct) foi utilizado para determinar os níveis relativos de transcritos. As sequências dos primers utilizadas para amplificação foram: β-actin (Sentido: 5'-CATGTACGTTGCTATCCAGGC-3'; Antissentido: 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGAT-3') e KDM1A (Sentido: 5'-TGACCGGATGACTTCTCAAGA-3'; Antissentido: 5'-GTTGGAGAGTAGCCTC AAATGTC-3').

Ensaio das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS)

Para medir a peroxidação lipídica, os sobrenadantes foram inicialmente preparados a partir de células C666-1 por precipitação (15% de TCA, 500 mM de BHA) e centrifugação durante 10 min a 10.000 × g. Esses sobrenadantes foram então reagidos com ácido tiobarbitúrico a 0,375%, aquecidos a 100 °C por 10 min para gerar o aduto MDA-TBA. O nível desse aduto, indicativo de peroxidação lipídica, foi determinado pela medição da absorbância a 532 nm em um leitor de microplacas23.

Detecção de espécies reativas de oxigênio lipídicas (ROS)

A peroxidação lipídica foi detectada utilizando uma sonda fluorescente específica para peroxidação lipídica. Células C666-1 foram semeadas em placas de 6 poços, cultivadas durante a noite e, em seguida, expostas à sonda fluorescente (2 µM). Esta sonda apresenta uma mudança na fluorescência de vermelho para verde após oxidação. A razão entre fluorescência verde e vermelha foi analisada por microscopia confocal a laser e por meio de software de análise de imagens. A razão entre fluorescência verde e vermelha, representada graficamente, foi claramente definida e utilizada como indicador quantitativo dos níveis de peroxidação lipídica24.

Detecção de Fe2+

O nível intracelular de ferro ferroso (Fe2⁺) foi medido utilizando uma sonda fluorescente de ferro intracelular. As células C666-1 foram incubadas com 10 µM da sonda fluorescente durante 10 min. Após lavagem com PBS para remover o excesso de sonda, as células foram analisadas por microscopia de fluorescência.

Análise de docking molecular

A docking molecular é um método computacional fundamental que facilita o design de novos fármacos ao prever a afinidade de ligação e a interação entre um ligante e sua proteína-alvo por meio da avaliação de seus modos de ligação25. A partir da página da RCSB PDB (https://www.rcsb.org/), obteve-se a estrutura tridimensional da KDM1A (ID PDB: 6NQU). Para o preparo da estrutura proteica da KDM1A, removeu-se a água e ligantes pequenos irrelevantes. A simulação de docking molecular foi realizada por meio de software de docking molecular utilizando o Algoritmo Genético Lamarckiano, e a visualização foi conduzida com o auxílio de software de visualização molecular26.

Análise estatística

Todos os experimentos foram realizados utilizando pelo menos três réplicas biológicas independentes, e os resultados são apresentados como média ± desvio padrão (DP). A análise estatística foi realizada com software de análise estatística. As diferenças entre múltiplos grupos foram avaliadas por análise de variância de um fator (ANOVA), seguida pelo teste pós-hoc de comparações múltiplas de Tukey. Um valor de P inferior a 0,05 foi considerado indicativo de diferença estatisticamente significativa.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

A ruscogenina inibe seletivamente a viabilidade e a proliferação de células de carcinoma nasofaríngeo

O estudo inicialmente investigou o efeito da ruscogenina (Rus) na viabilidade de células epiteliais nasofaríngeas normais (NP69) e de células de carcinoma nasofaríngeo (CNF) (C666-1). Conforme determinado pelo ensaio CCK-8, o tratamento com Rus nas concentrações de 10, 20 e 50 µM não apresentou toxicidade significativa para as células normais NP69. Em contrapartida, a ruscogen...

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

O carcinoma nasofaríngeo (CNF) é uma neoplasia grave que apresenta alta prevalência de metástase, o que explica a necessidade urgente de melhores intervenções27. Aqui, demonstra-se que a Ruscogenina (Rus), um produto natural derivado da Radix ophiopogonis, exerce fortes efeitos antitumorais sobre células de CNF. Também se conclui que a Rus impede a progressão do CNF por meio da supressão da histona desmetilase KDM1A, o que subsequentemente promove dois tipos distintos de morte celular pro...

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores declaram não haver interesses financeiros concorrentes. Os autores declaram que ferramentas de IA generativa não foram utilizadas na concepção do estudo, na coleta de dados, na análise de dados ou na geração de figuras. Tecnologias assistidas por IA foram usadas exclusivamente para edição linguística mínima e correção gramatical durante a redação deste manuscrito. Os autores assumem total responsabilidade pelo conteúdo e pela integridade do trabalho publicado.

Agradecimentos

Não aplicável.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Sistema 7500 Fast Real-Time PCRApplied Biosystems4351106Análise de RT-qPCR
Kit de Apoptose Annexina-V-FITC/PIBD Biosciences556547Detecção de apoptose por citometria de fluxo
anticorpo anti-ACSL4Abcamab155282Anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-BaxCell Signaling Technology (CST)5023anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-Bcl-2Cell Signaling Technology (CST)15071Anticorpo primário para Western blot
Anticorpos
anticorpo anti-GPX4Abcamab125066Anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-KDM1A (LSD1)Cell Signaling Technology (CST)2139Anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-Ki67Abcamab16667Anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-MMP2Abcamab92536anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-MMP9Abcamab76003Anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-PCNACell Signaling Technology (CST)13110Anticorpo primário para Western blot
IgG anti-coelho, conjugada à HRPCell Signaling Technology (CST)7074anticorpo secundário
anticorpo anti-SLC7A11 (xCT)Abcamab175186anticorpo primário para Western blot
anticorpo anti-TFR1Abcamab84036Anticorpo primário para Western blot
Anti-βanticorpo anti-actinaCell Signaling Technology (CST)4970anticorpo primário de controle de carregamento
Kits de ensaio
Autodock 4.2Scripps Research InstituteN/ASimulação de docking molecular
kit de ensaio de proteína BCABeyotime BiotechnologyP0012Quantificação de proteínas
sonda BODIPY 581/591 C11Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)D3861Detecção de ESP em lipídios (2 μM)
linha celular C666-1iCell Bioscience Inc.iCell-h378Linhagem celular de carcinoma nasofaríngeo humano
Kit de ensaio de atividade da caspase-3Beyotime BiotechnologyC1115Avaliação da apoptose
Kit de ensaio CCK-8Dojindo Molecular TechnologiesCK04Medição da viabilidade celular
Produtos químicos & Reagentes
Citómetro de fluxo CytoFLEXBeckman CoulterCytoFLEXAnálise de apoptose
reagente de detecção ECLMilliporeSigmaWBKLS0500Visualização por Western blot (Immobilon)
Equipamento
Soro Fetal Bovino (SFB)Gibco (Thermo Fisher Scientific)10099141Suplemento para cultura celular
GraphPad Prism 8.0GraphPad SoftwareN/AAnálise estatística e geração de gráficos
software ImageJNIHN/AAnálise de densitometria de imagem
Meio livre de soro para queratinócitosiCell Bioscience Inc.iCell-019Para o cultivo celular de NP69
Microscópio confocal de varredura a laserCarl ZeissLSM 880Imagem de fluorescência com BODIPY C11
Microscópio de luz / fluorescênciaOlympusIX73Risco em ferida, Transwell & Imageamento de Fe2+
LightCycler 480 SYBR Green I MasterRoche Diagnostics4887352001PCR quantitativa em tempo real
reagente Lipofectamine 2000Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)11668019Reagente para transfeção celular
MatrigelCorning356234Matriz da membrana basal para ensaio de invasão
Leitor de microplacasMolecular DevicesSpectraMax M5Medição de absorbância (405, 450, 532 nm)
linha celular NP69iCell Bioscience Inc.iCell-h431Linhagem celular epitelial nasofaríngea humana normal
oe-KDM1A & plasmídeos oe-NCShanghai GenePharma Co., Ltd.Síntese PersonalizadaPlasmídeos para superexpressão de KDM1A
sonda Phen Green SK (PGSK)Invitrogen (Thermo Fisher Scientific)P14312Detecção de Fe2+ intracelular (10 μM)
Pymol 3.0SchrödingerN/AVisualização da ancoragem molecular
kit de transcrição reversaRoche Diagnostics4379012001Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit
tampão de lise RIPASolarbio (Pequim, China)R0010Extração de proteína total
meio RPMI 1640iCell Bioscience Inc.iCell-0002Para o cultivo celular de C666-1
Ruscogenina (Rus)MedChemExpress (MCE)HY-N0193Tratamento medicamentoso, pureza ≥ 98%
Software
Kit de ensaio TBARSCayman Chemical10009055Medição da peroxidação de lipídios
Reagente TRizolInvitrogen (Thermo Fisher Scientific)*15596026Extração de RNA total

Referências

  1. Zhou R, Qiu L, Zhou L, Geng R, Yang S, Wu J. P4HA1 activates HMGCS1 to promote nasopharyngeal carcinoma ferroptosis resistance and progression. Cell Signal. 2023;105:110609.
  2. Cao JY, Liu L, Chen SP, Zhang X, Mi YJ, Liu ZG, et al. Prognostic significance and therapeutic implications of centromere protein F expression in human nasopharyngeal carcinoma. Mol Cancer. 2010;9:237.
  3. Dixon SJ, Lemberg KM, Lamprecht MR, Skouta R, Zaitsev EM, Gleason CE, et al. Ferroptosis: an iron-dependent form of nonapoptotic cell death. Cell. 2012;149(5):1060-72.
  4. Liu S, Zhang HL, Li J, Ye ZP, Du T, Li LC, et al. Tubastatin A potently inhibits GPX4 activity to potentiate cancer radiotherapy through boosting ferroptosis. Redox Biol. 2023;62:102677.
  5. Amos A, Jiang N, Zong D, Gu J, Zhou J, Yin L, et al. Depletion of SOD2 enhances nasopharyngeal carcinoma cell radiosensitivity via ferroptosis induction modulated by DHODH inhibition. BMC Cancer. 2023;23(1):117.
  6. Jiang H, Li M, Du K, Ma C, Cheng Y, Wang S, et al. Traditional Chinese medicine for adjuvant treatment of breast cancer: Taohong Siwu decoction. Chin Med. 2021;16(1):129.
  7. Shang L, Wang Y, Li J, Zhou F, Xiao K, Liu Y, et al. Mechanism of Sijunzi decoction in the treatment of colorectal cancer based on network pharmacology and experimental validation. J Ethnopharmacol. 2023;302(Pt A):115876.
  8. Yang CH, Tung KL, Wu YT, Liu C, Lin SC, Yang CC, et al. Qing Yan Li Ge Tang, a Chinese herbal formula, induces autophagic cell death through the PI3K/Akt/mTOR pathway in nasopharyngeal carcinoma cells in vitro. Evid Based Complement Alternat Med. 2021;2021:9925684.
  9. Ren T, Bai XY, Yang MZ, Xu N, Guo XZ, Qin LJ, et al. Gambogic acid suppresses nasopharyngeal carcinoma via rewiring the molecular network of cancer malignancy and immunosurveillance. Biomed Pharmacother. 2022;150:113012.
  10. Zhou T, Zhao S, Tang S, Wang Y, Wu R, Zeng X, et al. Guggulsterone promotes nasopharyngeal carcinoma cells' exosomal Circfip1L1 to mediate miR-125a-5p/VEGFA, affecting tumor angiogenesis. Curr Mol Pharmacol. 2023;16(8):870-80.
  11. Feng X, Shi H, Chao X, Zhao F, Song L, Wei M, et al. Deciphering the pharmacological mechanism of the herb Radix Ophiopogonis in the treatment of nasopharyngeal carcinoma by integrating iTRAQ-coupled 2-D LC-MS/MS analysis and network investigation. Front Pharmacol. 2019;10:253.
  12. Kim W, Lee WB, Lee J, Min BI, Lee H, Cho SH. Traditional herbal medicine as adjunctive therapy for nasopharyngeal cancer: a systematic review and meta-analysis. Integr Cancer Ther. 2015;14(3):212-20.
  13. Zhao J, He B, Seshadri VD, Xu S. Anticancer effect of ruscogenin in B(a)P-induced lung cancer in mice via modulation of proinflammatory cytokines and mitochondrial enzymes. Appl Biochem Biotechnol. 2022;194(12):5862-77.
  14. Rabitha R, Shivani S, Showket Y, Sudhandiran G. Ferroptosis regulates key signaling pathways in gastrointestinal tumors: underlying mechanisms and therapeutic strategies. World J Gastroenterol. 2023;29(16):2433-51.
  15. Feinberg AP, Koldobskiy MA, Göndör A. Epigenetic modulators, modifiers and mediators in cancer etiology and progression. Nat Rev Genet. 2016;17(5):284-99.
  16. Song Y, Wu F, Wu J. Targeting histone methylation for cancer therapy: enzymes, inhibitors, biological activity and perspectives. J Hematol Oncol. 2016;9(1):49.
  17. Zhang W, Ruan X, Li Y, Zhi J, Hu L, Hou X, et al. KDM1A promotes thyroid cancer progression and maintains stemness through the Wnt/β-catenin signaling pathway. Theranostics. 2022;12(4):1500-17.
  18. Ismail T, Lee HK, Kim C, Kwon T, Park TJ, Lee HS. KDM1A microenvironment, its oncogenic potential, and therapeutic significance. Epigenetics Chromatin. 2018;11(1):33.
  19. Hou X, Li Q, Yang L, Yang Z, He J, Li Q, et al. KDM1A and KDM3A promote tumor growth by upregulating cell cycle-associated genes in pancreatic cancer. Exp Biol Med (Maywood). 2021;246(17):1869-83.
  20. Guo D, Liu F, Zhang L, Bian N, Liu L, Kong L, et al. Long non-coding RNA AWPPH enhances malignant phenotypes in nasopharyngeal carcinoma via silencing PTEN through interacting with LSD1 and EZH2. Biochem Cell Biol. 2021;99(2):195-202.
  21. Lu C, Cai Y, Liu W, Peng B, Liang Q, Yan Y, et al. Aberrant expression of KDM1A inhibits ferroptosis of lung cancer cells through up-regulating c-Myc. Sci Rep. 2022;12(1):19168.
  22. Hua H, Zhu Y, Song YH. Ruscogenin suppressed the hepatocellular carcinoma metastasis via PI3K/Akt/mTOR signaling pathway. Biomed Pharmacother. 2018;101:115-22.
  23. Sun Q, Zhen P, Li D, Liu X, Ding X, Liu H. Amentoflavone promotes ferroptosis by regulating reactive oxygen species (ROS) /5'AMP-activated protein kinase (AMPK)/mammalian target of rapamycin (mTOR) to inhibit the malignant progression of endometrial carcinoma cells. Bioengineered. 2022;13(5):13269-79.
  24. Carlsen CU, Kurtmann L, Brüggemann DA, Hoff S, Risbo J, Skibsted LH. Investigation of oxidation in freeze-dried membranes using the fluorescent probe C11-BODIPY(581/591). Cryobiology. 2009;58(3):262-7.
  25. Liu J, Yuan S, Yao Y, Wang J, Scalabrino G, Jiang S, et al. Network pharmacology and molecular docking elucidate the underlying pharmacological mechanisms of Houttuynia cordata in treating SARS-CoV-2 pneumonia. Viruses. 2022;14(7).
  26. Zhu W, Li Y, Zhao J, Wang Y, Li Y, Wang Y. The mechanism of triptolide in the treatment of connective tissue disease-related interstitial lung disease based on network pharmacology and molecular docking. Ann Med. 2022;54(1):541-52.
  27. Lee AWM, Ng WT, Chan JYW, Corry J, Mäkitie A, Mendenhall WM, et al. Management of locally recurrent nasopharyngeal carcinoma. Cancer Treat Rev. 2019;79:101890.
  28. Li BH, Ma H, Zhu J, Chen J, Dai YQ, Zhang XJ, et al. Semisynthesis and anti-cancer properties of novel honokiol derivatives in human nasopharyngeal carcinoma CNE-2Z cells. J Enzyme Inhib Med Chem. 2023;38(1):2244694.
  29. Qiao H, Zhang W, Liu P, Zhu R, Zhang J, Gao J, et al. Ropivacaine inhibits proliferation and invasion and promotes apoptosis and autophagy in bladder cancer cells via inhibiting the PI3K/AKT pathway. J Biochem Mol Toxicol. 2023;37(1):e23233.
  30. Zhao L, Han S, Hou J, Shi W, Zhao Y, Chen Y. The local anesthetic ropivacaine suppresses the progression of breast cancer by regulating miR-27b-3p/YAP axis. Aging (Albany, NY). 2021;13(12):16341-52.
  31. Ghasemi A, Khanzadeh T, Zadi Heydarabad M, Khorrami A, Jahanban Esfahlan A, Ghavipanjeh S, et al. Evaluation of BAX and BCL-2 gene expression and apoptosis induction in acute lymphoblastic leukemia cell line CCRFCEM after high-dose prednisolone treatment. Asian Pac J Cancer Prev. 2018;19(8):2319-23.
  32. Wadey KS, Johnson JL, George SJ. Monitoring cellular proliferation and apoptosis in atherosclerotic plaques and intimal thickenings. Methods Mol Biol. 2022;2419:507-19.
  33. Chen P, Wang D, Xiao T, Gu W, Yang H, Yang M, et al. ACSL4 promotes ferroptosis and M1 macrophage polarization to regulate nasopharyngeal carcinoma tumorigenesis. Int Immunopharmacol. 2023;122:110629.
  34. Forcina GC, Dixon SJ. GPX4 at the crossroads of lipid homeostasis and ferroptosis. Proteomics. 2019;19(18):e1800311.
  35. Zhao Y, Li Y, Zhang R, Wang F, Wang T, Jiao Y. The role of erastin in ferroptosis and its prospects in cancer therapy. Onco Targets Ther. 2020;13:5429-41.
  36. Sareddy GR, Nair BC, Krishnan SK, Gonugunta VK, Zhang QG, Suzuki T, et al. KDM1 is a novel therapeutic target for glioma treatment. Oncotarget. 2013;4(1):18-28.
  37. Ferrari-Amorotti G, Fragliasso V, Esteki R, Prudente Z, Soliera AR, Cattelani S, et al. Inhibiting the interactions between the lysine demethylase LSD1 and snail/slug blocks cancer cell invasion. Cancer Res. 2013;73(1):235-45.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Etiquetas

Tratamento com RuscogeninaDownregulation de KDM1AIndução de FerroptoseIndução de ApoptoseCélulas C666-1Proliferação CelularWestern BlotPeroxidação LipídicaAtivação da Caspase-3
Fale conosco
Recomendar à biblioteca

Privacidade

Termos de Uso

Políticas

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Todos os direitos reservados.