Name: Baixa tensão de Aprendizagem Route Usando o Lashley Maze III em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 14 s
Description: Aprenda a avaliar aprendizado e memória em camundongos usando o labirinto Lashley III sem estresse. Este método é ideal para estudar envelhecimento cognitivo e diferenças entre linhagens em neurociência comportamental.

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O labirinto Lashley III utilizados para estes experimentos foi construído por Tim Bowmaster, Corman Paulo, Dutrow Barry, Jabco Ryan, Tim e Treaster da Universidade Estadual da Pensilvânia Física Oficina Departamento. Os autores gostariam de agradecer a Sra. Shoba Belegundu, Ms. Tara Chrzanowski, ea Sra. Alexandra Lewis para a assistência na realização dos experimentos apresentados nas Figuras 2-4. Sr. Walter Jackson desde feedback valioso na preparação deste protocolo. Este trabalho foi financiado por recursos do Instituto Nacional de Saúde Mental (MH064756 e MH077978 para AMA). O conteúdo é da exclusiva responsabilidade dos autores e não representam, necessariamente, a posição oficial do Instituto Nacional de Saúde Mental ou o National Institutes of Health.

1. Preparação: <ol><li> O labirinto Lashley III é construído de Plexiglas e é mostrado na Figura 1. A caixa de começar, braços labirinto, e caixa de meta são modulares para permitir a limpeza e modificabilidade do labirinto. As paredes da caixa de começar, braços labirinto, e caixa de meta são construídas de Plexiglas para eliminar pistas visuais de fora e dentro do labirinto. Braços labirinto são 45 cm de comprimento, 7 cm de altura e 5 cm de largura. Portas que dão para os braços consecutivos do labirinto são 4 cm x 4 cm e estão situado a 11 cm das paredes exteriores do labirinto. A caixa de meta é de 19,5 cm de comprimento x 7 cm de altura x 5 cm de largura. A caixa de começar é 8 cm x 9,5 cm x 7 cm. Separar peças transparentes de acrílico são colocados em cima da caixa de começar, labirinto, e caixa de meta para permitir a visualização de cada rato à medida que progride através do labirinto, evitando a fuga dos ratos. O labirinto repousa sobre uma base construída de acrílico vermelho que é grande o suficiente para manter as três peças do labirinto uma gaiola pseudo-casa que é do mesmo tamanho da gaiola do animal para casa padrão. </li><li> Para preparar pseudo-home gaiolas antes do julgamento labirinto em primeiro lugar, material de cama nova do mesmo tipo que o utilizado em gaiolas dos animais em casa é adicionado ao fundo da gaiola individuais com portas (2 cm x 2 cm) corte nas laterais. Fios lugar tops nesses fundos gaiola e numerá-las individualmente, uma para cada animal em uma coorte de testes. Essas gaiolas individuais servirá como pseudo-home gaiolas para cada animal para a duração do período de testes. Porque estamos investigando os papéis de estresse e / ou ansiedade relacionados com comportamentos na aprendizagem e memória, usamos pseudo-home gaiolas para evitar individualmente em gaiolas de camundongos habitação de sua casa. No entanto, se esses fatores não são uma preocupação primordial, os animais podem ser alojados individualmente em gaiolas casa modificado com portas e estas gaiolas podem servir como as gaiolas casa para navegação labirinto de sucesso. </li></ol> 2. Testes: <ol><li> Cada dia, os animais são movidos para a sala de testes de comportamento, no mínimo, uma hora antes do teste, que lhes permitam adaptar ao ambiente de teste. </li><li> Trinta minutos antes do início comida o tempo de teste, ea água é removida de todas as gaiolas casa. Manter os alimentos e água na sala de testes de comportamento, mas fora do alcance dos ratos. Comida e água normalmente é removido 30 min após a mudança da fase de luz para a fase de escuro, após a alimentação pico ocorreu. Isso garante que os animais são principalmente alimentos e água saciada antes do teste, no entanto, testes durante este período fornece uma pequena força adicional de motivação para navegar pelo labirinto, embora não há comida aberta ou recompensa de água após a conclusão da tarefa. </li><li> Após o período de pré-teste 30 min tenha decorrido, limpe o labirinto com etanol 70%. Deixe a porta principal da caixa começar no labirinto braços fechados. As portas em ambas as extremidades da caixa de meta são deixadas em aberto. </li><li> Coloque a gaiola pseudo-casa correspondente ao primeiro animal no final da caixa de meta. </li><li> Realizar o primeiro rato para o labirinto, colocando-o na mão. Coloque o mouse na caixa de início e recoloque a tampa. </li><li> Quando em posição de observar o labirinto sem obstrução, abra a porta caixa de início e começar imediatamente a três cronômetros. </li><li> Quando todas as quatro patas do rato deixaram a caixa de começar, feche a porta caixa de começar e parar o temporizador em primeiro lugar. </li><li> Registro pela mão do caminho o mouse viaja como ele navega pelo labirinto. Um rato entra em uma nova zona ou no braço do labirinto, quando todas as quatro patas atravessaram a fronteira para essa área (ver Fig. 1.). </li><li> Quando todas as quatro patas entrar na caixa de gol, fechar a porta que conduz entre o labirinto ea caixa de gol e parar o cronômetro segundo. </li><li> Quando o mouse foi completamente entrou na gaiola de pseudo-casa, feche a porta entre a caixa de gol e da gaiola. Parar o cronômetro terceiros. </li><li> Registo dos tempos dos três cronômetros. Contar o número de erros, o mouse tem feito. Um erro é definido como uma entrada em um beco sem saída cul-de-sac zona (por exemplo, passando de L braço para zona de K;. Fig 1) ou viajar de volta através de um braço já viajou do labirinto (por exemplo, indo de F braço a braço C; Fig. 1).. Enquanto nós pontuação de desempenho do mouse, uma vez que está ocorrendo, é possível filmar ou ensaios labirinto registro para permitir a pontuação subseqüente ou por olho ou por software automatizado. Experimentador critério deve ser usado para escolher um método apropriado. </li><li> Deixar o animal na gaiola pseudo-casa por 1 min antes de voltar para sua gaiola em casa. </li><li> Repita os passos 2,3-2,12 para todos os ratos no grupo de testes. </li><li> Quando o mouse na última coorte foi devolvido à sua gaiola, iniciar o temporizador de 30 min. No final deste período de 30 min, o retorno de alimentos e água para todos os ratos no grupo e em seguida, retornar os animais à sua sala de colônia. </li><li> Repita este procedimento em noites consecutivas, com um ensaio por dia de testes por animal, até que todos os ratos no grupo chegaram a um critério de aprendizagem definidos, ou até um determinado number de ensaios de teste ocorreu. Um rato é classificada como tendo aprendido no labirinto quando ele pode realizar a tarefa com 0 ou 1 erro (s) em dois ensaios consecutivos. Ratos são testados na mesma ordem em ensaios sucessivos. </li></ol> 3. Resultados representativos: Dias para aprender (alcance critério) podem ser analisadas e comparadas entre os diferentes grupos em um estudo particular (Figs. 2A e 3A). Além disso, um índice de aprendizagem (learning ratio), que caracteriza a aquisição labirinto, pode ser avaliado ao longo dos primeiros quatro dias do período de testes (Figs. 2B e 3B). O índice de aprendizagem é a relação entre o número de segmentos caminho correto viajou para o número total de segmentos de caminho percorrido para cada julgamento. O índice de aprendizagem média deve ser de aproximadamente 0,5 para julgamento 1, quando os camundongos são expostos pela primeira vez para o labirinto e navegando por acaso. O aumento do índice de aprendizagem e se aproxima de 1 entre os ensaios 2 e 4, indicando que a aprendizagem está ocorrendo. Na Figura 2 jovens (2 meses) e envelhecimento (24 meses) ratos C57Bl/6NCr masculino foram treinados no labirinto Lashley para até 15 testes. Os ratos jovens aprenderam o labirinto em 7,2 (± 1,5) d. Em contraste, os animais de envelhecimento levou 11,7 (± 2,1) d para chegar critério. Houve uma forte tendência para os ratos C57Bl/6NCr envelhecimento para ter mais tempo para aprender o labirinto ([t (23) = 1,59, P = 0,056]; one-tailed t-teste, uma hipótese a priori que os dias a aprender é mais no envelhecimento camundongos). Quando o índice de aprendizagem é calculada, ambos os grupos etários mostram um aumento contínuo no índice de aprendizagem dos ensaios de 2 a 4 (efeito principal significativo de tempo P &lt;0,001). No entanto, não houve diferença estatisticamente significativa no índice de aprendizagem entre jovens e velhos camundongos C57 C57 ratos (efeito principal de idade P = 0,58). Figura 3 é representativa de estudos examinando os efeitos da tensão de fundo na aprendizagem de comportamento. Dados do jovem macho C57Bl/6NCr mostrado na figura. 2 estão agora em comparação com dados de Crl jovens: CD-1 (ICR) BR camundongos [CD-1, 4-5 mo]. CD-1 camundongos aprenderam o labirinto Lashley III em 4,5 (± 1,4) d, no entanto, não houve diferença significativa entre as cepas em dias de aprender (Fig. 3A; [t (18) = 1,328, P = 0,20]; dois -tailed t-teste). Por exame de contraste, do índice de aprendizagem mostra que, embora todos os animais foram navegar pelo labirinto no primeiro julgamento por acaso, um CD-ratos aprenderam a tarefa mais rapidamente (efeito principal da pressão P &lt;0,001). Isto é ilustrado pelo aumento estatisticamente significativo no índice de aprendizado em testes de 2 a 4 em camundongos CD-1 em comparação com camundongos C57Bl/6NCr. Curiosamente, se camundongos CD-1 continuam a ser treinados no labirinto além do ponto de chegar a critério, eles exibem um comportamento indicativo de overtraining (Fig. 4) que é discutido em maiores detalhes abaixo. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1:. O labirinto Lashley III Os mortos-end cul-de-sac zonas do labirinto são de cor vermelha no diagrama apenas para fins ilustrativos. A base e os braços do labirinto, são de cores sólidas (inset). O labirinto é desenhado em escala (dimensões em texto). <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2: Lashley desempenho maze III em 2 e 24 meses de idade, os ratos do sexo masculino C57Bl/6NCr O labirinto Lashley III foi usado para avaliar rota de aprendizagem em jovens (2 meses) e envelhecimento (24 meses) ratos C57Bl/6NCr masculino.. Os parâmetros medidos foram: (a) dias para critério, o número de dias necessários para um mouse para executar o labirinto para duas noites consecutivas com 0 erros ou um erro, e (b) o índice de aprendizagem, o número de corrigir entradas quatro pata-braço feito em relação ao número total de entradas nos braços feitos nos dias 1-4 de Lashley teste labirinto III. Número de animais por grupo foram n = 10 para dois meses de idade e n = 15 para 24 meses de idade camundongos. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3: Lashley desempenho maze III em C57Bl/6NCr jovem macho e camundongos CD-1 O labirinto Lashley III foi usado para avaliar rota de aprendizagem em dois C57Bl/6NCr meses e 4-5 meses de idade, CD-1 camundongos.. Os parâmetros medidos foram: (a) dias para critério, o número de dias necessários para um mouse para executar o labirinto para duas noites consecutivas com 0 erros ou um erro, e (b) o índice de aprendizagem, o número de corrigir entradas quatro pata-braço feito em relação ao número total de entradas nos braços feitos nos dias 1-4 de Lashley teste labirinto III. Número de animais por grupo foram n = 10 para C57Bl/6NCr e n = 10 para um CD-ratos. Significâncias estatísticas: * P &lt;0,05, ** P &lt;0,01 contra ratos C57Bl/6NCr. <img src="/files/ftp_upload/1786/1786fig4.jpg" alt="Figura 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 4"> Figura 4: Lashley desempenho maze III em 4-5 meses de idade camundongos CD-1 O labirinto Lashley III.foi usado para avaliar a aprendizagem em dez rota 4-5 meses de idade do sexo masculino CD-1 camundongos em 15 dias consecutivos. Os parâmetros medidos foram: (a) número de erros cometidos por dia, com um erro definido como uma entrada de quatro patas, em um beco sem saída cul-de-sac zona ou viajar um braço já viajou do labirinto, e (b) tempo gasto no labirinto por dia. O dia em que critério foi alcançado é indicado com uma seta vermelha.

<ol><li>Blizard, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Return+to+home+cage%27+as+a+reward+for+maze+learning+in+young+and+old+genetically+heterogeneous+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Med%22%5BJournal%5D)">Return to home cage' as a reward for maze learning in young and old genetically heterogeneous mice.</a> Comparative Med. 56, 196-201 (2006).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+wrong+with+my+mouse%3F%3A+Behavioral+phenotyping+of+transgenic+and+knockout+mice%22">What's wrong with my mouse?: Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice</a>. , 2nd ed, John Wiley & Sons, Inc. Hoboken. (2007).</li>
<li>Blizard, D. A., Klein, L. C., Cohen, R., McClearn, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse-friendly+cognitive+task+suitable+for+use+in+aging+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Genet%22%5BJournal%5D)">A novel mouse-friendly cognitive task suitable for use in aging studies.</a> Behav. Genet. 33, 181-189 (2003).</li>
<li>Warren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+learning+by+old+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Aging+Res%22%5BJournal%5D)">Appetitive learning by old mice.</a> Exp. Aging Res. 12, 99-105 (1986).</li>
<li>Lashley, K. Brain mechanisms and intelligence: A quantitative study of injuries to the brain. , University of Chicago Press. Chicago. (1929).</li>
<li>Barnes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+deficits+associated+with+senescence%3A+A+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psych%22%5BJournal%5D)">Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psych. 93, 74-104 (1979).</li>
<li>Matzel, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+the+expression+of+a+general+learning+ability+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Individual differences in the expression of a general learning ability in mice.</a> J. Neurosci. 23, 6423-6433 (2003).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris water maze in the study of memory and learning.</a> Int. J. Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Hepler, D. J., Wenk, G. L., Cribbs, B. L., Olton, D. S., Coyle, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+impairments+following+basal+forebrain+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Memory impairments following basal forebrain lesions.</a> Brain Res. 346, 8-14 (1985).</li>
<li>Sci, B. ehavB. rain 2, 313-313 (1979).</li>
</ol>

Todos os protocolos foram aprovados pelo comportamento da Universidade Estadual da Pensilvânia Animal Care Institucional e Comitê de uso. Não há divulgações financeiras para relatar.

Os testes em roedores mais comumente utilizado comportamental para avaliar a aprendizagem e memória são o labirinto aquático de Morris e variantes de condicionamento do medo 2. Esses testes contam com pistas visuais ou auditivas para a aprendizagem e estímulos aversivos (por exemplo, água, footshock) para motivar os animais para completar as 3 tarefas. Em roedores envelhecimento, como o envelhecimento em seres humanos, modalidades sensoriais declínio ao longo do tempo. Linhagens de camundongos fund...

<table><tbody><tr><td>Labirinto Lashley III</td><td>Oficina de Máquinas da Física da PSU</td><td>N/A</td><td>O labirinto deve ser construído sob medida, não está disponível comercialmente</td></tr></tbody></table>

baixa tensão de aprendizagem route usando o lashley maze iii em ratos

Low-stress Route Learning Using the Lashley III Maze in Mice

Muitos testes de comportamento desenhado para avaliar o aprendizado ea memória em roedores, especialmente ratos, dependem de pistas visuais, privação de alimento e / ou água, ou outros estímulos aversivos para motivar a aquisição de tarefas. Como idade dos animais, modalidades sensoriais deteriorar-se. Por exemplo, muitas cepas de camundongos desenvolvem déficit auditivo ou catarata. Alterações nos sistemas sensoriais necessárias para orientar os ratos durante a aquisição tarefa presente confunde potencial em interpretar as mudanças de aprendizagem em animais de envelhecimento. Além disso, o uso de estímulos aversivos para motivar os animais para aprender tarefas é potencialmente de confusão quando se comparam os ratos com sensibilidade diferencial ao estresse. Para minimizar esses tipos de efeitos de confusão, temos implementado uma versão modificada do labirinto Lashley III. Este labirinto se baseia na aprendizagem rota, pela qual os ratos aprendem a navegar em um labirinto através de exposição repetida sob condições de estresse baixo, fase escura, por exemplo, não privação de alimento / água, até que percorrer um caminho a partir do local de início para uma gaiola pseudo-casa com 0 ou 1 erro (s) em dois ensaios consecutivos. Podemos classificar isso como um teste de comportamento de baixa tensão, porque não depende de estímulos aversivos para incentivar a exploração do labirinto e aprendizagem da tarefa. O aparelho consiste de uma caixa de começar a modular, um corpo labirinto de 4 braços, e uma caixa de meta. No final da caixa de meta é uma gaiola de pseudo-casa que contém cama semelhante ao encontrado na jaula do animal em casa e é específico para cada animal para a duração do ensaio labirinto. Foi demonstrado anteriormente que este pseudo-gaiola casa oferece recompensa suficiente para motivar os ratos para aprender a navegar pelo labirinto<sup&gt; 1</sup&gt;. Aqui, apresentamos a visualização da cirurgia do labirinto Lashley III no contexto da avaliação de diferenças relativas à idade na aprendizagem e memória em ratos junto com uma comparação do comportamento de aprendizagem em duas cepas diferentes do fundo de camundongos. Esperamos que outros pesquisadores interessados ​​em avaliar os efeitos do envelhecimento ou vulnerabilidade estresse em ratos irá considerar este labirinto uma alternativa atraente para testes comportamentais que envolvem tarefas de aprendizagem mais estressante e / ou visuais.

O labirinto Lashley III é uma tarefa rota-aprendizagem que não depende de estímulos aversivos ou estímulos visuais. É, portanto, uma opção altamente atraente para avaliar a aprendizagem ea memória, especialmente em ratos do envelhecimento ou de outra forma, onde o stress é uma consideração.

Baixa tensão de Aprendizagem Route Usando o Lashley Maze III em Ratos

Muitos testes comportamentais projetados para avaliar a aprendizagem e a memória em roedores, particularmente em camundongos, baseiam-se em pistas visuais, privação de alimento e/ou água, ou outras...

No labirinto em forma de L, os camundongos aprenderam a navegar por uma série de braços para alcançar um ambiente semelhante à gaiola domiciliar. Em ensaios repetidos, no início de cada ensaio, os camundongos são colocados no Starbucks, que é separado do labirinto por uma porta. Uma vez aberta a porta, os camundongos entram nos braços do labirinto e têm permissão para explorar livremente o trajeto que o camundongo percorre.O labirinto é registrado, incluindo as entradas em zonas de erro com becos sem saída. Ao entrar na caixa dourada, outra porta é fechada para impedir o reingresso no labirinto e direcionar o camundongo a entrar na gaiola-falsa. Ao final do ensaio no labirinto, o desempenho nos labirintos é comparado entre grupos etários ou linhagens para avaliar o papel na aprendizagem e na memória.Olá, sou Amanda Bressler. Trabalho no laboratório de Anne Andrews aqui na Universidade Estadual da Pensilvânia. Hoje vou mostrar a você como usar o labirinto de Lashley três.Utilizamos este labirinto principalmente em nosso laboratório para estudar envelhecimento em camundongos geneticamente modificados. Então vamos lá. Primeiro, vejamos como é o labirinto de Lashley três.O labirinto com caixa de partida, os braços e a caixa dourada são modulares, permitindo a limpeza e modificação do labirinto. As paredes da caixa de partida, do labirinto, dos braços e da caixa dourada são todas construídas em plexiglás preto para eliminar pistas visuais provenientes do exterior e do interior do labirinto. Os braços do labirinto têm 45 centímetros de comprimento, sete centímetros de altura e cinco centímetros de largura.As portas que levam aos braços consecutivos do cetro têm quatro centímetros por quatro centímetros e estão situadas a 11 centímetros das paredes externas do cetro; a caixa dourada tem 19,5 centímetros de comprimento por sete centímetros de altura por cinco centímetros de largura. A caixa de partida tem oito centímetros por 9,5 centímetros por sete centímetros. Peças separadas de plexiglás transparente são colocadas sobre o labirinto em forma de estrela e sobre a caixa dourada para permitir a visualização de cada camundongo enquanto percorre o labirinto.Embora impedir que os camundongos escapem do labirinto repouse sobre uma base construída em plexiglás vermelho com tamanho suficiente para acomodar as três peças do labirinto, além de uma gaiola-fantasma do mesmo tamanho da gaiola residencial padrão do animal. Para preparar as gaiolas-fantasma antes do primeiro ensaio do MACE, adicione material fresco de cama em fundos individuais de gaiolas com aberturas cortadas nas laterais, coloque tampas de arame sobre os fundos das gaiolas e numere-as individualmente, uma para cada animal em um grupo de testes. Essas gaiolas servirão como gaiolas-fantasma individuais para cada animal durante todo o período de testes.Com o labirinto preparado, vejamos como realizar o teste comportamental por pelo menos uma hora. Antes do teste, transfira os animais para a sala de testes comportamentais para permitir que se aclimatizem ao ambiente de teste. Trinta minutos antes do teste, remova a comida e a água de todas as gaiolas de origem.Mantenha a comida e a água na sala de testes comportamentais, mas fora do alcance dos camundongos. O experimento é geralmente cronometrado de forma que a comida e a água sejam removidas 30 minutos após a mudança da fase clara para a fase escura, quando ocorre o pico de alimentação. Isso garante que os animais estejam principalmente saciados em relação à comida e à água antes do teste, para fins de demonstração.Neste vídeo, estamos mostrando este procedimento sob luz intensa. O teste geralmente é realizado durante a fase escura do ciclo claro-escuro. Quando o período de pré-teste de 30 minutos tiver terminado, limpe o labirinto com etanol 70%.Deixe a porta que leva do Starbucks para o labirinto. Braços fechados. As portas em ambas as extremidades da caixa dourada devem permanecer abertas.Agora coloque a gaiola-fantasma correspondente ao primeiro animal. Ao final da caixa dourada, leve o primeiro camundongo ao labirinto, segurando-o com as mãos em forma de concha.Coloque o camundongo no Starbucks e substitua a tampa. Quando estiver em posição de observar o labirinto sem obstrução, abra a porta da caixa de partida e imediatamente inicie três cronômetros. Quando as quatro patas do camundongo tiverem saído da caixa de partida, feche a porta da caixa de partida e pare manualmente o primeiro cronômetro.Registre o trajeto. O caminho que o camundongo percorre ao navegar pelo labirinto. Em uma folha de pontuação, considera-se que o camundongo entrou em uma nova zona ou braço do labirinto quando as quatro patas tiverem cruzado para essa área.Quando as quatro patas entrarem na caixa-alvo, feche a porta entre o labirinto e a caixa-alvo e pare o segundo cronômetro. Quando o camundongo tiver entrado completamente na gaiola-falsa, feche a porta entre a caixa-alvo e a gaiola. Pare o terceiro cronômetro.Registre os tempos dos três cronômetros e conte o número de erros cometidos pelo camundongo. Um erro é definido como a entrada em uma zona de beco sem saída ou o retorno por um braço do labirinto já percorrido. Deixe o animal na gaiola pseudodomiciliar por um minuto antes de devolvê-lo à sua gaiola de origem.Após testar todos os camundongos do grupo, aguarde 30 minutos e, em seguida, devolva a comida e a água a todos os camundongos. Por fim, retorne os animais à sala da colônia. Repita este procedimento em noites consecutivas, com um ensaio por dia de teste por animal, até que todos os camundongos do grupo atinjam um critério definido de aprendizado ou até que um número predeterminado de ensaios de teste tenha sido realizado.Um camundongo é classificado como tendo aprendido o labirinto quando consegue realizar a tarefa com zero ou um erro em dois ensaios consecutivos. Os camundongos são testados na mesma ordem em ensaios sucessivos. Agora mostraremos alguns resultados comportamentais representativos.Aqui observamos dados de camundongos machos jovens de dois meses e envelhecidos de 24 meses, C57 black six e camundongos CR, que foram treinados no labirinto de Lashley por até 15 tentativas. Na figura dois A, os camundongos jovens aprenderam o labirinto em uma média de 7,6 dias. Em contraste, os animais envelhecidos levaram 11,7 dias para atingir o critério.Houve uma forte tendência de camundongos C57, black six NCR R idosos levarem mais tempo para aprender o labirinto. O índice de aprendizagem é a razão entre entradas corretas nos braços e segmentos totais do percurso realizados em um único ensaio, quando o índice de aprendizagem é calculado na figura dois B. Ambos os grupos etários apresentam uma razão de aproximadamente 0,50 no primeiro ensaio. Tanto camundongos jovens quanto idosos mostram um aumento constante no índice de aprendizagem dos ensaios dois ao quatro, mas não houve diferenças significativas entre os dois grupos apresentados.Aqui estão dados de estudos que examinam o efeito da linhagem genética no comportamento de aprendizagem. Camundongos machos jovens das linhagens C57, black six NCR e controles CD1, com quatro a cinco meses de idade, foram comparados. Os camundongos C57 black six são os mesmos do grupo jovem apresentado na figura dois.Na figura três, camundongos CD1 aprendem o labirinto de Lashley três em 4,5 dias. Não houve diferença significativa entre as linhagens quanto aos dias necessários para atingir os critérios. Em contraste, o exame do índice de aprendizagem na figura três B mostra que, embora todos os animais estivessem navegando pelo labirinto na primeira tentativa por acaso, os camundongos CD1 aprenderam a tarefa mais rapidamente.Isso é ilustrado pelo aumento estatisticamente significativo no índice de aprendizagem nos ensaios dois a quatro em camundongos CD um em comparação com camundongos C 57 BL seis e CR. Curiosamente, se camundongos CD um continuarem sendo treinados no labirinto além do ponto de atingir o critério, eles exibem comportamento indicativo de super treinamento. Na figura quatro A, observa-se um aumento no número de erros cometidos após o dia cinco. O dia cinco foi o dia em que os camundongos CD um atingiram o critério.Os camundongos CD um também passaram mais tempo dentro do MACE após adquirirem a tarefa, o que pode ser observado na figura quatro B. Assim, acabamos de mostrar como usar o labirinto Lashley três para medir aprendizado e memória em camundongos. Ao implementar este experimento no seu próprio laboratório, pode ser necessário realizar alguns estudos piloto, já que diferentes linhagens de camundongos adquirem os MAs em taxas distintas e podem estar sujeitas à superexaustão. Obrigado por assistir e boa sorte em seus futuros experimentos.

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Neurociência

Este vídeo mostra como usar o Barnes Maze com um mouse. O procedimento de teste Barnes Maze é usado por pesquisadores para avaliar o aprendizado espacial e a memória em animais de laboratório após testes repetidos.

Barnes Maze: um método para avaliar o aprendizado espacial e a memória em animais de laboratório

O dry-terra Barnes labirinto é amplamente utilizado para medir a capacidade de navegação espacial em resposta a estímulos aversivos levemente. Nos dias consecutivos, o desempenho (por exemplo, a latência para localizar gaiola escape) de indivíduos do grupo controle melhora, indicativo de aprendizagem normal e memória. As diferenças entre ratos e camundongos exigem aparelhos e metodologia mudanças que estão detalhadas aqui.

Barnes Estratégias Teste Labirinto com pequenas e grandes roedores Modelos

O objetivo deste protocolo é investigar a cognição espacial em roedores. O labirinto aquático duplo-H é um teste novo, que é particularmente útil para elucidar os diferentes componentes de aprendizagem, consolidação e memória, bem como a interação dos sistemas de memória.

O Double-H labirinto: um teste comportamental robusto para Aprendizado e Memória em roedores

O Open-campo Torre Maze (OFTM) é um labirinto criado para estudar os mecanismos comportamentais e neurais da aprendizagem espacial (por exemplo, colocação ou resposta-learning) em ratos. Este labirinto é especialmente útil para pesquisadores que desejam usar um paradigma labirinto não-estressante para investigar a aprendizagem espacial em suas pesquisas.

Coloque e Aprendizagem Response no Open-campo Torre Maze

Este protocolo descreve um ensaio comportamental, com base no teste de labirinto de Barnes, para estudar como instintiva defensiva ações são modificadas pelo conhecimento do ambiente espacial.

Um ensaio comportamental para investigar o papel da memória espacial durante uma defesa instintiva em ratos

Este protocolo mede aprendizagem espacial e memória usando o labirinto de Barnes. Um novo paradigma de donzela em apuros é usado para avaliar a atividade locomotora e comportamento pró-social em camundongos.

Analisando a aprendizagem espacial e comportamento pró-social nos ratos usando o labirinto de Barnes e paradigmas de donzela em apuros

A tarefa da barreira do labirinto Y é um teste de comportamento que examina a motivação para gastar esforço para recompensa. Aqui, discutimos o teste de múltiplos estressores crônicos bem validados, incluindo corticosterona crônica e estresse de derrota social com esse comportamento, bem como o novo estresse crônico de derrota social não discriminatória (CNSDS), que é eficaz nas mulheres.

Estresse crônico muda comportamento de escolha relacionado ao esforço em uma tarefa de barreira y-maze em camundongos

O presente protocolo descreve um labirinto reconfigurável, um sistema único para testar a navegação espacial e fenótipos comportamentais em roedores. A adaptabilidade deste sistema de labirinto permite a execução de vários experimentos em um único ambiente físico. A facilidade de rearranjo estrutural gera resultados experimentais confiáveis e reprodutíveis.

Utilizando um sistema de labirinto reconfigurável para melhorar a reprodutibilidade dos testes de navegação espacial em roedores

Este artigo apresenta um protocolo que permite uma avaliação não invasiva e automatizada do desempenho motor fino, bem como da aprendizagem motora adaptativa e associativa frente a desafios, utilizando um aparelho denominado Escada Erasmus. A dificuldade da tarefa pode ser titulada para detectar comprometimento motor que varia de graus maiores a sutis.

Monitorização da aprendizagem motora fina e associativa em ratinhos utilizando a escada Erasmus

A maioria dos experimentos de comportamento para roedores foi originalmente concebida para ratos. Devido às diferenças comportamentais entre ratos e camundongos, às vezes são necessárias modificações para camundongos. Apresentamos um método para testar a memória de trabalho espacial em camundongos, minimizando o estresse durante a tarefa de memória de trabalho.

Uma tarefa apetitiva de memória de trabalho espacial para camundongos em um labirinto radial semiautomatizado de 8 braços, reduzindo a associação de memória de medo no labirinto

Aprenda a avaliar aprendizado e memória em camundongos usando o labirinto Lashley III sem estresse. Este método é ideal para estudar envelhecimento cognitivo e diferenças entre linhagens em neurociência comportamental.

Baixa tensão de Aprendizagem Route Usando o Lashley Maze III em Ratos

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