Imagens em tempo real multiespectrais de fluorescência para detecção intra-operatória do linfonodo sentinela em Oncologia Ginecológica

O objetivo geral do experimento a seguir é a detecção intraoperatória do linfonodo sentinela no câncer cervical ou vulvar. O linfonodo sentinela é o primeiro linfonodo de drenagem de um tumor. Neste procedimento, um agente fluorescente, incy e verde ou ICG é injetado junto com o corante azul padrão ao redor do tumor primário.

A solução será impulsionada para o primeiro linfonodo de drenagem. Um sistema de câmera de fluorescência multiespectral intraoperatório feito sob medida, instalado na sala de cirurgia antes da cirurgia, registra eventos in vivo em tempo real do fluxo linfático com base no sinal fluorescente, com base em resultados in vivo, bem como ex vivo, indicando a força do sinal fluorescente e o método clássico de detecção de descoloração azul. O cirurgião é guiado na excisão do linfonodo sentinela.

A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes é que é um procedimento de uma etapa durante o qual a visualização e excisão dos gânglios linfáticos ocorre durante a cirurgia. Essa tecnologia de plataforma pode melhorar os conceitos atuais em oncologia cirúrgica, não apenas fornecendo ao cirurgião informações anatômicas, mas ao mesmo tempo fornecendo rastreamento dinâmico de fluorescência em tempo real in vivo. Para realizar este protocolo, configure a câmera de fluorescência multiespectral intraoperatória, que normalmente é personalizada.

O sistema mostrado aqui foi desenvolvido no Instituto de Imagens Biológicas e Médicas de Munique. Em estreita colaboração com a SEARCHs, um laser é usado para excitação da sonda fluorescente. Os filtros da câmera são ajustados para fluorescência infravermelha próxima com comprimento de onda de excitação em 750 nanômetros e comprimento de onda de emissão de 800 mais ou menos 20 nanômetros após a emissão de luz passar pelo sistema óptico, onde se separará em luz visível, fluorescência intrínseca e fluorescência infravermelha próxima.

As câmeras CCD são alinhadas para detectar os feixes de luz separados, de modo que os sinais multiespectrais de todas as câmeras sejam processados para produzir uma verdadeira biodistribuição quantitativa de fluoro quatro. A configuração também corrige artefatos. Os monitores de computador na mesa de controle e dentro da sala de cirurgia podem exibir sinais coloridos e fluorescentes como imagens separadas, bem como sobrepostos em uma imagem sob condições estéreis.

Prepare o agente de contraste fluorescente indocianina verde a uma concentração de 0,5 miligramas por mililitro em água destilada estéril. Não use solução salina, pois isso precipita o reagente, armazene imediatamente a solução em um local escuro e fresco para evitar o clareamento e preservar a integridade do reagente ICG, a fim de minimizar a interferência com a posição padrão do procedimento cirúrgico e iniciar o sistema de câmera na sala de cirurgia antes da cirurgia e verifique as conexões com as telas de alta definição para uso durante a cirurgia. Cubra a câmera com cortinas estéreis padrão usando procedimentos e condições estéreis, conforme mostrado no vídeo.

Antes de injetar o agente fluorescente. Posicione a câmera acima do paciente e exponha o campo de interesse. Ajuste o zoom para focar a câmera e desligue as luzes na sala de cirurgia para melhor detecção do sinal fluorescente.

Seringa Lotus com um mililitro de 0,5 miligramas por mililitro, ICG e igual volume de corante azul padrão. Injete cuidadosamente o agente fluorescente em quatro quadrantes ao redor do tumor primário e tente evitar derramamento em caso de derramamento de ICG em luvas cirúrgicas. Basta trocar as luvas durante todo o procedimento.

Manobre a câmera para garantir a gravação contínua da área de interesse. Adquira imagens estáticas ou vídeos em tempo real do fluxo linfático e da aparência do linfonodo sentinela fluorescente. Um tempo de exposição de 180 a 200 milissegundos produzirá bons vídeos.

Salve todos os dados no computador de acordo para análises futuras. A inspeção visual da descoloração do azul causada pela injeção de azul patenteado é realizada como parte padrão do procedimento usando as imagens de fluorescência gravadas simultaneamente para orientação. A excisão em tempo real do linfonodo sentinela é realizada.

A imagem em tempo real ajuda a detectar linfonodos fluorescentes em localizações inesperadas, adquirir imagens ex vivo de todos os linfonodos de consumo de forma sequencial para a presença de fluorescência. Tempos de exposição mais longos podem ser usados ao capturar imagens estáticas. O linfonodo sentinela é enviado para análise histopatológica para detectar a presença ou ausência de células tumorais.

O poder da detecção intraoperatória de um linfonodo sentinela com este protocolo de imagem de fluorescência multiespectral é demonstrado neste exemplo de uma imagem de fluorescência multiespectral in vivo de um linfonodo no câncer vulvar. O linfonodo fluorescente na região inguinal antes da excisão é claramente visualizado. Neste curta-metragem, mostramos a detecção em tempo real do linfonodo sentinela com base na fluorescência em uma paciente com câncer cervical.

Aqui descrevemos uma imagem ex vivo de um linfonodo no câncer do colo do útero. A imagem colorida do linfonodo foi sobreposta pela imagem de fluorescência do mesmo linfonodo usando uma escala de pseudo cor para produzir uma imagem nítida com alta relação sinal-fundo. Essa técnica não apenas abriu caminho para pesquisadores no campo da oncologia cirúrgica de ressecção guiada por imagem do linfonodo sentinela, mas também oferece possibilidades de imagens específicas direcionadas ao tumor para avaliação da margem tumoral e intervenções personalizadas para pacientes com tumores sólidos e possíveis metástases regionais locais.

Então, depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa impressão da imagem de fluorescência intraoperatória em tempo real dos linfonodos sentinelas no câncer ginecológico.