De alta freqüência Ecocardiografia de alta resolução: primeira evidência de não-invasivos Medida repetida de Strain miocárdico, contratilidade, e regurgitação mitral no coração Isquemia-reperfundidos murino

Este vídeo demonstra um procedimento para realizar ecocardiografia de alta frequência e alta resolução na isquemia. A isquemia de corações espelhados reperfundidos é a oclusão induzida cirurgicamente, a artéria descendente interior esquerda de um camundongo anestesiado. Após a recuperação, o mouse é posicionado em uma anestesia ECG, plataforma quente acoplada a ar.

Os filmes são adquiridos no modo B para obter análise de tensão de eixo longo e modo para imagem de tensão da função cardíaca e sincronicidade e modo doppler colorido para perfil de velocidade. Os filmes são então processados para obter curvas de deformação, sincronicidade baseada em deformação e para obter a taxa de variação da pressão do VE. Olá, sou o Dr. Chandon Sen, do Davis Heart and Lung Research Institute e do Departamento de Cirurgia do Ohio State University Medical Center.

A ecocardiografia de alta frequência e alta resolução é uma ferramenta nova e poderosa para obter dados clínicos relevantes por meio de medidas repetidas do mesmo animal. Hoje mostraremos como usar essa técnica para medir a contratilidade do strain miocárdico, bem como a regurgitação mitral no coração mure perfundido com isch. Primeiro, Jason Driggs, do meu laboratório, demonstrará procedimentos cirúrgicos para a indução de isch, perfusão do coração murino.

Em seguida, o Dr. Surya Al, um pós-doutorado em engenharia biomédica em meu laboratório, demonstrará os procedimentos de imagem. Finalmente, Dr. Thomas Ryan, diretor do Centro do Coração do Centro Médico da Universidade Estadual de Ohio. Além disso, um especialista clínico em ecocardiografia eletrônica fará as observações finais.

Então vamos começar. Comece este procedimento colocando um macho C 57 preto de oito semanas anestesiado em uma mesa cirúrgica aquecida. A temperatura corporal do animal deve ser monitorada com uma sonda térmica retal e deve ser mantida em 36,7 graus Celsius para mais ou para menos durante toda a cirurgia.

Desinfete a pele com um desinfetante seguido de álcool e repetido três vezes cada intubação, fazendo uma incisão medial de 0,7 centímetro sobre a traqueia. Visualize a traqueia dissecando sem rodeios as glândulas próximas. Em seguida, passe um cateter de calibre 20 pela boca como um tubo ET Usando uma ponta de cateter, ventile os camundongos com 0,5% de flúor.

Para manter a anestesia, feche a pele ao redor do pescoço com uma sutura de cinco oh. Configure um ECG de três derivações inserindo agulhas subcutâneas para monitorar a eletrofisiologia cardíaca durante toda a cirurgia. Alterações na eletrofisiologia cardíaca devem ser registradas.

Usando o software de laboratório de energia do PC. Gire o animal para expor o lado esquerdo. Faça uma incisão ao longo do plano transversal.

Em seguida, disseque sem rodeios o quarto e o quinto espaços intercostais. Mantenha o peito aberto com espalhadores de costela de cobre enquanto corta o pericárdio. Em seguida, retraia o pulmão esquerdo para permitir o acesso ao pericárdio entre a artéria pulmonar e os átrios esquerdos.

Ao longo da parede septal encontra-se a artéria descendente anterior esquerda após 7,0. Suturas de prolina sob ele. Em seguida, coloque PE dez dois grandes em cima dele e amarre o tubo no lugar.

Deixe o tubo por 60 minutos para induzir a isquemia. Após 60 minutos, corte as extremidades da sutura na alça para reperfundir o coração. Feche o tórax com uma sutura de sete oh prolina.

Feche a pele ao redor da região torácica com cinco suturas de oh prolina. Remova a fonte de gás do ventilador e deixe o roedor respirar o ar ambiente. Assim que ocorrer a respiração espontânea e a resposta do animal ao beliscão do dedo do pé, coloque-o de volta em uma gaiola nova em uma incubadora de 37 graus Celsius.

Remova o tubo traqueal quando o animal estiver quase consciente e nenhum problema for evidente no animal. Uma vez que o animal tenha se recuperado, ele pode ser devolvido ao viveiro até que seja fotografado. Os protocolos de imagem aqui descritos devem ser realizados antes de três dias e sete dias após a indução da isquemia reperfusão.

Para avaliar as alterações na função cardíaca e as anormalidades do movimento da parede, inicie o procedimento de imagem posicionando o camundongo anestesiado com flúor isof na posição prona abaixo da sonda de um sistema de imagem vivo 2100. Coloque um cone de nariz para fornecer um suprimento contínuo de ar de flúor 1.5% ISO e aplique gel condutor no mouse. Inicie o vivo 2100 e inicialize o transdutor MS 400.

Use a bola de pista rolante no painel de controle vivo 2100 para selecionar cardiologia e adquirir a imagem padrão do modo M. Coloque a sonda no mouse e clique em ctor para iniciar a aquisição do filme. Para realizar medições, clique na medição e trace pelo menos três ciclos cardíacos na inclinação superior e inferior da câmara do VE.

Os seguintes parâmetros aparecerão nas dimensões da parede da tela, volumes na sístole e diástole, frações de ejeção ou encurtamento fracionado de FE ou débito cardíaco FS ou codiâmetros internos. Na sístole e na diástole, os parâmetros aparecem automaticamente na tela assim que o rastreamento é concluído. Após a conclusão da imagem do modo M, coloque o mouse em posição paraesternal e clique no modo B.

Para executar imagens de tensão, clique em sinistro. Em seguida, usando a sonda, adquira filmes no modo B do eixo curto e longo. Para analisar os filmes, selecione o filme no modo B e clique no ícone da cepa vivo para usar o algoritmo de rastreamento de manchas.

Uma nova janela aparecerá com o filme no modo B à esquerda e iniciará a análise à direita. Trace as bordas epi e endocárdicas. Clique no ícone de iniciar análise para abrir outra janela.

Em seguida, selecione velocidade, deslocamento, deformação e taxa de deformação. Escolha um ponto de interesse aqui. O local da lesão é escolhido e o software traça as curvas correspondentes ao ponto da lesão para todos os parâmetros selecionados.

Agora clique com o botão direito do mouse para copiar os gráficos ou exportar os dados. Para análise da sincronicidade miocárdica, vá para a direita da nova janela e clique no ícone de tempo para análise de pico. Agora aparecerá uma janela mostrando a página de sincronicidade segmentar do VE e as opções de seleção de deslocamento de velocidade radial e longitudinal e taxa de deformação.

Selecione o botão de tensão e armazene os dados. Repita este processo para deslocamento e deformação Mantenha o animal em posição paraesternal para realizar as medidas de fluxo com Doppler.

Comece a usar a bola de rastreamento para colocar o volume da amostra na válvula mitral, fluxo de saída aórtica e jato mitral. Clique em PW para obter o perfil de fluxo. Uma nova janela aparecerá com o filme exibido na parte superior e os perfis de velocidade na parte inferior do armazenamento de imagens de clique.

Para obter uma imagem estática, proceda à aquisição de perfis de velocidade de fluxo regurgitante doppler de potência da válvula mitral, jato regurgitante e jato aórtico da mesma forma, colocando o volume da amostra no local desejado, clicando em PW e armazenando a imagem Para adquirir o fluxo doppler colorido, vá ao painel de controle e clique em cor. Em seguida, usando a imagem do fluxo sanguíneo codificada por cores, encontre o raio do orifício clicando em medir e selecionando o ícone de comprimento fornecido no menu. Em seguida, selecione Fluxo de MV no menu suspenso.

Em seguida, coloque o cursor nos pontos inicial e final da inclinação mais íngreme do perfil de velocidade. E clique com o botão esquerdo do mouse para ver a velocidade nos respectivos pontos dessas velocidades. Use uma relação RNLI modificada para encontrar a queda de pressão DP sobre DT em milímetros de mercúrio.

Em seguida, subtraia o fluxo de saída aórtica do fluxo de entrada da VM em termos de volumes sanguíneos para determinar o volume regurgitante, um marcador da gravidade do regurgit. Depois que todas as imagens forem adquiridas, remova o cone do nariz e coloque o rato em sua gaiola quando o animal se recuperar. Transfira-o para o viveiro aqui.

São mostrados resultados representativos das medidas de strain radial e circunferencial miocárdica, sincronicidade, fluxo colorido e fluxo doppler. Este filme de medidas de strain miocárdico realizado três dias após a isquemia. A reperfusão demonstra contração limitada no comprimento do local da lesão e as setas dos vetores observados estavam anormais no local da lesão, demonstrando miocárdio deformado.

Os gráficos codificados por cores representam os dados de deformação correspondentes aos pontos de cor no filme. Esta imagem mostra a sincronicidade do tecido setorial com base na deformação radial. Observe que um tempo de sincronização maior que 20 a 30 milissegundos é considerado assíncrono.

Essas imagens tiradas três dias após a IR mostram a medida do diâmetro de uma válvula mitral e demonstram o jato mitral ou a área da face. Aqui a técnica de medição de parâmetros funcionais em camundongos pré-IR é usada para traçar a borda miocárdica usando um software que permite a avaliação de alterações nos parâmetros entre pré IR e pós-IR. A linha vertical vermelha é igual à diástole da linha vertical verde sístole.

Este filme ilustra o fluxo Doppler colorido com regurgitação mitral. No terceiro dia pós-IR, esta visualização cinematográfica do fluxo sanguíneo no átrio esquerdo, válvula mitral, aorta do ventrículo esquerdo e átrio direito é, por sua vez, usada para encontrar a área do orifício do jato mitral. Como anteriormente, este é o primeiro relatório que demonstra o potencial do ultrassom de alta frequência para estudar a reperfusão de isquemia no modelo de camundongo.

É a primeira vez que parâmetros quantitativos sofisticados, como tensão, sincronicidade e regurgitação mitral, foram demonstrados neste modelo. Como alguém que está envolvido no campo da ecocardiografia há quase 30 anos e trabalha regularmente com pacientes com doença arterial coronariana, posso dizer que esses achados são clinicamente relevantes e essa metodologia tem importância para o estudo da isquemia e reperfusão. Ao fazer esses procedimentos, é importante lembrar que o seguinte status e dose são cruciais, mínimo é recomendado, adquirindo necessidades de visão do eixo longo para esternal, experiência mãos medição da velocidade de pico regurgitante é descobrir que DPDT deve ser feito com cuidado para minimizar erros.

Então é isso. Obrigado por assistir e boa sorte com seus experimentos.