Name: Extensão Proboscis Response Assay (PER) em Drosophila (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00.000+00:00
Duration: 28 min 40 s
Description: Aprenda o ensaio de resposta de extensão da probóscide (PER) em Drosophila para estudar comportamento gustativo e preferências alimentares em insetos. Este método demonstra como substâncias atraentes induzem a extensão da probóscide.

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Agradecemos a Paul Graham para servir como um homem da câmera na apresentação de vídeo.

Fome <ol><li> Primeiro, morrer de fome a voar. </li><li> Coloque um pequeno pedaço de Kim-wipe encharcada com água em um tubo vazio. </li><li> Transferência de 20-30 bem alimentados voa para o frasco vazio. </li><li> Verifique a cada 12 -24 horas para fazer se o papel está úmido. </li><li> Fome a voar por 36-72 horas. </li></ol> Fix the fly <ol><li> Tome uma mosca em um aspirador. </li><li> Coloque uma ponta de 200 mL amarela sobre a abertura. Simultaneamente lançando e soprando sobre ele, você pode espremer a voar para a ponta amarela. </li><li> Aplicar suavemente um pouco de ar para empurrar a voar até um ponto onde ele não pode se mover. </li><li> Usando uma navalha, colocar uma marca de cerca de olho da mosca, em seguida, sugar a voar de volta e cortou a ponta. </li><li> Suavemente soprar a voar de volta para a posição, mas apenas antes de chegar ao fim, faça um corte inclinado na posição em que a tromba vai ser localizado. Você pode fazer sem este corte viés, mas com certeza gostaria de fazer o seguinte processo mais fácil. </li></ol> Prepare pavios sacarose <ol><li> Torça uma faixa de 6 mm de largura Kimwipes ® papel em um thread, e separe em pedaços pequenos de pavio cone-like forma (&lt;1 cm). </li><li> Essas mechas pequenas foram mergulhados em soluções de sacarose ou água e apresentado ao proboscis fazendo o contato. </li></ol> Prepare os controles e animais experimentais <ol><li> Antes de testar qualquer tastants, dar uma solução de sacarose 4% para a mosca. Isto age como um controle positivo. Descartar qualquer mosca que não respondeu. </li><li> Em seguida, teste dH 2 0 na mosca. Este ato como um controle negativo. Descartar a voar se o fez responder. </li><li> Testar esses controles depois de testar o seu tastants. </li></ol>

<ol><li>Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).</li>
</ol>

Nesta apresentação, nós passamos por todas as etapas para Proboscis ensaio de resposta de extensão. O método parece muito simples, mas como em muitos ensaios outro comportamento, muitas coisas pequenas podem impedir que o ensaio de trabalhar. Nós já passamos por diversas etapas que necessitam de atenção especial. Aqui, eu enfatizar alguns dos fatores mais importantes. Um desses fatores é a forma do pavio. Eu tenho mostrado alguns dos exemplos muito bons, mas é claro que, na realidade, tudo seria um espectro contínuo entre muito bom ...

<table><tbody><tr><td>HDR-HC1</td><td>Câmera</td><td>Sony Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SMZ800</td><td>Microscópio</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P-IBSS</td><td>Adaptador de câmera</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x DC10LN</td><td>Adaptador de câmera</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>257010</td><td>Adaptador de câmera</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TREKKER Mk2</td><td>Trípode</td><td>BENBO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gorillapod SLR</td><td>Trípode</td><td>Joby</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMac G5</td><td>Computador</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Power Mac G5</td><td>Computador</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMovie</td><td>Software</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MPEG Streamclip</td><td>Software</td><td>SQUARED 5</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

extensão proboscis response assay (per) em drosophila

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis resposta extensão (PER) é um ensaio de comportamento gosto que tem sido utilizado em moscas, bem como em abelhas. Sobre a superfície da boca da mosca (labelo), existem cabelo-como estruturas chamadas sensilla que abriga neurônios gosto. Quando uma substância atraente faz contato com o labelo, a mosca estende sua tromba para consumir o material. Extensão Proboscis Response ensaio (PER) mede a resposta comportamento, gosto e é um método útil para aprender sobre as preferências alimentares em uma única mosca. Soluções dos vários açúcares, como sacarose, glicose e frutose, são muito atraentes para a mosca. O efeito de substâncias aversivo também pode ser testada como a redução do PER, quando misturado em uma solução doce. Apesar da simplicidade do procedimento básico, existem muitas coisas que podem impedi-lo de trabalhar. Um dos fatores que requer atenção é o estado de resposta da mosca. O tempo necessário para trazer a fome a voar para o estado adequado de resposta varia drasticamente de 36 a 72 horas. Nós estabelecemos uma série de controles para avaliar o estado da mosca e que permite a triagem de não-responsivos ou hiper-sensíveis animais individuais. Outro fator importante é o nível de impacto ea posição do contato com o labelo, que seria difícil descrever com palavras. Esta apresentação em vídeo demonstra todos juntos estes com várias outras melhorias que poderiam aumentar a reprodutibilidade deste método.

Proboscis resposta extensão ou PER é um ensaio de comportamento gosto que tem sido utilizado em moscas, bem como em abelhas. Quando a tromba faz contato com uma substância atrativa, a mosca estende sua tromba para consumir a substância. Soluções dos vários açúcares, são muito atraentes para a mosca.

Extensão Proboscis Response Assay (PER) em Drosophila

A resposta de extensão da probóscide (PER) é um ensaio de comportamento gustativo que tem sido utilizado tanto em moscas quanto em abelhas melíferas.
Na superfície da boca da mosca...

Olá. Nesta apresentação, gostaríamos de mostrar como realizar o ensaio de resposta de extensão do probóscide em esôfago. A resposta de extensão do probóscide, ou PER, é um ensaio de comportamento gustativo utilizado em moscas e também em abelhas melíferas. Quando o probóscide entra em contato com uma substância atrativa, a mosca o estende para consumir a substância.Soluções de vários açúcares, como sacarose, glicose e frutose, são muito atrativas para a mosca. A RP também pode ser observada por meio de um contato feito com a pata, mas gostaríamos de focar no contato do probóscide nesta apresentação. Assim, o primeiro passo para o ensaio de RP é privar a mosca de alimento.A otimização da condição de privação é um dos fatores mais importantes para este ensaio. E existem duas questões principais que são importantes aqui. Uma é o tempo de privação e a outra é o tamanho corporal da mosca antes da privação.E parece haver uma correlação positiva entre esses dois fatores. E se a mosca for grande e gorda, é necessário privá-la de alimento por mais tempo. Agora, o tamanho do corpo depende da nutrição do alimento fornecido às moscas e da densidade das moscas no frasco.Vou mostrar um bom exemp

proboscis-extension-response-per-assay-in-drosophila

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

De gravação simultânea de sinais de cálcio dos neurônios identificados e comportamento alimentar de Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster é um sistema modelo de genética e comportamentalmente tratável que tem sido usada para compreender a base molecular e celular de muitos processos biológicos importantes para mais de um século 1. Drosophila tem sido bem explorado para obter insights sobre a base genética do comportamento da mosca.

Métodos de Ensaio para Drosophila Comportamento

Este vídeo demonstra um método para detectar respostas de neurônios sensoriais em Drosophila usando ligação de ligante e imagem de fluorescência. Os ligantes se ligam aos receptores dos neurônios, causando o influxo de cálcio. O cálcio se liga aos complexos indicadores, levando à emissão de fluorescência, o que confirma a resposta neuronal ao ligante.

Detecção de respostas fisiológicas de neurônios sensoriais em Drosophila

Neste artigo de vídeo, descrevemos um método automatizado para medir o efeito de fome ou saciedade em olfativo comportamento de busca de alimentos dependente na fruta Drosophila melanogaster mosca adulta.

A Single-fly Ensaio para comportamento de forrageamento em Drosophila

O protocolo de condicionamento Proboscis Extension Response (PER), desenvolvido para a abelha melífera (Apis mellifera), fornece um meio ecologicamente relevante e facilmente quantificável para estudar vários mecanismos diferentes de aprendizagem em muitas espécies de insetos.

Um protocolo de resposta narigudo Extensão para investigar plasticidade comportamental em Insetos: Aplicação para Basic, biomédica e Pesquisa Agropecuária

Para identificar novas mutações que afetam a mecanosensação, projetamos um ensaio que mede a resposta comportamental à estimulação tátil de cerdas de moscas em clones mutantes gerados pelo método MARCM. A combinação de técnicas permite a identificação de mutações mecanossensíveis que, de outra forma, seriam letais.

Clones em um ensaio comportamental para Mechanosensation de MarcM baseada em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Descrevemos aqui uma configuração comportamental e método de análise de dados para testar as respostas olfativas de até 100 moscas do vinagre (Drosophila melanogaster). Este sistema pode ser usado com estímulos olfativos únicos ou múltiplos e adaptável para ativação optogenética ou silenciamento de subconjuntos neuronais.

Comportamentos olfativos ensaiadas pelo monitoramento do computador de<em&gt; Drosophila</em&gt; Em um olfatômetro de quatro quadrantes

O objetivo geral deste protocolo é demonstrar como apresentar odorantes de baixa volatilidade para a gravação de sensibilidade única a partir de neurônios receptores olfativos de Drosophila que respondem a feromonas cuticulares de cadeia longa.

Gravação eletrofisiológica de<em&gt; Drosophila</em&gt; Sensilla Tricoide em resposta aos odorantes de baixa volatilidade

Este protocolo analisa comportamento de navegação de larvas de Drosophila em resposta à estimulação optogenetic simultânea de seus neurônios olfativos. Luz de comprimento de onda de 630 nm é usada para ativar individuais neurônios olfativos expressando uma rodopsina canal avermelhado. Larval movimento simultaneamente é controlado digitalmente gravado e analisados utilizando o software personalizados.

Rastreamento do comportamento larval de Drosophila em resposta à estimulação optogenética de neurônios olfativos

O objetivo deste protocolo é mostrar como realizar um ensaio melhorado para o nocicepção mecânica em larvas de Drosophila. Usamos o ensaio aqui para demonstrar que a hipersensibilidade mecânica (aodínia e hiperalgesia) existe em larvas de Drosophila.

Um ensaio e ferramentas aprimoradas para medir o nocicepção mecânico em larvas de Drosophila

Este artigo apresenta métodos para manipulação optogenética em Drosophila melanogaster, utilizando CsChrimson e GtACR2 para ativar e silenciar neurônios específicos. Quatro experimentos são descritos para utilizar a optogenética para explorar comportamentos termotáticos e gustativos, fornecendo insights sobre os mecanismos neurais subjacentes que governam esses processos.

Ensaios Comportamentais para Manipulação Optogenética de Circuitos Neurais em Drosophila melanogaster

Aprenda o ensaio de resposta de extensão da probóscide (PER) em Drosophila para estudar comportamento gustativo e preferências alimentares em insetos. Este método demonstra como substâncias atraentes induzem a extensão da probóscide.

Extensão Proboscis Response Assay (PER) em Drosophila

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