Injeção na veia da cauda: um método para administrar células cancerígenas para estudos metastáticos em um modelo de camundongo

Comece adicionando tripsina em uma placa de Petri contendo células de câncer de mama marcadas para separá-las da superfície. Adicione meio contendo soro para interromper a ação da tripsina. Transfira a suspensão da célula para um tubo cônico e centrifugue-a para a célula de pellets.

Descarte o sobrenadante e ressuspenda as células em solução salina tamponada com fosfato. Coloque o tubo no gelo para desacelerar o metabolismo celular. Carregue esta suspensão celular contendo a quantidade necessária de células em uma seringa Luer lock e fixe uma agulha nela.

Coloque um rato em uma contenção de roedores com a cauda para fora. Mergulhe a cauda em água morna para dilatar as veias. Existem duas veias nos lados laterais e uma artéria no lado ventral da cauda. Limpe a cauda com álcool, insira a agulha e injete a suspensão celular.

Uma vez na corrente sanguínea, as células cancerígenas injetadas invadem órgãos, como os pulmões, e proliferam. Remova lentamente a agulha e use uma gaze estéril no local da injeção para aplicar pressão para parar o sangramento. Retorne o mouse à gaiola e garanta uma recuperação completa. No protocolo a seguir, demonstramos a injeção de células cancerígenas metast