Name: Medição da pressão arterial em ratos usando Recording Volume de pressão, um método de cauda-manguito (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-15T00:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Aprenda a medir a pressão arterial em roedores de forma não invasiva utilizando o sistema CODA com método de manguito caudal e tecnologia VPR. Este protocolo permite avaliações simultâneas em até oito animais para pesquisa cardiovascular.

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<ol style="padding:5px;"><li> Equipamentos de Set-up <ol style="padding:5px;"><li> Selecionar uma área no laboratório onde a temperatura ambiente for igual ou acima de 20 ° C. </li><li> Evite locais perto de saídas de ar condicionado e / ou ruído alto. </li><li> Evite expor o animal a odores que podem causar irritação e / ou estresse, como perfume, colônia, produtos químicos e de limpeza. </li><li> Ligue o controlador CODA. </li><li> Ligue a Plataforma aquecimento e ajuste para o Nível 3. Se a temperatura ambiente está acima de 25 ° C, começa nos Níveis 1 ou 2. </li><li> Controlador de Diagnóstico Teste <ol style="padding:5px;"><li> Abra o Software CODA. </li><li> Selecione o dispositivo CODA, clicando sobre ela. </li><li> Clique em &quot;Dispositivo de Teste selecionados&quot;. </li><li> Selecione as algemas e canais para testar e clique em &quot;Test&quot;. </li><li> Após o teste estiver concluído, feche a janela de teste do dispositivo. </li></ol></li></ol></li><li> Software Set-up <ol style="padding:5px;"><li> Gerenciar pessoal e Animais <ol style="padding:5px;"><li> Gerenciar Pessoal <ol style="padding:5px;"><li> Selecione Ferramentas&gt; Gerenciar Pessoal. </li><li> Clique em &quot;Pesquisador 1&quot; para mudar o nome. </li><li> Clique nas linhas subseqüentes para adicionar pesquisadores adicionais. </li><li> Clique em &quot;Tab Técnicos&quot; para modificar ou adicionar técnicos. </li><li> Clique em &quot;Tab amostras&quot; para nomear o animal para fácil identificação e para selecionar o tipo de animal; rato ou mouse. </li><li> Clique em &quot;Tab Animals&quot; para alterar o tipo de animal e sensibilidade. </li></ol></li></ol></li><li> Experimente novas <ol style="padding:5px;"><li> Selecione File&gt; New Experiment&gt; </li><li> Começar uma nova experiência <ol style="padding:5px;"><li> Digite o Nome Experiment. </li><li> Selecione o Pesquisador chave. </li><li> Selecione um Begin Date e clique em &quot;Next&quot;. </li></ol></li><li> Informações básicas Sessão <ol style="padding:5px;"><li> Insira o Nome da sessão </li><li> Set &quot;Ciclos Aclimatação&quot; a 5. Se preferir não incluir ciclos de aclimatação, ajuste para zero. Para auxiliar na aclimatação do animal para o titular e punhos, adicione ciclos adicionais para o seu experimento e executar o experimento por 5 dias consecutivos. </li><li> Conjunto de &quot;Número de Sets&quot; para 1. </li><li> Set &quot;Time Between Sets&quot; de 30 segundos para vários conjuntos </li><li> Set &quot;Ciclos por Set&quot; para 20 ciclos. </li><li> Definir &quot;tempo entre os ciclos&quot; a 5 segundos e clique em &quot;Next&quot;. </li></ol></li></ol></li><li> Seleção de amostra <ol style="padding:5px;"><li style="list-style-type:none;"><ol style="padding:5px;"><li> Selecionar a amostra a partir do pool de amostra e atribuí-lo ao primeiro canal disponível e clique em &quot;Next&quot;. </li></ol></li><li> Parâmetros da sessão <ol style="padding:5px;"><li> Set &quot;pressão de oclusão máxima&quot; para 250mmHg. </li><li> Conjunto de &quot;Time deflação&quot; a 20 segundos para ratos, 15 segundos para ratos. </li><li> Conjunto de &quot;Volume Mínimo&quot; para 15ul. </li><li> Set &quot;Estilo de exibição&quot; para um canal por Graph. </li><li> Adicionar Pesquisadores e Técnicos adicionais e clique em &quot;Next&quot;. </li></ol></li><li> Script sessão <ol style="padding:5px;"><li> Rever o Script sessão e clique em &quot;Next&quot;. </li><li> Não selecione Concluir até que você complete a seção Preparação Animal. </li></ol></li></ol></li></ol></li><li> Preparação dos animais <ol style="padding:5px;"><li> Animais Set-up <ol style="padding:5px;"><li> Detentor de animais <ol style="padding:5px;"><li> Para treinar e melhorar a aclimatação animal, adicionar ciclos adicionais para o seu experimento e executar o experimento por cinco dias consecutivos. Você também pode ajudar com a aclimatação ao colocar o animal no suporte por 15 minutos durante 3 dias consecutivos antes do estudo real. </li><li> Coloque cada animal em um suporte ao pegar o animal pela cauda e gentilmente a colocação do animal na parte traseira do titular que enfrenta a extremidade aberta do cone do nariz. Nota: o tamanho do animal em relação ao tamanho do porta-selecionado. O animal deve ser capaz de entrar livremente o titular. </li><li> Cuidadosamente assegurar a porta traseira para o titular, girando a tampa de rosca vermelha na porta traseira. Cuidados devem ser tomados para evitar beliscar a cauda ou qualquer outras partes do corpo ao mesmo tempo garantir a escotilha traseira. </li><li> Deslize o cone do nariz em direção à porta traseira, o que limita o movimento do animal. O nariz do avião devem estar em condições de limitar o animal de se virar enquanto no interior o titular. </li><li> Coloque o suporte para a plataforma do aquecimento na posição designada. Se o teste do mesmo grupo de animais ao longo de um período de tempo, certifique-se de girar a posição titular na plataforma o aquecimento para melhorar a consistência e precisão das medições de seu BP. Permitir que o animal, pelo menos, 5 minutos para se aclimatar ao titular. </li><li> Não toque ou lidar com o animal, enquanto no interior o titular. O maior contato pode irritar o animal. </li><li> Nunca deixe o animal na porta automática. </li></ol></li><li> Colocação manguito <ol style = &quot;padding: 5px;&quot;&gt; <li> Passe a cauda através do &quot;manguito&quot;. Coloque este cuff tão perto da base da cauda possível sem força. </li><li> Garantir o &quot;Tubing Cuff Oclusão&quot; no entalhe na parte superior traseira do titular. </li><li> Passe a cauda através do &quot;Cuff VPR&quot;, colocando-o dentro de dois milímetros do &quot;manguito&quot;. </li><li> Garantir o &quot;Tubing Cuff VPR&quot; no entalhe na parte superior traseira do titular. </li><li> Anexar os punhos para o controlador de CODA. </li></ol></li><li> Temperatura animais <ol style="padding:5px;"><li> Permitir que o animal, pelo menos, 5 minutos para termorregulação. </li><li> Registrar a temperatura do animal com freqüência com um termômetro infravermelho. A temperatura do animal deve ser de 32 a 35 ° C. </li></ol></li></ol></li></ol></li><li> Experimento <ol style="padding:5px;"><li> Experimente começar <ol style="padding:5px;"><li> Clique em &quot;Finish&quot; eo experimento começará imediatamente. </li></ol></li><li> Experimento final <ol style="padding:5px;"><li> Animal <ol style="padding:5px;"><li> Remover imediatamente o animal do punhos e suporte. </li><li> Devolver o animal para sua gaiola após o &quot;Relatório de Resumo Simples Session&quot; é exibida. </li></ol></li><li> Coleta de Dados <ol style="padding:5px;"><li> Após a conclusão do último ciclo os ciclos aceitos serão automaticamente exibidos no formato de planilha dentro do aplicativo CODA, clique no botão &quot;Exportar para Excel&quot; botão. </li><li> Selecione a pasta para colocar o arquivo dentro, o nome do arquivo e clique em &quot;Save&quot;. </li><li> Abra o aplicativo Excel e clique em &quot;Abrir&quot;. </li><li> Ver todos os tipos de arquivo para exibir o arquivo &quot;. Csv salvo&quot;, clique no arquivo. </li></ol></li><li> Processamento de Dados <ol style="padding:5px;"><li> Existem várias maneiras de processar os dados dentro do arquivo Excel. Uma prática comum é obter a média e desvio padrão. </li><li> Excluir medidas se o desvio padrão é maior que 30. </li><li> Além disso, ciclos rejeitado pode ser visualizado e banco de dados inteiro pode ser facilmente exportados para o Excel. Consultar o Manual do Usuário para informações adicionais. </li></ol></li></ol></li></ol></li></ol>

Os autores não têm nada a declarar.

medição da pressão arterial em ratos usando recording volume de pressão, um método de cauda-manguito

Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method

O CODA 8 canais de alta taxa de transferência não-invasiva da pressão arterial do sistema mede a pressão arterial em até 8 camundongos ou ratos simultaneamente. O sistema CODA tail cuff usa Recording Volume de pressão (VPR) para medir a pressão arterial através da determinação do volume de sangue da cauda. Um transdutor de pressão especialmente concebidos diferencial e uma oclusão medida tail cuff-o volume total de sangue na cauda sem a necessidade de obter o sinal de pulso individual. Especial atenção é dada ao comprimento do manguito de oclusão, a fim de obter as leituras da pressão arterial mais precisos. VPR podem facilmente obter leituras sobre pele escura roedores, como ratos e C57BL6 MRI é compatível. O sistema CODA fornece-lhe com as medições de seis (6) os parâmetros de pressão diferentes sangue; pressão arterial sistólica e diastólica, freqüência cardíaca, pressão arterial média, o fluxo de sangue da cauda, ​​e volume de sangue da cauda. Medições podem ser feitas em qualquer ratos acordados ou anestesiados ou ratos. O sistema inclui um controlador CODA, computador portátil, software, punhos, os detentores de animais, almofadas de aquecimento infravermelho, e um termômetro infravermelho. Há sete tamanhos diferentes para ratos titular tão pequeno quanto 8 gramas de ratos do tamanho de 900 gramas.

O CODA 8 canais de alta taxa de transferência não-invasiva da pressão arterial do sistema mede a pressão arterial em até 8 camundongos ou ratos simultaneamente. Este sistema utiliza-tail cuff Recording Volume de pressão (VPR) para medir a pressão arterial através da determinação do volume de sangue da cauda.

Medição da pressão arterial em ratos usando Recording Volume de pressão, um método de cauda-manguito

O sistema de pressão arterial não invasiva de alto rendimento de 8 canais CODA mede a pressão arterial em até 8 camundongos ou ratos simultaneamente. O CODA...

A palavra coda é italiana e significa cauda. O sistema não invasivo de pressão arterial Coda permite medições da pressão arterial em roedores, graças a um sensor especializado de gravação de pressão por volume que mede as alterações no volume sanguíneo da cauda quando colocado sobre a cauda de um animal. Este vídeo demonstra como configurar o sistema, preparar os animais e obter medições de pressão arterial de oito animais simultaneamente.Olá, sou Anju Bala Krishnan, trabalhando no laboratório de Alan Dougherty, Centro de Pesquisa Cardiovascular, Universidade de Kentucky, Lexington. Hoje vamos mostrar um procedimento para medir a pressão arterial em camundongos utilizando o método de gravação de pressão por volume com colete na cauda. Utilizamos este procedimento em nosso laboratório para estudar o sistema cardiovascular.Então vamos começar. Para configurar o sistema CODA, selecione uma área do laboratório onde a temperatura ambiente seja estável em 20 graus Celsius ou acima disso. Evite locais próximos a saídas de ar condicionado, pois expor os animais a ruídos altos ou odores pode irritá-los ou causar estresse.Os odores de animais podem incluir qualquer perfume forte que você esteja usando. Ligue o controlador Coda e, em seguida, as plataformas de aquecimento, que devem ser ajustadas para o nível três. Se a temperatura ambiente estiver acima de 25 graus Celsius, comece nos níveis um ou dois.Realize primeiro o teste de diagnóstico do controlador, abra o software Coda. Selecione o dispositivo Coda clicando sobre ele. Clique em testar dispositivo selecionado.Selecione as braçadeiras e os canais para testar e clique em testar. Após a conclusão do teste de diagnóstico do controlador, feche a janela de teste do dispositivo. Selecione o código do controlador a ser usado e, em seguida, clique.Use esses dispositivos para configurar o software. Selecione ferramentas para gerenciar o pessoal. Em seguida, clique no pesquisador um.Para alterar o nome, clique nas linhas subsequentes para adicionar pesquisadores adicionais. Em seguida, clique em salvar dados. Clique na guia técnicos para modificar ou adicionar técnicos.Depois disso, clique na aba espécimes para nomear os animais, facilitando sua identificação, e para selecionar o tipo de animal. Em seguida, clique em salvar dados. Por fim, clique na aba animais.Para alterar o tipo de animal e a sensibilidade, clique em salvar dados e, em seguida, feche. Para iniciar um novo experimento, selecione arquivo Novo experimento. Insira o nome do experimento, selecione o pesquisador principal e escolha uma data de início.Clique em próximo. O próximo passo é inserir as informações básicas da sessão. Comece digitando o nome da sessão, defina os ciclos de aclimatação como cinco; se preferir não incluir ciclos de aclimatação, defina como zero.Defina o número de séries como uma vez, com intervalo entre as séries de 30 segundos para múltiplas séries. Defina os ciclos por série como 20 ciclos e o intervalo entre ciclos como cinco segundos. Em seguida, clique em próximo.Para iniciar a seleção de espécimes, selecione o espécime do grupo de espécimes e atribua-o ao primeiro canal disponível. E clique em próximo para definir os parâmetros da sessão. Defina a pressão máxima de oclusão como 250 milímetros.Tempo de desinflação do mercúrio para 20 segundos. Para camundongos, volume mínimo para 15 microlitros e estilo de exibição com um canal por gráfico. Você também pode adicionar pesquisadores e técnicos adicionais.Em seguida, clique em próximo. Revise o script da sessão e clique em próximo. Não selecione concluir até que você finalize a seção de preparo do animal, que é descrita a seguir.E agora você pode recuperar os animais e colocá-los ao lado do sistema de pressão sanguínea coda. Antes de colocar os animais nos suportes, observe o tamanho de cada animal em relação ao tamanho do suporte selecionado. O animal deve ser capaz de entrar livremente no suporte.Coloque cada animal em um suporte pegando-o pela cauda e posicionando-o suavemente na parte traseira do suporte, que fica voltada para a extremidade aberta do cone nasal. Prenda cuidadosamente a tampa traseira ao suporte girando o parafuso localizado na tampa traseira. Tenha cuidado para não prender a cauda ou quaisquer outras partes do corpo ao fixar a tampa traseira.Próximo slide. O cone nasal em direção à escotilha traseira. Limitando o movimento do animal.O cone nasal deve estar posicionado de forma a impedir que o animal dê meia-volta. Com o animal dentro do suporte, coloque o suporte sobre a plataforma de aquecimento. Na posição designada, permita que o animal se aclimate ao suporte por pelo menos cinco minutos.Não toque nem manipule o animal. Enquanto estiver dentro do suporte, o contato aumentado pode irritar o animal, e nunca deixe o animal no suporte sem supervisão. Para posicionar corretamente a braçadeira de oclusão na cauda, passe a cauda através da braçadeira de oclusão e posicione a braçadeira o mais próximo possível da base da cauda, sem aplicar força.Em seguida, passe a cauda pela braçadeira do sensor VPR, posicionando-a a menos de dois milímetros da braçadeira de oclusão. Fixe o tubo no entalhe na parte superior traseira do suporte. A braçadeira de oclusão na cauda é inflada para impedir o fluxo sanguíneo na cauda.O manguito de oclusão é desinflado lentamente e o manguito de cauda VPR, que incorpora um sensor especialmente projetado, mede as características fisiológicas do fluxo sanguíneo que retorna enquanto o sangue volta à cauda. O manguito sensor VPR mede o inchaço da cauda em decorrência das pulsações arteriais provocadas pelo fluxo sanguíneo. A pressão arterial sistólica é medida automaticamente na primeira ocorrência de inchaço da cauda.A pressão arterial diastólica é calculada automaticamente quando a taxa crescente de inchaço cessa na cauda. Depois que todos os animais forem colocados nos suportes e as braçadeiras aplicadas em suas caudas, deixe-os pelo menos cinco minutos para regularização térmica. Registre a temperatura dos animais.Frequentemente com um termômetro infravermelho, a temperatura do animal deve estar entre 32 e 35 graus Celsius. Agora que os animais estão prontos, podemos iniciar o experimento. Clique em finalizar para começar o experimento.A linha vermelha representa a desinsuflação da braçadeira de oclusão e da braçadeira do sensor VPR. A linha azul representa as alterações no volume sanguíneo na cauda. O primeiro ponto de inflexão da linha azul, correspondente à taxa mínima de variação, identifica a pressão arterial sistólica.O segundo ponto de inflexão da linha azul, correspondente à taxa máxima de variação, identifica a pressão arterial diastólica ao final do experimento. Remova imediatamente os animais das braçadeiras e do suporte. Um relatório simples de resumo da sessão é exibido.Os dados coletados no experimento são salvos como um arquivo Excel. Existem várias maneiras de processar os dados dentro do arquivo Excel. Uma prática comum é obter a média e o desvio padrão, excluir medições.Se o desvio padrão for maior que 30. Além disso, os ciclos rejeitados podem ser visualizados e todo o banco de dados pode ser facilmente exportado para o Excel. Consulte o protocolo escrito e o manual do usuário.Para obter mais informações, acabei de mostrar como medir a pressão arterial em camundongos de forma não invasiva utilizando a gravação de pressão por volume. É mais importante reduzir o estresse dos animais seguindo este procedimento para obter medições precisas e consistentes. Assim sendo, é isso.Obrigado por assistir e boa sorte com os experimentos.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

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