Aparelho novo e Método para Reforço de Drogas

Operante de drogas auto-administração e preferência local condicionado (CPP) procedimentos são utilizados em pesquisas expansiva para modelo de vários componentes de reforço de drogas, consumo e dependência em humanos. Neste relatório, nós combinamos os métodos tradicionais de CPP e auto-administração como uma nova abordagem para estudar o reforço de drogas e vício em ratos.

Este vídeo demonstra uma nova abordagem no estudo do abuso de drogas, combinando a preferência tradicional de lugares condicionados e os procedimentos de autoadministração. Primeiro, as preferências de linha de base para dois ambientes operante distintos são determinadas. Sessões de autoadministração começam então nas quais os ratos auto-administram cocaína em apenas um dos ambientes operante distintos.

Após o condicionamento, a quantidade de tempo que os animais escolhem passar em qualquer um dos ambientes operante é medida, as mudanças no local, a preferência e as taxas de autoadministração de drogas podem ser medidas e correlacionadas. Olá, sou Allison Fiducia do laboratório da Dra. Christine Elle na Faculdade de Farmácia, a divisão de farmacologia e toxicologia da Universidade do Texas em Austin. E eu sou Christine Elle.

Hoje gostaríamos de mostrar a você um novo aparelho que pode ser usado de várias maneiras diferentes para estudar o reforço e o vício em ratos. Usamos esse procedimento em nosso laboratório para estudar os efeitos da autoadministração de cocaína. Então vamos começar.

Para iniciar os preparativos para experimentos de reforço de drogas, primeiro treine ratos machos para pressionar uma alavanca para uma recompensa alimentar. Em seguida, construa cateteres intravenosos, que serão usados para autoadministração de medicamentos. Os cateteres são feitos de cânula de aço inoxidável e tubo Celeste e devem ser lavados com metanol e água.

Em seguida, seque ao ar durante a preparação no dia da cirurgia, banhe-os em etanol 70%. Quando os cateteres são concluídos, os ratos são submetidos a um procedimento cirúrgico de cateterismo jugular para permitir a autoadministração do medicamento. Durante os experimentos, anestesiar um rato com dois e meio a 4% de flúor.

Em seguida, raspe a cabeça e o peito, desinfete as áreas com a solução de Betadine. Em seguida, coloque-o em uma almofada estéril após a cirurgia. Monitore o rato por várias horas antes de devolvê-lo à colônia de animais.

Manter a permeabilidade do cateter lavando diariamente com 0,1 mililitros de solução salina a 0,9%, heparina e mentona para preparar a cocaína utilizada nos experimentos, dissolvê-la em solução salina isotônica nas concentrações de dose apropriadas de acordo com o peso dos animais com os animais e a administração do medicamento preparada. Vamos dar uma olhada no aparelho que é usado durante os experimentos. O aparelho usado durante os experimentos é construído a partir de duas câmaras de alavanca única, equipadas com luzes de casa e estímulo, e três conjuntos de feixes fotográficos, que são usados para medir a atividade locomotora.

As câmaras são unidas por um beco de acrílico construído. O beco consiste em duas paredes pretas com listras brancas e duas paredes de metal, um tampo de plexiglass transparente e um piso de plexiglass branco. As duas câmaras operantes têm pisos de haste de grade de aço instalados fundos de gaiola de metal removíveis.

Pistas visuais e olfativas são colocadas dentro da câmara operante para criar ambientes únicos e distinguíveis. Em um dos ambientes, a ameaça terá acesso a injeções de cocaína. No ambiente alternativo, a ameaça terá acesso apenas a injeções de solução salina.

As pistas visuais consistem em material de feltro branco ou preto preso às paredes frontal e traseira e sobre o topo da gaiola. As pistas olfativas são a sensação de fileiras à base de óleo ou canela saturando uma bola de algodão localizada sob o piso da haste da câmara. Durante os experimentos, as respostas de Libra e os dados de atividade locomotora são registrados com um computador Med Pentium de 100 megahertz equipado com software med PC.

Agora que vimos o aparato experimental, vamos ver como coletar dados. O procedimento experimental ocorre ao longo de vários dias, começando com testes de preferência de linha de base com duração de dois dias, seguidos por sessões de autoadministração de medicamentos com duração de oito ou 16 dias e terminando com um teste de preferência de local condicionado. Para começar a coletar as medições de preferência da linha de base, coloque o rato no beco central com acesso a ambas as câmaras operantes por 20 minutos.

Imediatamente após colocar o rato na câmara, ative simultaneamente o programa de software e o temporizador da câmera de vídeo para PC. Após 20 minutos, remova o rato da câmara e coloque-o de volta na gaiola doméstica. No dia seguinte ao último teste inicial, inicie as sessões de autoadministração do medicamento.

Primeiro, coloque as dicas sensoriais e, em seguida, coloque um painel para bloquear o acesso do beco central de acrílico para a câmara. Agora conecte a entrada do cateter do animal à seringa de drogas montada para iniciar a sessão. Primeiro, coloque o animal na câmara.

Depois de fechar a porta da câmara operante, inicie o programa médico do PC e o cronômetro para que a cocaína fique disponível por uma hora. A cocaína é administrada usando um esquema de reforço de proporção progressiva. Esse cronograma requer progressivamente mais respostas de alavanca para receber cada injeção sucessiva de cocaína.

Cada injeção consiste em uma dose de 0,75 miligramas por quilograma em dias alternados. No ambiente alternativo, o esquema de proporção progressiva também é usado para injeções de solução salina. No final de cada sessão de autoadministração, desconecte o envoltório do tubo do medicamento, remova-o da câmara e coloque-o de volta na gaiola inicial.

No dia seguinte à última sessão de autoadministração, realizar o teste de preferência de lugar condicionado. O procedimento para este teste é o mesmo que as medições de linha de base. Agora vamos ver como avaliar e analisar os dados.

Durante a avaliação de dados e as atribuições cegas do grupo do experimentador determinam a quantidade de tempo que o animal passou em cada compartimento. O experimentador revisa a fita de vídeo para contar as entradas e saídas entre os compartimentos por um período de 15 minutos, começando cinco minutos após a colocação dentro do aparelho. Os mesmos procedimentos usados para determinar a preferência basal e os escores dos testes CPP.

As diferenças entre as medições basais e os escores de PPC pós-condicionamento são usadas para determinar os efeitos do condicionamento do medicamento. As pontuações de diferença pós-condicionamento são calculadas subtraindo a quantidade de tempo gasto no compartimento emparelhado saliente da quantidade de tempo gasto no compartimento pareado de medicamentos durante o teste de PPC. As pontuações de diferença de linha de base são calculadas de forma semelhante e subtraídas das pontuações de diferença de CPP.

A análise estatística em diferentes alterações de pontuação desde a linha de base até as sessões de teste pode ser realizada para determinar os efeitos do condicionamento medicamentoso. Aqui é mostrado um gráfico representativo das pontuações dos testes de linha de base e CPP. Os escores dos testes de PPC foram significativamente maiores do que os escores basais, indicando uma preferência pelo ambiente de cocaína.

Após o condicionamento, a análise de correlação para respostas totais de licença de drogas e pontuações de teste de diferença de PPC são ilustradas aqui. O grupo de longo prazo com cocaína foi o único grupo a mostrar uma correlação positiva significativa entre as respostas de licença da droga e os escores dos testes de PPC. Acabamos de mostrar como combinar a condição tradicional, a preferência de local e os métodos de autoadministração para uma nova abordagem para estudar o reforço de drogas em ratos.

Ao fazer este procedimento, é importante manter uma boa manutenção de registros. Então é isso. Obrigado por assistir e boa sorte com seus experimentos.