Name: Cateterização de alças intestinais em Ruminantes (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-06-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 17 min 15 s
Description: Aprenda a técnica de cateterização de alças intestinais em ovinos para estudos de imunologia intestinal de longo prazo. Este método permite a administração direta de múltiplos tratamentos após a recuperação cirúrgica dos animais.

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A pesquisa não poderia ter sido concluído sem a dedicação e esforços de muitas pessoas no Agriculture and Agri-Food Canada Research Centre, Lethbridge, Alberta, Canadá. A este respeito, nós agradecemos: Tara Shelton para pré e cuidados pós-operatórios de animais, preparação cirúrgica e anestesiologia, análise de amostras, e assistência com o vídeo de imagem; Randy Wilde e Estela Costa para os cuidados pré e pós-operatório; Jenny Gusse para análise de amostras; Byron Lee para trocar a imagem, e Brian Egland criação de ovinos. Agradecemos também Brent Selinger (Departamento de Ciências Biológicas da Universidade de Lethbridge) para fornecimento de equipamentos de vídeo e conselhos, bem como outras formas de assistência (ou seja, produção executiva), e do Curriculum Development Re-Centre, Universidade de Lethbridge para perícia videografia. Este estudo foi apoiado em parte por concessões do Foods Avançado e Rede de Materiais (GDI), o Canadá, Alberta Beef Fundo de Desenvolvimento da Indústria (GDI), e Agricultura e Agri-Food Canada (GDI e JPK).

Procedimento experimental: <ol><li> Todos os instrumentos são autoclavados; não autoclaváveis ​​materiais são esterilizados em solução Germex esterilização a frio para um mínimo de 10 min. </li><li> Ovelhas são pré-medicados com acepromazina (0,05 mg / kg), glicopirrolato (0,005 mg / kg) e tartarato de butorfanol (0,2 mg / kg) IM, e partiu para 15-20 min. </li><li> O pescoço é raspado ea pele cirurgicamente limpo. Uma vez que a veia jugular é visualizada, 0,1 ml de lidocaína é injetado SC sobre a veia, o cateter é introduzido na veia e garantiu à pele com gado de cimento tag de identificação e 2 tape hospital &quot;. Durante a cirurgia, os animais são dadas 10 ml / kg / h de Plasmalyte 148 (por fluxo de gravidade). </li><li> Diazepam (0,2 mg / kg) é administrado IV, ea anestesia é induzida com tiopental sódico (10 mg / kg). Spray de lidocaína endotraqueal é aplicado para as pregas vocais, a ovelha é intubado e mantido em isoflurano (1,5-2,5% em 100% O 2 a uma taxa de 4 L / min) para a duração da cirurgia. </li><li> O animal é colocado em decúbito dorsal sobre uma esteira aquecida para ajudar a manter a temperatura do corpo durante a cirurgia. Um tubo é inserido no estômago no rúmen para evitar timpanismo excessiva. </li><li> O abdômen ventral é raspado ea pele está preparada para a cirurgia com três Prepodyne esfrega cirúrgico. O abdômen é então coberto, assegurando que a exposição adequada do sítio cirúrgico (umbigo para abdômen caudal) é mantida. </li><li> A incisão mediana 15-20 cm é feita usando uma electroscapel, caudalmente a partir do umbigo, e as vezes ileocecal está localizado no quadrante inferior direito do abdômen. O íleo e ceco caudal são, então, exteriorizado. Durante todo o processo, a manipulação do intestino é minimizado e cuidado é tomado para garantir o intestino exteriorizado é mantido úmido com água morna (37-39 ° C) fosfato estéril salina tamponada (PBS, pH 7,2). </li><li> Um segmento de 85 cm do íleo (ou seja, o &quot;segmento intestinal &#39;) é medido e, em seguida, preso com uma pinça Doyen (grampos intestinal) e pinças grandes Kelly em cada extremidade do segmento. Dentro do segmento intestinal, &#39;loops&#39; e &#39;vãos&#39; entre os loops serão estabelecidos. Doyen pinça são colocados do lado do íleo a serem unidas (anastomose), e as pinças Kelly são colocados do lado do segmento intestinal do íleo. </li><li> O íleo é cortado entre cada Doyen e pinça Kelly eo segmento intestinal designado para loops é gentilmente lavada duas vezes com 60 ml de PBS morna para remover ingesta. </li><li> Um coquetel de antibióticos de largo espectro (enrofloxacina 200 mg e 250 mg de metronidazol em PBS morna, 60 ml de volume total) é distribuída em todo o segmento intestinal e para a esquerda por 30 min. </li><li> As extremidades cortadas proximal e distal do íleo (excluindo o segmento intestinal) são unidos para formar uma área contínua e funcional intestinal. Primeiro, o íleo está alinhado por duas suturas estadia, colocados nas fronteiras mesentérica e antimesentérica do intestino, respectivamente. Então, um padrão de sutura simples contínua (2-0 Vicryl) é preenchido em ambos os lados do intestino para se juntar ao intestino juntos. </li><li> PBS quente (3-5 ml) é injetado no local da anastomose para verificar se há vazamentos e falhas de sutura. Então, a ponta da pinça Kelly é pressionado contra a superfície serosa do intestino, perto do local do local da anastomose, e para dentro avançados no local da anastomose para garantir o lúmen intestinal é grande e patentes. </li><li> O coquetel de antibióticos é removido do segmento intestinal. Cada extremidade do segmento é fechada com um padrão de sutura contínua simples (fio absorvível; 2-0 Vicryl), seguido por um padrão de sutura Vicryl 2-0 invertendo usando. </li><li> O segmento de 85 cm de comprimento intestinal é dividido em três 15 cm &#39;loops&#39;, dois de 15 cm de comprimento &quot;vãos&quot; entre os loops, e dois de 5 cm de comprimento blunt-end compartimentos no términos do segmento intestinal (Figura 1) . Os laços são criados, colocando uma ligadura ao redor do intestino utilizando 2-0 seda. Vale ressaltar que grandes vasos mesentéricos não são ligados durante este procedimento, uma vez que estes são necessários para suprir o intestino com sangue, mantendo a viabilidade intestinal. Além disso, as ligaduras são deixados muito tempo, como eles serão utilizados para garantir a cateteres. </li><li> Cateteres (ou seja, tubulação silastic) são identificados individualmente através de um marcador permanente. Uma bola de silício (5 mm de diâmetro) circundando o cateter, é colocado 4-5 cm a partir do final de cateter para ajudar a prevenir o cateter de deslizar para fora do intestino (Figura 1). Após a esterilização em autoclave, uma pomada não-antibiótico (Orbeseal) é assepticamente inserido na extremidade do cateter (3-5 mm), o que garante que o cateter permanece patente (ou seja, não tornar-se conectado por mucosa sloughed dentro do loop). </li><li> Uma pequena incisão é colocada no aspecto cranial de cada um dos três loops. Cada buraco é ampliada com introdutor de cateter (&#39;dilatador navio&#39;, por exemplo), e um segmento 6-8 centímetros de cateter é inserido caudalmente emo loop, até que a bola passa silcone no lúmen (Figura 1). </li><li> A parede intestinal é garantido ao redor do cateter com uma sutura em bolsa (2-0 Vicryl). O cateter é mais seguro para o intestino, amarrando o cateter com a ligadura de seda que delineava a extremidade cranial do loop. </li><li> Ampicilina (5 ml, 100 mg / ml em PBS quente) é injetado em cada ciclo e interespaço, eo intestino é colocado de volta na cavidade abdominal. Cefazolina (8 ml, 100 mg / ml em PBS quente) é injetado na cavidade peritoneal através da incisão abdominal. </li><li> Uma única incisão pequena é feita através da parede abdominal adjacente à incisão mediana, e os cateteres são exteriorizados através deste site. </li><li> A posição ea tensão dos cateteres é ajustado dentro da cavidade peritoneal. Músculos abdominais são fechadas com um padrão de sutura interrompido simples (fio absorvível; Catgut # 3), ea pele é fechada com um padrão horizontal interrompido colchão (sutura não absorvível; Supramid # 1). </li><li> Um tubo de aço inoxidável curvadas oca (7 mm de diâmetro, 10 mm de diâmetro externo, 65 cm de comprimento) é inserido sob a pele perto da incisão abdominal, túneis sob a pele para um local de saída apenas caudal para o pescoço e entre os ombros. Os cateteres são inseridos no tubo e empurrada para a frente por pelo menos 50% do comprimento do tubo. O tubo com os cateteres é então retirado da pele no local da saída, expondo os cateteres. </li><li> A tensão dos cateteres é ajustada no local incisão, ea pele é fechada com Supramid # 1. </li><li> Cateteres individuais são identificadas e colocadas dentro de uma &quot;bolsa&quot; bandage que é suturada à pele com Supramid # 1. A bolsa protege os cateteres de danos subseqüentes. </li><li> Pós-operatório, as ovelhas são injetadas IM com flunixin (sid) com uma dose inicial 2,2 mg / kg, seguido por uma dose de manutenção de 1,1 mg / kg sid durante 3 dias. Ovelhas também são injetados IM com Hemostam (3 ml) e enrofloxacina (2,5 mg / kg) SID para 3 e 5 dias, respectivamente. Os animais são mantidos em Plasmalyte intravenosa 148 com solução de dextrose 5%, administrado continuamente com uma bomba peristáltica para garantir que o fluxo (145 ml / hr) continua, independentemente da posição do corpo. Eles são autorizados a beber ad libitum, mas alimentação é restrita até normal do rúmen e funções do intestino são restauradas. Ingestão de alimentos, o consumo de água, temperatura corporal, a passagem de fezes e urina, ruídos intestinais, desconforto abdominal, comportamento, e as concentrações de glicose no sangue são monitorados de perto (bid), quando necessário, as concentrações de glicose nos fluidos intravenosos são ajustados para manter as concentrações de glicose no sangue dentro da faixa normal. Química do sangue e hematologia (ou seja, fosfatase alcalina albumina, alanina aminotransferase, amilase, colesterol, cálcio, creatinina, glicose, fosfato inorgânico, bilirrubina total, proteínas totais, uréia, globulina, sódio, potássio, cloreto, pressão parcial de oxigênio, pH, parcial dióxido de carbono pressão, bicarbonato e dióxido de carbono total, contagem de células vermelhas e brancas do sangue, hematócrito, hemoglobina, contagem diferencial de glóbulos brancos e contagem de plaquetas) são monitorados antes e imediatamente após a cirurgia, e todos os outros dias depois. Uma vez que a função intestinal normal começa, fluidoterapia intravenosa é encerrada e os animais são transferidos para piquetes (ie 5-7 dias pós-cirurgia). Os animais são mantidos em baias individuais (dentro da vista de outros animais), reduzindo o estresse e as chances de sofrer danos à sua malotes cateter (por exemplo, mastigar por um penmate). </li><li> Para injetar tratamentos em loops individual, 5 ml do tratamento é injetado no cateter, utilizando uma seringa estéril equipado com um calibre 18, ponta e agulha. Para garantir a deposição de todos os tratamento para o loop, o cateter é então injectado com 3 ml de PBS. </li></ol> Pontos críticos: Procedimentos de importância crucial para o sucesso deste procedimento cirúrgico incluem: (1) verificar se o intestino não está torcido sobre si mesmo antes de estabelecer a anastomose, (2) garantir a integridade e permeabilidade da anastomose; (3) proteger adequadamente o cateter a parede loop com a ligadura delinear a extremidade cranial do loop, mas garantindo que o anexo não afeta a permeabilidade do cateter; (4) minimizando o manuseio intestinal e garantir que intestino exteriorizado é mantida úmida; (5) assegurar o adequado dos cateteres tensão; (6) assegurar que a integridade do cateter não é afetada durante a sutura do músculo e pele; (7) impedindo gorging pelos ovinos pós-cirurgia (ou seja, durante o período de íleo pós-operatório), que pode causar impactação ruminal e comprometimento da rúmen função; e (8) assegurar que os animais recebem terapia intravenosa de líquidos suficientes para os primeiros 3-5 dias pós-operatório, que as concentrações de glicose no sangue são cuidadosamente monitoradas, e as concentrações de glicose nos fluidos intravenosos são regulávelted se necessário, para prevenir a hipoglicemia. <img src="/files/ftp_upload/1301/1301fig1.jpg" alt="figura 1" /> Figura 1. A representação esquemática da cateterizada loops ileal. Observe a três 15 cm de comprimento cateterizada &#39;loops&#39;, os dois 15 centímetros de comprimento não-cateterizada &quot;vãos&quot; estabelecida entre os loops, e os dois segmentos de 5 cm de comprimento terminal, todas as estabelecidas dentro de um segmento de 85 cm de comprimento &#39;intestinal &quot;de um íleo ovelhas.

<ol><li>Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Clostridium+perfringens+beta-toxin+on+the+rabbit+small+intestine+and+colon%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon.</a> Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).</li>
<li>Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+and+molecular+characterization+of+Salmonella+typhimurium+infection+in+neonatal+calves%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves.</a> Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).</li>
<li>Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonella+enterica+serovar-host+specificity+does+not+correlate+with+the+magnitude+of+intestinal+invasion+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep.</a> Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).</li>
<li>Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+intestinal+%27loops%27+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol.+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).</li>
<li>Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+the+growth+and+differentiation+of+b+cells+isolated+from+follicles+from+ileal+Peyer%27s+patch+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer's patch of sheep.</a> Immunology. 75, 601-607 (1992).</li>
<li>Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agents+that+activate+protein+kinase+C+resue+sheep+ileal+Peyer%27s+patch+B+cells+from+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer's patch B cells from apoptosis.</a> Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).</li>
</ol>

Todos os procedimentos em animais experimentais foram aprovados pelo Comitê Institucional Animal Care (Protocolo de Uso de Animais # 0609) e seguiu as diretrizes estabelecidas pelo Conselho Canadense de Cuidados Animal. Não temos nada para revelar.

Neste procedimento, fomos capazes de estabelecer com êxito cateteres em alças intestinais estabelecido na íleo dos ovinos. Ao aderir a cuidados pós-operatórios rigorosos, os animais rapidamente recuperado do procedimento e retomou as atividades normais dia 07/05 após a cirurgia. Determinou-se que o estabelecimento de cateteres dentro de loops não afeta a função da mucosa intestinal ou imunes (dados não mostrados) e animais podem viver por pelo menos 8 semanas após a cirurgia. Este procedimento permite-nos apresentar vár...

<table border="1"><tr><td> Categoria / Número de </td><td> Companhia </td><td> Catálogo </td></tr><tr><td colspan="3"> Suprimentos cirurgião </td></tr><tr><td> Luvas cirúrgicas </td><td> WDDC um </td><td> 103091 </td></tr><tr><td> Máscara cirúrgica </td><td> WDDC </td><td> MAX53013 </td></tr><tr><td> Bata cirúrgica </td><td> B CDMV </td><td> 3365 </td></tr><tr><td> Avental OB </td><td> WDDC </td><td> 900062 </td></tr><tr><td> Touca cirúrgica </td><td> WDDC </td><td> 903271 </td></tr><tr><td> EZ escova </td><td> WDDC </td><td> BDC377479 </td></tr><tr><td colspan="3"> Anestesia e drogas </td></tr><tr><td> Máquina de anestesia </td><td> Boyle </td><td> </td></tr><tr><td> Sodasorb </td><td> WDDC </td><td> 108638 </td></tr><tr><td> Laringoscópio </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td> Lâmina de laringoscópio (Miller blade # 4) </td><td> WDDC </td><td> 902667 </td></tr><tr><td> Tubo endotraqueal (7,0-8,5 mm) </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td> Spray de lidocaína endotraqueal </td><td> WDDC </td><td> 103364 </td></tr><tr><td> Acepromazina </td><td> WDDC </td><td> AUS01020 </td></tr><tr><td> Glicopirrolato </td><td> WDDC </td><td> SAB2880 </td></tr><tr><td> Tartarato de butorfanol </td><td> WDDC </td><td> AYE304541 </td></tr><tr><td> Diazepam </td><td> WDDC </td><td> sab790 </td></tr><tr><td> Tiopental sódico </td><td> WDDC </td><td> 103508 </td></tr><tr><td> Cloridrato de epinefrina </td><td> WDDC </td><td> 103856 </td></tr><tr><td> Doxapram </td><td> Strathcona Farmácia </td><td> </td></tr><tr><td> Isoflurano </td><td> WDDC </td><td> 100339 </td></tr><tr><td> Hemostam </td><td> WDDC </td><td> 103857 </td></tr><tr><td> Flunixin </td><td> WDDC </td><td> sch140100 </td></tr><tr><td> Enrofloxacina </td><td> WDDC </td><td> hll0049 </td></tr><tr><td> Metronidazol </td><td> WDDC </td><td> 101653 </td></tr><tr><td> Ampicilina </td><td> WDDC </td><td> NOV67185-6 </td></tr><tr><td> Cefazolina </td><td> WDDC </td><td> nov69397 </td></tr><tr><td colspan="3"> Equipamentos cirúrgicos e suprimentos </td></tr><tr><td> Electroscapel </td><td> Macan </td><td> MV8 </td></tr><tr><td> Esteira de aquecimento </td><td> Kane </td><td> PHMD-48 </td></tr><tr><td> Estômago tubo (Nalgene tubos 5 / 16 &quot;ID) </td><td> Fisher Scientific </td><td> </td></tr><tr><td> Motorista agulha </td><td> WDDC </td><td> 108338 </td></tr><tr><td> Addison marrom fórceps </td><td> WDDC </td><td> 911075 </td></tr><tr><td> Rat dente fórceps </td><td> CDMV </td><td> 5275 </td></tr><tr><td> Kelly fórceps </td><td> WDDC </td><td> 901133 </td></tr><tr><td> Hemostat Mosquito </td><td> WDDC </td><td> 108471 </td></tr><tr><td> Carmalt fórceps </td><td> WDDC </td><td> 901225 </td></tr><tr><td> Lidar com bisturi </td><td> WDDC </td><td> 900285 </td></tr><tr><td> Lâmina de bisturi # 22 </td><td> WDDC </td><td> 900511 </td></tr><tr><td> Tesoura Metzenbaum </td><td> WDDC </td><td> 901166 </td></tr><tr><td> Sharp-tesoura afiada </td><td> WDDC </td><td> 108264 </td></tr><tr><td> Clamp toalha </td><td> WDDC </td><td> 901213 </td></tr><tr><td> Allis tecido fórceps </td><td> WDDC </td><td> 901201 </td></tr><tr><td> Pinça de Doyen </td><td> WDDC </td><td> 904226 </td></tr><tr><td> Tigela de aço inoxidável </td><td> WDDC </td><td> 903601 </td></tr><tr><td> Aço inoxidável trocarte (curva) </td><td> Fornecedor local </td><td> </td></tr><tr><td> Introdutor de cateter </td><td> WDDC </td><td> 11440 </td></tr><tr><td> Toalha cirúrgica </td><td> CDMV </td><td> 7972 </td></tr><tr><td> Drape descartáveis </td><td> WDDC </td><td> 900035 </td></tr><tr><td> Drape Steri </td><td> CDMV </td><td> 2323 </td></tr><tr><td> Drape (40 x 40 cm) </td><td> CDMV </td><td> 8358 </td></tr><tr><td> Drape cirúrgica (7 &quot;x 11&quot; de abertura) </td><td> CDMV </td><td> 2694 </td></tr><tr><td> Vicryl (2-0) </td><td> WDDC </td><td> JJMJ333H </td></tr><tr><td> De seda 2-0 </td><td> WDDC </td><td> 105248 </td></tr><tr><td> Catgut # 3 </td><td> WDDC </td><td> CSL547-2070 </td></tr><tr><td> Supramid # 1 </td><td> WDDC </td><td> CSL547-3040 </td></tr><tr><td> Agulhas (corte e não de corte) </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td colspan="3"> Cateter </td></tr><tr><td> Tubo de silastic (0,040 &quot;ID, 0,085&quot; OD) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 11-189-15D </td></tr><tr><td> Pomada Orbeseal </td><td> WDDC </td><td> 106344 </td></tr><tr><td> Silicone transparente (732 selante multiuso) </td><td> Fornecedor local </td><td> </td></tr><tr><td> Agulha final Blunt </td><td> WDDC </td><td> 905035 </td></tr><tr><td> Marcador (industrial permanente) </td><td> Fornecedor local </td><td> </td></tr><tr><td> Bolsa de cateter (construída de elastoplásticos 7,5 cm) </td><td> WDDC </td><td> 104094 </td></tr><tr><td colspan="3"> Bandagens </td></tr><tr><td> Hospital de fita (2 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> 103842 </td></tr><tr><td> Hospital de fita (1 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> VLMRENF20 </td></tr><tr><td> Esponja de gaze 4x4 </td><td> WDDC </td><td> 107551 </td></tr><tr><td> Gaze se agarram </td><td> WDDC </td><td> 107633 </td></tr><tr><td> Elastoplásticos 7,5 centímetros </td><td> WDDC </td><td> 104094 </td></tr><tr><td> Elastoplásticos bandage rippable </td><td> WDDC </td><td> 104093 </td></tr><tr><td colspan="3"> Needles e seringas </td></tr><tr><td> Seringa (60 ml) </td><td> WDDC </td><td> 104004 </td></tr><tr><td> Seringa (10 ml) </td><td> WDDC </td><td> bdc301604 </td></tr><tr><td> Agulha 25G </td><td> WDDC </td><td> BDC305122 </td></tr><tr><td> Agulha 20G </td><td> WDDC </td><td> BDC305175 </td></tr><tr><td> Agulha 18G </td><td> WDDC </td><td> 903353 </td></tr><tr><td colspan="3"> Intravenoso </td></tr><tr><td> Intracath cateter IV (16G 8 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> bdc3831621 </td></tr><tr><td> IV administração set (10 drop) </td><td> WDDC </td><td> 101797 </td></tr><tr><td> 0,9% NaCl </td><td> WDDC </td><td> BAXJB1322P </td></tr><tr><td> Solução Plasmalyte 148 </td><td> WDDC </td><td> BAXJB2534 </td></tr><tr><td> Dextrose </td><td> WDDC </td><td> MCT60190 </td></tr><tr><td> Bomba peristáltica </td><td> Cole Parmer </td><td> 7524-10 </td></tr><tr><td> Pecuária de cimento etiqueta de identificação </td><td> Fornecedor local </td><td> </td></tr><tr><td colspan="3"> Sanatizers / desinfectantes </td></tr><tr><td> Germex solução </td><td> WDDC </td><td> mtc60270 </td></tr><tr><td> Álcool isopropílico </td><td> WDDC </td><td> 104590 </td></tr><tr><td> Limpador Stanhexidine </td><td> WDDC </td><td> 109248 </td></tr><tr><td> Solução Prepodyne </td><td> WDDC </td><td> 105710 </td></tr><tr><td> Matagal Prepodyne </td><td> WDDC </td><td> 105711 </td></tr></table> um faroeste Drogas Centro de Distribuição LTD, Edmonton, AB. b O Centro de Distribuição Medicamentos Veterinários Inc., St. Hyacinthe, QE.

cateterização de alças intestinais em ruminantes

Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants

O intestino é uma estrutura complexa que está envolvido não somente na absorção de nutrientes, mas também atua como uma barreira entre o indivíduo eo mundo exterior. Como tal, o intestino tem um papel fundamental na vigilância imunológica e proteção contra patógenos entéricos. Investigação da fisiologia intestinal e imunologia comumente emprega &quot;alças intestinais&quot; como um modelo experimental. A maioria destes modelos de alça são não-recuperação de procedimentos cirúrgicos que estudo de curta duração (&lt;24 h) alterações no intestino (1-3). Nós anteriormente criou um modelo de recuperação alça intestinal especificamente para medida de longo prazo (&lt;6 meses) alterações imunológicas no intestino de ovelha exposição segue para vacinas, adjuvantes, e vírus (4). Este procedimento tratamentos localizados a um &#39;loop&#39; específicas, permitindo-nos a amostra esta área do intestino. Uma desvantagem significativa deste método é a única janela de oportunidade para administrar tratamentos (ou seja, no momento da cirurgia). Além disso, amostras de ambos os mucosa intestinal e conteúdo luminal só pode ser tomada ao término do projeto. Outras limitações importantes do modelo acima são de que a manipulação cirúrgica e pós-operatórios necessários medidas (por exemplo, administração de antibióticos e analgésicos) pode afetar diretamente o tratamento em si e / ou alterar a função imunológica, assim, resultados de confusão. Portanto, nós modificamos o nosso modelo de alça intestinal através da inserção de cateteres de longo prazo para a loops. Ovelhas recuperar totalmente do procedimento, e não são afetados pela cateteres exteriorizados. Nomeadamente, o estabelecimento de cateteres em loops nos permite introduzir múltiplos tratamentos durante um intervalo prolongado, após a recuperação da cirurgia e depuração de fármacos administrados durante a cirurgia e no período pós-operatório.

Descrevemos um novo método cirúrgico para cateterizar &quot;alças intestinais&quot; dentro do íleo de ovelhas. Uma vez que os animais têm recuperado de uma cirurgia e que tenha limpado antibióticos e analgésicos, múltiplos tratamentos podem ser depositados diretamente em loops através dos cateteres.

Cateterização de alças intestinais em Ruminantes

O intestino é uma estrutura complexa que está envolvida não apenas na absorção de nutrientes, mas também atua como uma barreira entre o indivíduo e o...

O intestino é uma estrutura complexa que participa não apenas da absorção de nutrientes, mas também atua como uma barreira entre o indivíduo e o mundo exterior. Assim sendo, o intestino desempenha um papel fundamental na imunovigilância e na proteção contra patógenos entéricos. A investigação da fisiologia e imunologia intestinais emprega comumente os alças intestinais como modelo experimental.Muitos desses modelos de alça são procedimentos cirúrgicos não recuprativos que estudam alterações de curto prazo no intestino. Anteriormente, criamos um modelo de alça intestinal recuprativo para medir especificamente alterações imunológicas de longo prazo no intestino de ovinos após exposição a vacinas, adjuvantes e vírus. Uma desvantagem significativa desse método é a existência de uma única janela de oportunidade para administrar agentes à alça no momento da cirurgia.Da mesma forma, amostras tanto da mucosa intestinal quanto do conteúdo intestinal só podem ser coletadas no momento da determinação do projeto. Modificamos, portanto, nosso modelo intestinal inserindo cateteres de longa duração no intestino. Esses são instrumentos utilizados em cirurgias intestinais, pinças DO'S, também conhecidas como intestinais.As pinças são instrumentos importantes que garantem que o intestino não seja lesionado durante a cirurgia. Os cateteres no experimento são marcados com traços pretos usando uma caneta permanente e, em seguida, são esterilizados. Pomada orbital é inserida dentro da extremidade de cada cateter ou manjericão é uma pomada de barreira sem antibióticos.O campo estéril adesivo é cortado com a lâmina de bisturi. A pele e o músculo são seccionados com eletrocautério, se necessário. Uma lâmina de bisturi cirúrgico poderia ser usada para o mesmo procedimento; no entanto, o sangramento tecidual torna-se mais acentuado.Uma incisão única com uma lâmina de bisturi forma um pequeno orifício que permite que a tesoura Metzenbaum abra o peritônio. O ceco está localizado no quadrante inferior direito do abdômen e é usado como referência anatômica. O jejuno está situado cranialmente ao ceco, e tanto o íleo quanto o ceco são destacados aqui.O seio é então colocado de volta no abdômen. Um pedaço pré-cortado de sutura de seda é usado para medir o comprimento do segmento intestinal no qual serão estabelecidos laços de 15 centímetros de comprimento nesta cirurgia. O segmento intestinal consiste em aproximadamente 85 centímetros de íleo.As extremidades do segmento intestinal são presas com pinças doin no lado não loop e com pinças Kelley grandes no lado do loop do íleo. O íleo é então cortado entre as pinças. Isso é repetido no outro lado.O segmento intestinal é lavado duas vezes com 60 mililitros de solução salina estéril. Em seguida, introduz-se no segmento intestinal 60 mililitros de uma solução de antibiótico de amplo espectro, distribuída de maneira tão uniforme quanto possível ao longo de todo o comprimento do segmento, e mantida por 30 minutos. As extremidades incisas do íleo são unidas em uma anastomose com dois pontos de sustentação.Pontos alinharam as extremidades do íleo e um padrão de sutura contínua simples. Usando um fio absorvível Vicryl dois zero, conecte o lado lateral do intestino ao outro. Em seguida, o íleo é virado e a sutura é repetida no outro lado.Injeta-se cinco mililitros de soro fisiológico estéril no local da anastomose para verificar vazamentos. Aqui, as pontas dos alicates de agulha são suavemente introduzidas no íleo no local da anastomose para garantir que a luz esteja ampla e pérvia. A solução antibiótica de amplo espectro é cuidadosamente removida do segmento intestinal.As extremidades rombas do segmento intestinal são seladas com um fechamento em duas camadas. Cada extremidade do segmento intestinal é fechada com um padrão de sutura contínua simples utilizando sutura absorvível vicryl dois zero, seguido por um padrão de sutura invertida. Os alças são formados alinhando o segmento intestinal com suturas de seda dois zero.A primeira ligadura é colocada a cinco centímetros da extremidade romba do segmento intestinal. O segmento intestinal é reavaliado para garantir que tenha comprimento suficiente para suportar todas as alças. Para criar a primeira alça.Uma ligadura com fio de seda é colocada a 15 centímetros do primeiro ponto, estabelecendo assim o loop. É importante observar que as extremidades das suturas de ligadura são deixadas longas, pois serão usadas para fixar o cateter à parede do loop. Uma pequena incisão é feita na parede de cada loop.Um dilatador descartável amarelo amplia o orifício, permitindo a introdução do cateter na luz do segmento. A bolinha de silicone no cateter ajuda a impedir que o cateter escorregue para fora do segmento. Um padrão de sutura em bolsa de papel é usado para fechar firmemente a incisão.O cateter é ainda fixado à parede do alça por meio de amarração com os pontos de ligadura utilizados anteriormente. Para delinear o alça, o cateter é bem fixado e o alça cateterizado é destacado nesta imagem. Todos os três alças cateterizados são destacados aqui. Observe que os alças apresentam-se rosados, saudáveis e viáveis, demonstrando que o fluxo sanguíneo não foi comprometido pelo procedimento cirúrgico.Novamente, os alças parecem saudáveis. Uma incisão perfurante é feita próximo à incisão abdominal original. Os cateteres são exteriorizados através da incisão e as alças cateterizadas são recolocadas na cavidade abdominal.A parede abdominal é suturada utilizando fio absorvível de tripa número três em padrão simples interrompido. A pele é fechada com um padrão de sutura interrompida em mataças horizontais utilizando fio de náilon não absorvível 2-0. Um tubo oco de aço inoxidável é usado para tunelizar cateteres sob a pele.O tubo é inserido próximo à incisão abdominal e passa sob a pele, saindo pela pele perto da base do pescoço e entre os ombros. Esse local de saída é necessário para proteger os cateteres de danos subsequentes. Os cateteres são inseridos no tubo e empurrados para frente por pelo menos 50% do comprimento do tubo.O tubo com os cateteres é então puxado para fora da pele no local de saída. A incisão na pele é fechada com sutura de náilon dois zero não absorvível. Os cateteres são rotulados e colocados em uma bolsa até serem necessários.Esta imagem mostra uma ovelha cinco dias após a cirurgia e o animal apresenta-se ativo, alerta e responsivo, tendo retomado sua dieta normal. Neste procedimento, foi possível introduzir cateteres de longa duração em alças intestinais estabelecidas no íleo de ovelhas. Isso permite medir alterações fisiológicas e imunológicas após diversos tratamentos dentro desses compartimentos intestinais distintos.As características principais deste procedimento cirúrgico são o estabelecimento de um segmento intestinal dentro do íleo, remoção deste do segmento intestinal por lavagem com solução salina estéril, introdução de antibióticos de amplo espectro no segmento intestinal, anastomose do íleo, remoção dos antibióticos do segmento intestinal, fechamento rombo do segmento intestinal, estabelecimento de alças terminais dentro do segmento intestinal, inserção de cateter nas alças e estabilização dos cateteres dentro das alças e na parte externa do cateter. Este desenho mostra uma representação esquemática do procedimento de alça intestinal cateterizada descrito neste vídeo. Observe as três alças cateterizadas com 15 centímetros de comprimento, os dois espaços intercalares não cateterizados com 15 centímetros de comprimento estabelecidos entre as alças e os dois segmentos terminais de cinco centímetros, todos estabelecidos dentro de um segmento intestinal de 85 centímetros de comprimento do íleo de ovelha.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

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