Name: Wolbachia em Drosophila infecção bacteriana (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Aprenda a isolar e injetar Wolbachia em Drosophila usando dispositivo de filtração e microinjeção. Este protocolo simples permite estudar a transmissão bacteriana e a infecção em moscas.

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Os autores não têm nada a declarar.

wolbachia em drosophila infecção bacteriana

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia em Drosophila infecção bacteriana

Meu nome é Voia Friedman. Sou pesquisadora associada na Universidade de Princeton. E hoje vou contar a vocês sobre alguns protocolos que desenvolvi para transinfectar, inicialmente para isolar, para retornar do héli de moscas infectadas e, posteriormente, ajudar a injetar o alimento contendo o héli em moscas não afetadas.Então, basicamente, este é um protocolo muito simples para isolar hemolinfa para análises básicas. Você usará este dispositivo da mepo, que contém um filtro que se coloca sobre um E. Basicamente, você precisa colocar, começando de cerca de cem moscas. Você anestesia as moscas, coloca-as no dispositivo com filtro, pode-se usar simplesmente um funil, o que facilitará muito a adição delas a este dispositivo, e depois as lava com etanol 70%.Você simplesmente retira, retira o futuro, pode descartar o etanol e, após a terceira lavagem, realiza a lavagem final com água molecular, pois não deseja que haja bactérias com traços de etanol. Bem, e então você simplesmente transfere para um novo tubo e, em seguida, centrifuga em um microcentrífugo, um micro real, por dois minutos. Depois disso, você pode injetar. Ele só alimenta moscas não afetadas.Então, basicamente, pegue uma

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Biologia

Parasitóide (parasita) vespas constituem uma classe importante de inimigos naturais de insetos, incluindo...

Uma Introdução à Vespas parasitas de<em&gt; Drosophila</em&gt; E Resposta Imune a antiparasitários

Fonte: Siva-Jothy, J. A., et al. Infecção Bacteriana Oral e Eliminação em Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)O vídeo demonstra a infecção oral de Drosophila melanogaster com bactérias patogênicas. Inclui a preparação de frascos de infecção e a transferência de moscas famintas para possibilitar a ingestão bacteriana. O procedimento captura a colonização intestinal, seguida pela esterilização superficial e homogeneização das moscas. Por fim, mostra a quantificação da carga bacteriana...

Infecção Oral de Drosophila melanogaster com Bactérias Patogênicas

Fonte: Hiroyasu, A., D et al., Extração de Hemocitos de Larvas de Drosophila melanogaster para Infecção e Análise Microbiana. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o procedimento para estabelecer uma infecção bacteriana em larvas de Drosophila , colocando-as em uma gota bacteriana e furando-as com uma agulha de tungstênio. As larvas são então incubadas em uma placa de ágar sulcada e rica em nutrientes para estudar as interações hospedeiro-patógeno.

Estabelecimento de infecção bacteriana em larvas de Drosophila

Drosophila melanogaster é um excelente organismo modelo para estudar o sistema imunológico inato e as consequências fisiológicas de infecções e doenças. Este protocolo descreve como fornecer infecções bacterianas robustas e quantitativamente repetíveis a D. melanogaster e como medir subsequentemente a gravidade da infecção e quantificar a resposta imune do hospedeiro.

Infecção bacteriana sistêmica e Imune Defesa Phenotypes em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Um método para a criação de Drosophila melanogaster sob condições axénicas e gnotobióticos é apresentada. embriões voam são dechorionated em hipoclorito de sódio, transferidos assepticamente à dieta estéril, e criados em recipientes fechados. Inoculando dieta e embriões com bactérias leva a associações gnotobióticos e presença de bactérias é confirmada por plaqueamento de corpo inteiro de Drosophila homogeneizados.

Elevando a mosca da fruta<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Sob axênicas e gnotobióticos Condições

Os mosquitos Aedes aegypti infectados com Wolbachia estão sendo liberados em populações naturais para suprimir a transmissão de arbovírus. Descrevemos métodos para traseira Ae. aegypti com Wolbachia infecções no laboratório para experiências e lançamento de campo, tomando as precauções para minimizar a seleção e adaptação de laboratório.

Manter o Aedes aegypti , mosquitos infectados com Wolbachia

Este protocolo descreve métodos para oralmente expor e infectar a mosca de fruta Drosophila melanogaster com patógenos bacterianos e para medir o número de bactérias infecciosas galpão após infecção do intestino. Ainda mais, descrevemos o efeito de mutantes imunes na mosca sobrevivência após infecção bacteriana oral.

Infecção bacteriana e oral Shedding em Drosophila melanogaster.

Este protocolo descreve como estabelecer infecção viral na vivo em Drosophila melanogaster , usando o método de nano-injeção e técnicas básicas para analisar a interação vírus-hospedeiro.

Estabelecimento de infecção Viral e análise da interação vírus-hospedeiro em Drosophila Melanogaster.

As moscas adultas de Drosophila melanogaster têm sido amplamente utilizadas como organismos modelo para investigar os mecanismos moleculares subjacentes às respostas imunes inatas antimicrobianas e estratégias de infecção microbiana. Para promover o estágio da larva D. melanogaster como um sistema modelo adicional ou alternativo, uma técnica de injeção larval é descrita.

Melanogaster drosophila Protocolo de injeção de larvas

Quatro métodos foram usados para detectar wolbachia intracelular, que se complementou e melhorou a precisão de detecção da infecção wolbachia da Aa23 e Aa23-T derivadas de Aa23 e Aa23-T curadas da infecção nativa wolbachia usando antibióticos.

Detectando wolbachia strain wAlbb em linhas celulares Aedes albopictus

As linhagens celulares são úteis em estudos sobre organismos intracelulares que não podem ser cultivados fora de suas células hospedeiras. Embora as linhagens infectadas com Wolbachia tenham permitido muitas descobertas, a heterogeneidade dentro dessas linhagens pode levar a resultados experimentais variáveis. Apresentamos um protocolo para geração de clones unicelulares e culturas contínuas a partir de células JW18 infectadas com Wolbachia.

Geração de Culturas Monoclonais a partir de Wolbachia-infectada com Drosophila melanogaster JW18

Aprenda a isolar e injetar Wolbachia em Drosophila usando dispositivo de filtração e microinjeção. Este protocolo simples permite estudar a transmissão bacteriana e a infecção em moscas.

Wolbachia em Drosophila infecção bacteriana

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