Name: Traqueotomia: Um Método para Transplante de Células-Tronco para o pulmão (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 45 s
Description: Aprenda o método de traqueotomia para transplante de células-tronco no pulmão, permitindo acesso seguro ao lobo esquerdo. Esta técnica melhora a entrega eficiente de tecidos em terapias celulares.

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<p class="jove_step"> Pré-operatório </p><ol><li> Rato destinatário e células do doador </li><li> Plataforma operacional com rosca de fita e sutura </li><li> Seringa 1cc </li><li> Agulha de 23G </li><li> Anestésico: Avertin 25 mg / ml (alternativamente quetamina 9 mg / ml e xilazina 1 mg / ml) </li><li> Máquina de cortar cabelo com lâmina # 40 </li><li> Luvas estéreis </li><li> Compressas com álcool </li><li> Iodo </li><li> Esterilizados instrumentos cirúrgicos </li><li> Fio de sutura </li><li> Cateter 22G </li><li> 200 ul pipeta (estéril) </li><li> Ponteiras esterilizadas </li><li> Pomada antibiótica cola </li><li> Sharpie container </li></ol><p class="jove_step"> Operativo </p><p> <span class="jove_content">Técnicas assépticas são utilizados em todo este procedimento.</span> </p><ol><li> Pesar mouse. </li><li> Injeção intraperitoneal de anestésicos (250 mg / kg Avertin ou, alternativamente, ketamina 90 mg / kg e xilazina 10 mg / kg) em doses suficientes para permitir a respiração espontânea, mas fornecem concentração-cirúrgico de anestesia. Para a cirurgia para começar o aperto do dedo do pé foi usada como um indicador de dor profunda sem resposta do animal anestesiado. </li><li> Lay mouse com incisivos dobrada em fio de sutura e cauda de fita para estabilizar. </li><li> Cabelo clip utilizando uma lâmina # 40 clipper. </li><li> Luvas de mudança (continuar com luvas estéreis). </li><li> Desinfectar com álcool duas vezes antes de incisão na pele. </li><li> Esterilizar área com um iodophore. </li><li> Utilizando instrumentos esterilizados fazer uma pequena incisão (&lt;1 cm) paralela à traquéia. </li><li> Cuidadosamente separado do tecido de cartilagem. </li><li> Um empate é inserido debaixo da traquéia. </li><li> Suavemente para cima e levantar tie inserir a agulha em traquéia exposta. </li><li> Remova a agulha e introduza o tubo suavemente, mas rapidamente, até sentir uma ligeira resistência. </li><li> Células pipeta (até 50 microlitros volume) diretamente no cateter. </li><li> Remover imediatamente tubo e gravata enquanto rato libertar aparato operacional. </li><li> Se for necessário segurar delicadamente o rato na vertical (vertical) pelo apego suas patas anteriores e mover-se delicadamente. </li><li> Fechar a ferida com uma sutura ou cola de antibióticos. </li></ol><p class="jove_step"> Pós-operatório </p><ol><li> Mantenha mouse quente. </li><li> Buprenorfina (0,05 mg / kg) deve ser administrado como analgesia pós-operatória a cada 12 horas durante as primeiras 24 horas após este procedimento. </li></ol><p><img src="/files/ftp_upload/old/163_2008_7_15_4/163_figure-1.png" alt="Figura 1" width="587" height="531" /></p>

<table><tbody><tr><td>Agulha 23 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 1 cc</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cateter 22 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fio de sutura</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pomada adesiva antibiótica</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anestésico</td><td></td><td></td><td>Avertin 25 mg/mL. Alternativamente, ketamina 9 mg/mL e xilazina 1 mg/mL.</td></tr></tbody></table>

traqueotomia: um método para transplante de células-tronco para o pulmão

Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung

<p class="jove_content">Doença pulmonar é a principal causa de morte e provavelmente se tornará uma epidemia dado aumentos na poluição e no mundo de fumar. Avanços na terapia de células-tronco podem aliviar muitos dos sintomas associados à doença pulmonar e induzem a reparação alveolar em adultos. Concomitante com a busca contínua de células-tronco aplicável ao tratamento humano, a entrega precisa e homing (para o local da doença) deve ser assegurado para a terapia bem sucedida. Aqui, eu relatar que as células-tronco pode seguramente ser instilado através da traquéia abrindo uma rota non-stop para o pulmão. Este método envolve uma incisão na pele, inserção caudal de uma cânula para dentro e ao longo da luz traqueal, ea injeção de uma mistura de veículos com células-tronco em vias aéreas do pulmão. Uma ampla gama de soluções de mídia e estabilizadores pode ser incutido por meio de traqueotomia, resultando na capacidade de oferecer uma ampla gama de tipos de células. Com o epitélio alveolar confinando essas células para o lúmen, expansão pulmonar e pressão negativa durante a inalação também pode ajudar na integração de células-tronco. Entrega traqueal de células-tronco, com uma absorção rápida ea habilidade de lidar com uma grande variedade de tratamentos, poderia acelerar o desenvolvimento de terapias baseadas em células, abrindo novos caminhos para o tratamento de doença pulmonar.</p>

<p class="jove_content">Avanços significativos na identificação de células-tronco estão sendo continuamente feitos. Para traduzir estas descobertas, no entanto, novos métodos para a entrega de celular devem ser concebidos. Aqui eu relato que as vias aéreas proporcionar uma rota segura para o transplante de células-tronco para os pulmões.</p>

Traqueotomia: Um Método para Transplante de Células-Tronco para o pulmão

As doenças pulmonares são uma das principais causas de morte e tendem a tornar-se uma epidemia, dado o aumento da poluição e do tabagismo em todo o mundo. Avanços em células-tronco...

<p>As técnicas assépticas são utilizadas ao longo do procedimento para prevenir contaminação microbiana.</p>

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Este vídeo mostra e compara dois modelos experimentais para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante (OAD) em camundongos, o modelo de transplante heterotópico e ortotópico traqueal.

Heterotópico e Transplante ortotópico traqueal em ratos usados ​​como modelos para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante

Aqui demonstramos nosso protocolo para isolamento de células basais e das glândulas submucosas duto de traqueias de rato. Nós também demonstram o método de injecção de células estaminais na almofada de gordura dorsal do rato para criar...

Isolamento de células basais e células Duct submucosa Glândulas de Rato Traquéia

Bronquiolite obliterante é o impedimento-chave para a sobrevivência a longo prazo de transplantados de pulmão e à falta de um modelo robusto pré-clínica impede examinar imunopatogênese bronquiolite obliterante. Ao contrário de outros transplantes de órgãos sólidos, o transplante de pulmão vascularizado do mouse tem apenas recentemente foram desenvolvidos. Aqui nós mostramos o nosso modelo de bronquiolite obliterante desenvolvida de forma independente após murino de transplante de pulmão...

Desenvolvimento de bronquiolite obliterante em um modelo murino de transplante de pulmão ortotópico

Descrevemos uma nova técnica para transplante coração-pulmão abdominal heterotópico (HAHLT) em ratos. A configuração do transplante resulta em uma circulação do enxerto parcialmente carregada, permitindo avaliação funcional direta. Esse modelo pode ser empregado para estudos agudos ou crônicos de função e estado imunológico do enxerto transplantado.

Rat heterotópico abdominal coração / pulmão Transplante Single-carregado em uma configuração-Volume

Aqui descrevemos um modelo de transplante ortotópico syngeneic minimamente invasiva de células de adenocarcinoma do pulmão como um modelo de redução de custos e tempo para estudar o câncer de pulmão não-pequenas células.

Ortotópico transplante de células de Adenocarcinoma de pulmão Syngeneic para estudar a expressão de PD-L1

Estenose de enxerto representa um obstáculo crítico em substituição de engenharia de tecidos das vias respiratórias. Para investigar os mecanismos celulares subjacentes estenose, utilizamos um modelo murino de substituição traqueal de engenharia de tecidos com células mononucleares de medula semeado (BM-MNC). Aqui, nós detalhe nosso protocolo, incluindo a fabricação de andaime, BM-MNC isolamento, enxerto semeadura e implantação.

A propagação e a implantação de um enxerto traqueal biossintética engenharia de tecido em um modelo do rato

Descrito é um protocolo para a realização de transplante intratraqueal de células estromais mesenquimais (MSCs) através de injeção intratraqueal a termo ratos neonatais. Esta técnica é uma opção clinicamente viável para a entrega de células-tronco e drogas em pulmões de ratos neonatais para avaliar sua eficácia.

Instilação intratraqueal de células-tronco em ratos neonatais de termo

Essa técnica de incutir drogas diretamente na traqueia de roedores neonatais é importante no estudo do impacto de medicamentos ou biológicos administrados localmente em doenças pulmonares neonatais. Além disso, este método também pode ser usado para induzir lesões pulmonares em modelos animais.

Um método minimamente invasivo para a instilação intratraqueal de drogas em roedores neonatais para tratar doenças pulmonares

O modelo de transplante traqueal intrapulmonar murino (TTPI) é valioso para o estudo da doença obliterativa das vias aéreas (DAO) após o transplante pulmonar. Oferece informações sobre o comportamento imunológico e angiogênico pulmão-específico na obliteração das vias aéreas após alotransplante com alta reprodutibilidade. Descrevemos aqui o procedimento do IPTT e seus resultados esperados.

Transplante de Traqueia Intrapulmonar Purino: Modelo para Investigação de Doença Obliterativa das Vias Aéreas Após Transplante Pulmonar

Este protocolo descreve uma técnica aprimorada para transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos, com foco na redução da dificuldade operacional e na melhoria das taxas de sobrevida.

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos

Aprenda o método de traqueotomia para transplante de células-tronco no pulmão, permitindo acesso seguro ao lobo esquerdo. Esta técnica melhora a entrega eficiente de tecidos em terapias celulares.

Traqueotomia: Um Método para Transplante de Células-Tronco para o pulmão

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