Name: Ex Carregando vivo mecânica do tendão (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-05-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Aprenda a carregar tendões in vitro simultaneamente para estudar mecanismos de distúrbios tendíneos em pulsos e cotovelos. Este sistema permite medições precisas de propriedades mecânicas em condições controladas.

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<ol><li> Suplemento de mídia CO 2 independentes de mídia com soro fetal bovino, l-glutamina, antibióticos e ácido ascórbico </li><li> Ml alíquota 40 em 50 tubos de centrífuga ml (1 para cada tendão) </li><li> Alíquota de 10 ml em 15 tubos de centrífuga ml (1 para cada tendão) </li><li> Esterilizar instrumentos cirúrgicos, as folhas de autoclave, pinças e chave de torque em autoclave </li><li> Esterilizar grampos e dicas micrômetro força por imersão em etanol 70% durante a noite </li><li> Tendões colheita da patas traseiras do coelho. Coelho deve ter sido sacrificada não mais de 2 horas atrás. </li><li> Tendões lugar em 15 tubo de centrifugação ml preenchida com a mídia </li><li> Lay uma folha esterilizados em autoclave para estabelecer um campo estéril </li><li> Medida área transversal do tendão <ol style="margin-top: 0in"><li> Dicas lugar micrômetro em micrômetro, alinhar corretamente </li><li> Tendão aderência pelas extremidades </li><li> Fit seção tendão mais fino na ranhura </li><li> Têm peso assistente lugar 50g </li><li> Aguarde 30 segundos, leia espessura (CSA = espessura x 1,3) </li></ol></li><li> Coloque de volta tendão em 15 ml tubo de centrífuga </li><li> Repita com cada tendão a ser carregado </li><li> Remover atuador da base </li><li> Corte dois 15 milímetros por 40 milímetros tiras de 3 milímetros e um pedaço de 5 milímetros de gaze estéril para cada tendão </li><li> Enrole cada tira com força e lugar entre os grooves do grampo distal </li><li> Remover tendão de tubo de centrífuga e colocar no grampo, a extremidade distal do tendão na braçadeira distal ea região fibrocartilagem do tendão na braçadeira proximal </li><li> Coloque o pedaço de gaze 3x5 em cima da extremidade distal do tendão, e segura a braçadeira </li><li> Clamp proximal segura, garantindo tendão permanece alinhada entre as pinças e com folga suficiente para que ele não está sob tensão quando grampos estão bem apertados. Aperte as braçadeiras para 1N-m </li><li> Coloque o tubo de centrífuga de 50ml com a mídia em base </li><li> Atuador lugar na base </li><li> Repita com cada tendão a ser carregado </li><li> Base de lugar ao longo banho de água </li><li> Carregando Protocolo <ol style="margin-top: 0in"><li> Tendões condição </li><li> Aplicar 0.5N carga, comprimento do tendão medida (isto é o comprimento de medida) </li><li> Aplicar cargas cíclicas </li></ol></li><li> Remover atuador da base </li><li> Tendão de liberação de grampos </li><li> Tendão processo </li></ol>

<ol><li>Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+system+for+applying+cyclic+loads+to+connective+tissues+under+displacement+or+force+control%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control.</a> Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+loading+inhibits+expression+of+MMP-3+but+not+MMP-1+in+an+in+vitro+rabbit+flexor+tendon+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biomech%22%5BJournal%5D)">Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model.</a> Clin Biomech. , In Press Forthcoming.</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MMP-1%2C+IL-1%CE%B2+and+COX-2+mRNA+Expression+is+Modulated+by+Static+Load+in+Rabbit+Flexor+Tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon.</a> Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.</li>
</ol>

O vídeo apresenta um novo sistema para o carregamento simultâneo de até quatro tendões ao vivo em cultura de tecidos. Durações de carga típicas são 2 a 48 horas. Após o carregamento, os tendões são removidos e processados ​​para a expressão do gene. O sistema permite a investigação do efeito do padrão de carga sobre as mudanças em genes associados com alterações degenerativas no tendão. Estas experiências podem fornecer alguns insights sobre os mecanismos de lesão associada com carga repetitivo. Eles oferecem uma descrição de cargas que pod...

Personalizado 4 Linear Actuator carga do sistema águas quente banho de tubos de 50 ml tendões (coelho) estéril media

ex carregando vivo mecânica do tendão

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

Lesões do tendão (por exemplo, tendinite punho, epicondyltis) devido ao uso excessivo são comuns em atividades esportivas e local de trabalho. A maioria são associados repetitivos, atividades mão alta força. Os mecanismos de dano celular e estruturais devido ao carregamento cíclico não são bem conhecidos. O objetivo deste vídeo é apresentar um novo sistema que pode, simultaneamente, quatro tendões de carga em cultura de tecidos. O vídeo descreve os métodos de colheita de tecidos estéreis e como os tendões são carregados em um sistema de fixação que é posteriormente imersas em mídia e mantida a 37 ° C. Um grampo é fixo, enquanto o outro é movido com um atuador linear. Força de tração do tendão é monitorada com uma célula de carga em série com a braçadeira móvel. Os atuadores são controlados com um programa LabView. Os quatro tendões podem ser repetidamente carregado com diferentes padrões de carga, taxa de repetição, a taxa de carregamento, e duração. Carregando pode continuar por alguns minutos a 48 horas. No final do carregamento, os tendões são removidos e meados da década de substância extraída para as análises bioquímicas. Este sistema permite a investigação dos efeitos de cargas sobre os padrões de expressão genética e mudanças estruturais no tendão. Em última instância, os mecanismos de lesão devido ao uso excessivo pode ser estudos com os achados aplicada ao tratamento e prevenção.

Um novo sistema in vitro para carregar simultaneamente quatro tendões na cultura é descrito.

Ex Carregando vivo mecânica do tendão

Lesões no tendão (ex.: tendinite do punho, epicondilite) decorrentes de sobrecarga são comuns em atividades esportivas e no ambiente de trabalho. A maioria está associada a ...

Meu nome é David Rempel. Sou professor do Departamento de Bioengenharia na u da Universidade da Califórnia em Berkeley. O experimento que você vai ver envolve o alongamento de tendões e, na verdade, o objetivo é tentar evidenciar, compreender o mecanismo subjacente aos distúrbios tendinosos no punho e no cotovelo.Esses distúrbios tendíneos são comuns entre atletas e trabalhadores que realizam trabalho repetitivo com as mãos. Krish Sundi, um dos estudantes de doutorado em nosso laboratório, demonstrará várias características do sistema, especificamente a medição da área da seção transversal do tendão. Ele carregará os tendões nos atuadores.Ele demonstrará o sistema carregando o tendão ciclicamente durante um período de 24 horas e, em seguida, removerá o tendão do sistema. Ok, este é o sistema de carregamento que projetamos e construímos. Como você pode ver, ele consiste em seis atuadores.Esses são atuadores de alta precisão, capazes de aplicar um deslocamento de um micrômetro. Em série com o atuador, há uma célula de carga para registrar as forças aplicadas aos tendões. Em série com a célula de carga estão essas pinças, que se estendem o suficiente para poderem ser submersas no meio

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Um In vivo Modelo de Contração de roedores induzida por lesões e não-invasivos acompanhamento da recuperação

Nós projetamos um novo biorreator carga mecânica que pode aplicar uniaxial ou biaxial de tensão mecânica para um biocomposite cartilagem antes do transplante em um defeito da cartilagem articular.

Projeto de um biorreator Carregando Mecânica Biaxial para Engenharia de Tecidos

Um novo protocolo de imagem foi desenvolvido usando um atuador mecânico acionado por motor personalizado para permitir a medição de respostas em tempo real à tensão mecânica em células vivas. Relevante para a mecanobiologia, o sistema pode aplicar deformações de até 20%, permitindo imagens quase em tempo real com microscopia de força confocal ou atômica.

Imagens de células vivas durante Mecânica estiramento

Descrevemos um protocolo in vivo para medir a dorsiflexão do pé após estimulação do nervo fibular e contração do compartimento crural anterior do membro posterior do rato. Essas medições são uma ferramenta translacional indispensável para avaliar a patologia do músculo esquelético e as abordagens de engenharia de tecidos para reparo e regeneração muscular.

aplicações de<em&gt; In Vivo</em&gt; Teste Funcional do Rato tibial anterior para a Avaliação da engenharia de tecidos Repair Músculo Esquelético

O protocolo descreve métodos de teste biomecânicos de tração eficientes e reprodutíveis para tendões murinos através do uso de luminárias impressas em 3D personalizadas.

Teste biomecânico de tendões murinos

Um sistema bioreator de estimulação mecânica uniaxial tridimensional é um bioreator ideal para diferenciação tenogênica específica de células-tronco derivadas do tendão e formação de neo-tendões.

Aplicando um sistema bioreator de estimulação mecânica uniaxial tridimensional para induzir a diferenciação tenogênica de células-tronco derivadas do tendão

Aqui, apresentamos uma técnica de sutura "Q" que pode ser realizada na reparação do tendão e seus efeitos na formação de lacunas e resistência à tração dos tendões reparados. A sutura Q mostra-se eficiente no aumento da resistência à tração e da resistência ao reparo do tendão.

Usando sutura Q para melhorar a resistência à formação de lacunas e resistência à tração dos tendões flexores reparados

Este artigo descreve um algoritmo de correlação de imagem digital de código aberto para medir cepas de tecido 2D locais dentro de explantes de tendões. A precisão da técnica foi validada usando várias técnicas e está disponível para uso público.

Medindo Cepas de Tecido Local em Tendões via Correlação de Imagem Digital de Código Aberto

Apresentamos uma plataforma experimental personalizada e um protocolo de cultura de tecidos que recria a alteração fibrocartilaginosa impulsionada pelo impacto da inserção do tendão de Aquiles em explantes murinos de membros posteriores com viabilidade celular sustentada, fornecendo um modelo adequado para explorar a mecanobiologia do impacto tendíneo.

Modelo de Explante de Membro Posterior Murino para Estudo da Mecanobiologia do Impacto do Tendão de Aquiles

Este protocolo apresenta um sistema de teste usado para induzir lesões por fadiga quantificáveis e controladas em um tendão de Aquiles de ratos para um modelo in vivo de tendinopatia induzida por uso excessivo. O procedimento consiste em prender o tornozelo do rato a um atuador articular que realiza a dorsiflexão passiva do tornozelo com um script MATLAB personalizado.

Um Sistema de Teste de Dorsiflexão de Tornozelo Passivo para um Modelo In Vivo de Tendinopatia Induzida por Overuse

Aqui, apresentamos um sistema modelo assemblóide para mimetizar o crosstalk celular do tendão entre o tecido central do tendão que suporta carga e um compartimento extrínseco contendo populações celulares ativadas por doença e lesão. Como um importante caso de uso, demonstramos como o sistema pode ser implantado para sondar a ativação de células endoteliais extrínsecas relevantes para a doença.

Engenharia de Assemblóides de Tendão para Sondar Crosstalk Celular em Doenças e Reparos

Aprenda a carregar tendões in vitro simultaneamente para estudar mecanismos de distúrbios tendíneos em pulsos e cotovelos. Este sistema permite medições precisas de propriedades mecânicas em condições controladas.

Ex Carregando vivo mecânica do tendão

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