Name: Transplante cardíaco heterotópico em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 43 s
Description: Aprenda o transplante cardíaco heterotópico em ratos para estudar rejeição e respostas imunes. Este modelo refinado permite avaliar drogas imunossupressoras e mecanismos de rejeição em pesquisa cardiovascular.

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Preparação de doadores e de colheita do coração: <ol><li style="text-align: left"> O rato é anestesiados com injeção intraperitoneal de pentobarbital supina e colocado no campo operatório. </li><li style="text-align: left"> A incisão mediana abdominal longa é feita. Conteúdo abdominal são retraídos com gaze para a esquerda, a fim de expor a aorta abdominal e veia cava inferior. </li><li style="text-align: left"> 1 ml de heparina (10U/ml) é injetado na veia cava inferior para heparinização. </li><li style="text-align: left"> A toracotomia é feita: as costelas são divididos em ambos os lados da coluna vertebral e da parede torácica anterior é alavancado para expor o coração. </li><li style="text-align: left"> A veia cava inferior, a veia cava superior e veia ázigos são ligadas com seda 6-0 e dividido superior ao ligaduras. </li><li style="text-align: left"> Da aorta ascendente e artéria pulmonar são separados e divididos, tanto distalmente possível. </li><li style="text-align: left"> As veias pulmonares são ligadas e seccionadas distal aos laços. </li><li style="text-align: left"> O coração é perfundido com solução de 4 o C salina. </li><li style="text-align: left"> O coração é conservado em gelo solução salina fria. </li></ol> Preparação de destinatário e Transplante <ol><li style="text-align: left"> O rato é anestesiados com injeção intraperitoneal de pentobarbital supina e colocado no campo operatório. </li><li style="text-align: left"> A incisão mediana abdominal longa é feita. Conteúdo abdominal são retraídos fora do abdômen com uma gaze para expor a aorta abdominal e veia cava inferior. </li><li style="text-align: left"> Os ramos da aorta abdominal e veia cava inferior estão expostos e ligados com 10-0 suturas. </li><li style="text-align: left"> As ligaduras proximal e distal são colocados ao redor da aorta e veia cava inferior, respectivamente. </li><li style="text-align: left"> O venotomia é feita na veia cava inferior do receptor com uma agulha de calibre 30. A abertura é então estendido para um comprimento de igual a aorta pulmonar do doador com micro-tesoura. </li><li style="text-align: left"> Aortotomia é feita na aorta abdominal do receptor com uma agulha de calibre 30. </li><li style="text-align: left"> A aorta abdominal e abriu a veia cava inferior são irrigados com solução salina. </li><li style="text-align: left"> O coração do doador é colocado no lado esquerdo do abdômen do receptor e é coberto com gaze. </li><li style="text-align: left"> As suturas são colocadas ficar nos vértices proximal e distal da aorta abdominal com destinatário aorta ascendente do doador. </li><li style="text-align: left"> A anastomose do lado direito da aorta abdominal do receptor e aorta ascendente do doador são completadas com suturas de continuar. </li><li style="text-align: left"> Duas suturas são feitas ficar primeiro no ápice proximal e distal do ápice do destinatário veia cava inferior com a artéria pulmonar do doador para a anastomose da artéria pulmonar do doador e do receptor veia cava inferior. </li><li style="text-align: left"> A parede esquerda da veia cava inferior e artéria pulmonar do doador é fechada com suturas contínua no interior da veia cava inferior. </li><li style="text-align: left"> Depois de um nó com a sutura proximal ápice estadia, a parede lateral direita da veia cava inferior e artéria pulmonar do doador são fechadas com suturas contínua fora da caverna cava inferior. </li><li style="text-align: left"> O coração do doador é entregue para o lado direito do abdômen do receptor. A parede da direita da aorta abdominal do receptor e do doador anastomose aorta ascendente são fechadas com suturas continuar. </li><li style="text-align: left"> Após a anastomose é feita, a ligadura distal é removido para verificar o sangramento da anastomose. </li><li style="text-align: left"> Se houver pouco ou nenhum sangramento da anastomose, a ligadura proximal for removido. O coração do doador se enche de sangue imediatamente, a cor do coração se torna vermelho e começa a bater novamente. </li><li style="text-align: left"> Os intestinos são retornados para o abdômen, que é fechada com 6-0 contínua. </li><li style="text-align: left"> O mouse destinatário é colocado em uma área quente. Depois de uma hora o destinatário recupera. </li></ol>

<ol><li>Corry, R. obert J., Winn, H. enry J., Russell, P. aul S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
</ol>

Resultados Temos realizado com sucesso mais de 1000 casos de transplante cardíaco heterotópico em ratos e alcançou mais de 90% de sucesso em diferentes linhagens de camundongos, incluindo o tipo selvagem, transgênicos e camundongos knockout do gene. Discussão Uma vez que os drs. Corry e Russell introduziu transplante cardíaco heterotópico em ratos, em 1973, este modelo tem provado ser um particularmente valioso para estudar a resposta de rejeição imunológica e desenvolvimento de nova...

transplante cardíaco heterotópico em ratos

Heterotopic Heart Transplantation in Mice

O mouse transplante cardíaco heterotópico tem sido amplamente utilizada desde que foi introduzido pelos drs. Corry e Russell em 1973. É particularmente valioso para estudar a resposta imune de rejeição e, agora que novos transgênicos e camundongos knockout gene estão disponíveis, e um grande número de reagentes imunológicos têm sido desenvolvidos. O modelo de transplante de coração é menos rigorosa do que os modelos de transplante de pele, embora tecnicamente mais desafiador. Nós desenvolvemos uma técnica modificada e ter completado mais de 1000 casos de sucesso de transplante cardíaco heterotópico em ratos. Ao fazer anastomose da aorta ascendente e aorta abdominal, duas suturas ficar são colocadas nos vértices proximal e distal da aorta abdominal com destinatário aorta ascendente do doador s, em seguida, usando 11-0 sutura para anastomose em ambos os lados da aorta com sutura contínua. As suturas permanecer fazer a anastomose mais fácil e 11-0 é um tamanho ideal de sutura para evitar sangramento e trombose. Ao fazer anastomose da artéria pulmonar e veia cava inferior, duas suturas são feitas permanecer no ápice proximal e ápice distal do destinatário s veia cava inferior com a artéria pulmonar do doador s. A parede esquerda da veia cava inferior e artéria pulmonar do doador s é fechada com suturas contínua no interior da veia cava inferior, após, um nó com a estadia ápice proximal da sutura da parede lateral direita da veia cava inferior e artéria pulmonar do doador s são fechadas com suturas contínua fora da caverna cava inferior com 10-0 suturas. Este método é mais fácil de executar, pois a anastomose é feita apenas de um lado da veia cava inferior e 10-0 suturas é o tamanho certo para evitar o sangramento e trombose. Neste artigo, vamos fornecer detalhes da técnica para complementar o vídeo.

O rato modelo de transplante cardíaco heterotópico tem sido comprovada por muitos pesquisadores de ser um método importante para o estudo dos mecanismos de rejeição e de resposta imune. No entanto, as técnicas envolvidas são ainda um desafio. Ao modificar as técnicas padrão que temos tido sucesso com mais de 1.000 transplantes.

Transplante cardíaco heterotópico em ratos

O transplante heterotópico de coração em camundongos tem sido amplamente utilizado desde que foi introduzido pelos doutores Corry e Russell em 1973. Ele é particularmente valioso...

Meu nome é Hun Li. Trabalho no Laboratório do Dr. Kas, do Departamento de Cirurgia da Universidade da Califórnia, São Francisco. Hoje vou mostrar os procedimentos para o transplante cardíaco heterotópico em camundongos. Este modelo é uma ferramenta muito importante para a área de transplante de órgãos desde que foi introduzido pela primeira vez pelos doutores Carrie e Russell em 1973.Este é um modelo extremamente valioso para o estudo de novas drogas imunossupressoras e mecanismos de rejeição. As maiores dificuldades técnicas têm sido limitadas. Neste modelo, por meio da supressão utilizada, modifiquei alguns passos.Torne este procedimento mais fácil. Tenho certeza de que eles ficarão entusiasmados com você quando você fizer esse modelo. Está bem? Acabei de mostrar a você o procedimento para transplante cardíaco heterotópico em camundongos.O mais importante nesta etapa do procedimento é a densidade adequada dos pontos. Esta não deve ser nem muito baixa nem muito apertada, e a osmose deve ser concluída em 30 minutos. Este modelo de transplante é extremamente útil para o estudo das respostas imunológicas após transplante de órgãos e para a busca de novas drogas imunossupressoras.Espero que agora você seja capaz de realizar esses procedimentos em seus próprios laboratórios. Obrigado e.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

O modelo de transplante de coração de murídeo cervical é bem adequado para imunológico, bem como estudos de lesão de reperfusão de isquemia. Nós modificamos o procedimento usando uma técnica cuff não sutura e realizou mais de 1.000 transplantes de sucesso com essa abordagem.  Aqui, nós fornecemos mais detalhes desta técnica para complementar o vídeo.

Murino Cervical Modelo de coração Transplante usando uma técnica Cuff Modificado

Uma técnica é demonstrada para o procedimento microcirúrgico para transplante heterotópico de corações em camundongos, incluindo métodos simplificados para coleta de doadores e anastomose de vasos receptores.

Um método modificado para heterotópico Rato coração transplante

O manuscrito descreve as etapas necessárias para realizar o transplante cardíaco heterotópico no mouse.

Técnica de transplante heterotópico Murino Coração

De modo a compreender os mecanismos celulares e moleculares subjacentes neotissue formação e desenvolvimento de estenose em válvulas cardíacas de engenharia de tecidos, foi desenvolvido um modelo murino de transplante heterotópico de válvula cardíaca. A válvula cardíaca pulmonar foi transplantado para destinatário usando o coração técnica de transplante heterotópico.

O transplante de válvula pulmonar Usando um modelo do rato de Heterotópica Transplante de Coração

A técnica do manguito encurta e facilita o modelo de transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos, evitando anastomoses de sutura tecnicamente desafiadoras de pequenos vasos. Os detalhes técnicos mostrados neste vídeo devem permitir que as pesquisas estabeleçam esse modelo em seus laboratórios.

Heterotopic Cervical Transplante Cardíaco em Ratos

Aqui, nós descrevemos um modelo pré-clínico do grande-animal (porcine) da transplantação transplantação orthotopic do do coração que foi estabelecida firmemente e utilizada para investigar estratégias cardioprotetores novas.

Um modelo pré-clínico porcino de transplante cardíaco ortotópico

Uma nova técnica para reconstrução do circuito sanguíneo em um modelo de transplante de coração de camundongo heterotópico é demonstrada.

Reconstrução do circuito sanguíneo em um modelo de transplante de coração de rato abdominal

No presente protocolo, um modelo de transplante cardíaco em camundongos é utilizado para investigar o mecanismo de rejeição do enxerto cardíaco. Neste modelo heterotópico de transplante cardíaco, a eficiência da operação é melhorada, e a sobrevida dos enxertos cardíacos é garantida por uma anastomose cervical término-terminal do implante cardíaco usando uma técnica de Cuff modificada.

Técnica de Cuff Modificada para Modelo de Transplante Cardíaco Heterotópico Cervical:

Modelos de transplante cardíaco de camundongos representam valiosas ferramentas de pesquisa para o estudo da imunologia do transplante. O presente protocolo detalha o transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongos que envolve a colocação de manguitos na artéria carótida comum do receptor e no tronco da artéria pulmonar do doador para permitir o fluxo sanguíneo laminar.

Transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongo utilizando manguitos vasculares

Este protocolo apresenta uma técnica simplificada de anastomose de sutura ponta a ponta para transplante cardíaco cervical murino, fornecendo um modelo robusto e reprodutível para o estudo da imunologia de transplantes.

Transplante cardíaco de camundongo heterópico cervical usando a técnica de anastomose ponta a lateral para estudar imunologia de transplante

Aprenda o transplante cardíaco heterotópico em ratos para estudar rejeição e respostas imunes. Este modelo refinado permite avaliar drogas imunossupressoras e mecanismos de rejeição em pesquisa cardiovascular.

Transplante cardíaco heterotópico em ratos

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