Administração de Composto II

Muitos experimentos exigem que um composto seja administrado em um animal através de uma rota oral ou tópica, de modo que o método imita melhor a ingestão natural da substância experimental.

Para a dosagem oral, o composto pode ser dissolvido na água potável ou incorporado aos alimentos que os animais consomem. Outro método mais preciso de dosagem oral é o gavage oral no qual uma agulha grande é usada para colocar o composto diretamente no estômago. Por outro lado, um agente tópico pode ser colocado diretamente na superfície da pele, e geralmente se destina a afetar apenas a área a que é aplicada. Cada uma dessas estratégias tem vantagens e limitações, que vamos discutir neste vídeo. Depois disso, demonstraremos como executar essas técnicas de administração composta em animais de laboratório, e algumas de suas aplicações.

Antes de nos aprofundarmos nos protocolos, vamos rever as considerações, benefícios e deficiências dessas técnicas. A dosagem oral com comprimidos, cápsulas ou líquido é o método mais usado de administração de drogas em humanos. No entanto, comprimidos e cápsulas são impraticáveis para roedores, de modo que a dosagem oral comum é realizada dissolvendo o composto na água potável ou alimentos.

Ao dosar via água potável, a sacarose é frequentemente adicionada à água para melhorar a palatabilidade. No entanto, deve ser bem equilibrado para incentivar a ingestão normal de água e não beber excessivamente por causa do sabor açucarado. Uma boa regra é começar com uma solução de sacarose de 10% e, em seguida, ajustar dependendo da ingestão. Outra forma de doar oralmente o animal é através de alimentos especializados. Há ração comercialmente disponível que tem compostos comumente dosados, como fenbendazol, incorporados a ele. As empresas de ração de roedores também podem criar dietas especializadas de teste para atender a um requisito experimental.

As vantagens com esta forma de dosagem oral são que ela não é invasiva, administra o composto continuamente e imita a administração de medicamentos orais humanos. No entanto, falta precisão porque a ingestão composta depende da aceitação do alimento ou da água, da estabilidade do composto e do número de animais presentes na gaiola. Se a dosagem exata não é fundamental para o experimento, este método não invasivo é melhor para o bem-estar dos animais.

Para uma administração oral mais precisa, pode-se usar gavage oral, que deposita o composto diretamente no estômago em um momento específico e em um volume especificado. No entanto, é necessário um treinamento adequado para realizar essa técnica, pois podem ocorrer danos graves ao animal se não forem devidamente contidos.

Chegando aos agentes tópicos, estes incluem cremes, loções, pomadas, sprays e géis. Normalmente, os agentes tópicos destinam-se a afetar apenas a área a que são aplicados. No entanto, eles também podem ser absorvidos na corrente sanguínea, o que pode ser intencional ou não. Essa absorção depende de: a condição da pele, a área de superfície utilizada, a concentração da substância, a duração do contato e a solubilidade lipídica do agente.

Agora que discutimos o histórico de métodos de administração oral e tópica, vamos aprender os protocolos que começam com a administração oral via ração ou água.

Para os cálculos de dosagem, primeiro você precisa saber a dose pretendida a ser administrada. Segundo, você tem que determinar o peso corporal. Em vez de pesar animais individuais, você pode usar o peso médio da cepa do rato ou rato para seus cálculos, a menos que especificado de outra forma. Em terceiro lugar, você deve estar ciente do número de animais por gaiola, e quarto, você precisa saber a média diária de consumo diário de água ou alimentos por gaiola.

Lembre-se, o alimento formulado ou a água potável com o composto dissolvido podem precisar ser substituídos com mais frequência do que alimentos ou água padrão devido à instabilidade composta. Alguns compostos podem ser sensíveis à luz ou podem precipitar com o tempo.

Agora, vamos aprender a administrar doses precisas oralmente realizando gavage oral em ratos e ratos.

O primeiro passo é selecionar uma agulha apropriada para o procedimento. Estes são reutilizáveis feitos de aço inoxidável ou descartáveis com um eixo plástico flexível e ponta de silicone. Para ratos, agulhas de dosagem reto ou curvas de 20-25 que têm 1,5 polegadas de comprimento são apropriadas. Para ratos, selecione agulhas de dosagem retos ou curvas de 18-20 que têm 2-3 polegadas de comprimento. O medidor de agulha e seleção de seringas corretas também depende de volume e viscosidade. Revise o vídeo da Administração Composta para entender o impacto desses fatores. Para dosar líquidos grossos é preferível uma seringa de bloqueio Luer.

Depois de fazer a seleção, afixe a seringa na agulha de tal forma que as graduações no barril possam ser lidas sem girar a agulha. Isso é importante, pois uma vez que a agulha foi colocada no esôfago qualquer rotação pode romper a parede esofágica resultando na morte do animal. Em seguida, encha a seringa com o volume correto da solução a ser administrada.

Este método deve ser sempre realizado em animais conscientes com reflexos de deglutição intactos para evitar a colocação acidental na traqueia. O uso da técnica de contenção adequada é fundamental para este procedimento. Para o rato, segure a pele na base da cabeça e segure firmemente o scruff. Isso garante que a cabeça tenha uma oportunidade mínima para o movimento lado a lado. Além disso, certifique-se de que o corpo está suspenso em linha reta da cabeça para a cauda; qualquer torção impedirá a colocação da agulha de gavage no esôfago. Os traseiros também devem ser estabilizados para evitar a rotação do corpo.

Para conter um rato, segure-o sobre os ombros usando o índice e os dedos médios em cada lado do pescoço. Isso evitará que o rato vire a cabeça de um lado para o outro. O polegar, terceiro e quarto dedos circundam o peito para evitar que o animal se mova para frente ou para trás.

Depois de conter corretamente o animal, posicione a agulha com a curva voltada para baixo e em linha com a curva natural do pescoço. Em seguida, introduza a agulha na boca do lado direito ou esquerdo, através da diástemata e entre os incisivos e molares em um ângulo em direção à parte de trás da faringe. Agora que a agulha é colocada na cavidade oral, use-a para inclinar a cabeça para trás até que o nariz esteja apontado para cima. Neste ponto, a agulha deve deslizar facilmente para dentro do esôfago. Uma vez que a agulha esteja posicionada no estômago, deposite suavemente o composto. Em seguida, retire a agulha do animal, certificando-se de não rodá-la. É importante NÃO forçar a agulha para baixo. Se sentir alguma resistência, remova-a e tente novamente. Durante a realização do procedimento, se o animal apresentar sinais de cianose ou dificuldade respiratória ou se houver solução que flua de sua boca, a agulha de dosagem deve ser imediatamente removida e o animal deve ser liberado em sua gaiola.

Por último, vamos rever os procedimentos para administração atual em animais de laboratório. Comece anestesiando o animal. Isso é comumente feito usando um inalador de ação rápida, o que permite uma rápida recuperação animal. Para mais detalhes sobre a administração da anestesia, consulte outro vídeo nesta coleção.

Em seguida, usando um cortador de cabelo remova todas as peles da área de aplicação. Para evitar cortes, coloque a superfície plana do cortador contra a pele e raspe na direção oposta à do crescimento capilar. Em seguida, limpe a pele com água e seque-a com uma gaze. Agora, usando um aplicador de ponta de algodão, aplique a substância diretamente na pele. Para obter melhores resultados, aplique várias camadas finas de pomada ou creme, em oposição a uma aplicação única de uma camada grossa. Para evitar a ingestão acidental de compostos topicamente aplicados devido ao preparo, coloque uma coleira pequena ou um escudo para evitar que o animal atinja a parte do corpo afetada. Além disso, para evitar que os almoestos sejam companheiros de gaiola, os animais devem ser alojados individualmente.

Agora que você tem um entendimento dessas rotas alternativas de administração, vamos ver como elas estão sendo usadas em pesquisas biomédicas hoje.

Uma das aplicações importantes do gavage oral é a administração precisa de substâncias para estudar seu efeito direto no trato gastrointestinal. Aqui, os pesquisadores usaram esse método para entregar uma levedura probiótica transformada diretamente no estômago do animal. E então eles dissecaram as manchas do Peyer, que são linfonodos organizados do intestino delgado, para estudar a adesão do microrganismo entregue.

A rota oral não invasiva pode ser usada para imitar o modus natural da infecção transmitida por alimentos. Neste experimento, o cientista desenvolveu um modelo para transmissão oral de listeria monocytogenes em camundongos através da ingestão de alimentos contaminados. Após a infecção, os pesquisadores colheram vários órgãos como intestino delgado, cólon, baço, fígado e vesícula biliar, para analisar a propagação da infecção nesses tecidos.

Por fim, alguns pesquisadores estão interessados em estudar o mecanismo pelo qual a radiação UV pode levar a queimaduras solares. Aqui, os cientistas usaram a rota tópica para aplicar uma substância farmacológica que induz a produção de melanina epidérmica-um agente protetor UV. Depois disso, eles usaram um protocolo semelhante aos estudos humanos para examinar o efeito protetor do agente topicamente aplicado contra o eritema induzido pela radiação UV.

Você acabou de assistir a segunda parte da JoVE de métodos de administração composta lidando com dosagem oral e tópica. Agora você deve entender como se pode doar oralmente o animal usando ração ou água, e como se pode realizar a administração mais precisa e oral de gavage. Por fim, você deve conhecer as considerações e métodos para administração tópica, e aplicações dessas várias técnicas. Como sempre, obrigado por assistir!