Avaliar buraqueira, Construção Nest, e Hoarding em Ratos

O objetivo deste procedimento é caracterizar comportamentos típicos de espécies em camundongos. Primeiro, o comportamento de escavação é estudado preenchendo-se um tubo com material e medindo-se a quantidade removida pelo animal. Nestlets são colocados na gaiola e a completude do ninho é quantificada como uma medida do comportamento de nidificação.

O comportamento de acumulação é examinado colocando um camundongo em uma caixa com acesso a um túnel cheio de pellets de alimento e medindo a quantidade que o animal retira do túnel. Os resultados dessa série de testes indicam se os camundongos realizam suas atividades diárias. Normalmente, as implicações dessa técnica podem estender-se à busca por tratamentos para demência, porque comportamentos funcionalmente semelhantes são prejudicados tanto em camundongos quanto no ser humano.

Comportamentos típicos no camundongo podem ser comparados até mesmo às atividades da vida diária dos seres humanos. E os primeiros efeitos da doença de Alzheimer são a inibição da realização das atividades normais da vida diária, como preparar o seu café da manhã, amarrar os cadarços do sapato, planejar uma refeição ou fazer uma compra. Com nossos camundongos modelo de Alzheimer, observamos que os comportamentos típicos da espécie são fortemente inibidos.

Aqui temos um modelo direto, quase um modelo homólogo, entre as atividades da vida diária observadas em pacientes com Alzheimer em casa e na clínica, e a inibição de espécies. Comportamentos típicos no camundongo: construa um abrigo a partir de um tubo plástico, com 68 milímetros de diâmetro e 20 centímetros de comprimento. Tampe uma das extremidades com uma tampa feita de 12 milímetros de MDF.

A seguir, faça dois furos, a um centímetro da extremidade aberta do tubo de escavação, em um ângulo de 90 graus. Insira um parafuso máquina de cinco centímetros de comprimento em cada furo e aperte-os firmemente. O tubo deve agora estar elevado aproximadamente três centímetros acima do piso.

Em uma das extremidades, preencha o túnel com 200 gramas de pellets de alimento e coloque-o na gaiola principal para habituação durante a noite. Se os camundongos forem mantidos em grupos, a habituação será mais rápida e completa devido ao efeito de facilitação social. No entanto, testes de linha de base em camundongos mantidos individualmente ainda devem ser realizados.

Posteriormente, substâncias não alimentares também podem ser usadas para medir o comportamento de escavação. Alguns exemplos incluem bolas de argila, pedras britadas e areia. Após a habituação dos animais, coloque um túnel completo na gaiola de teste por volta das 16h para realizar um teste de linha de base.

Recomenda-se realizar dois testes de linha de base, com intervalo de 48 horas. Duas horas depois, meça o peso do material restante na toca esvaziando o conteúdo em um recipiente tarado.

Devolver o material não consumido ao tubo e colocar de volta na gaiola doméstica na manhã seguinte. Remover o tubo e pesar qualquer material restante para teste. Repetir este procedimento pelo menos 48 horas após a última medição basal.

Camundongos C57 black six normalmente cavam cerca de 70 gramas nas primeiras duas horas e aproximadamente 200 gramas durante a noite. Camundongos com lesão no hipocampo frequentemente cavam menos de cinco gramas. A doença de Pion inibe a escavação, assim como o lipopolissacarídeo.

A escavação pode detectar a doença priônica de 10 a 12 semanas após a injeção do homogenato cerebral doente, enquanto os sinais clínicos só aparecem em 22 semanas. A escavação demonstrou ser sensível às diferenças entre cepas e à eliminação de subunidades de canais iônicos de potássio. Para medir o comportamento de aninhamento, prepare gaiolas individuais e cubra o piso com material de cama de 0,5 centímetros de espessura.

Coloque profundamente um quadrado de cinco centímetros de algodão emplumado prensado, chamado ninho, dentro de cada gaiola. Coloque um camundongo em cada gaiola com ninho cerca de uma hora antes da fase escura e avalie os resultados na manhã seguinte.

Pese a quantidade de ninho não rasgado e avalie o ninho em uma escala de cinco pontos. Uma pontuação de um é atribuída quando o ninho está amplamente intocado, e um cinco é concedido a um ninho quase perfeito, com mais de 90% do ninho rasgado. Tanto machos quanto fêmeas constroem ninhos, cuja função está relacionada à termorregulação, além de estar associada à reprodução.

Os escores de ninho de camundongos C57 black six para machos e fêmeas estão na mesma faixa. Embora não tenhamos realizado uma comparação controlada em um único grupo, a maioria dos camundongos C57 black six apresenta escore de quatro a cinco na construção de ninho. Porém, quando o hipocampo é lesado, o escore mediano seria em torno de dois.

Uma pontuação de três dificilmente será excedida. Para medir o comportamento de armazenamento, prepare a caixa que servirá como base colocando uma garrafa d'água e fazendo um furo na lateral, onde será acoplado o tubo de armazenamento. Confeccione um tubo de armazenamento enrolando um pedaço de malha metálica de 45 centímetros ao redor de um tubo com diâmetro de 40 milímetros.

Fixe-o com grampos Allen ou torções de arame. Em seguida, encaixe-o em um tubo preto de 40 milímetros de comprimento igual a 10 centímetros. Depois, conecte o tubo de contenção à caixa preparada anteriormente e tampe a extremidade proximal com uma tampa de madeira removível.

Prepare a caixa de casa com um túnel de papelão e cama suja da gaiola de origem. Certifique-se de que o acesso ao tubo de armazenamento seja impedido. Coloque o camundongo na caixa no início do dia para habituação posterior, remova o tubo de armazenamento e encha a extremidade distal com uma mistura de pelotas de alimento grandes e pequenas, totalizando 100 gramas.

Logo antes do início da fase escura. Remova a tampa de madeira para permitir que o camundongo acesse o tubo de armazenamento na manhã seguinte. Novamente, o momento não é crítico.

Colete e pese os pellets de alimento que foram armazenados na caixa da base principal. Utilizando camundongos fêmeas C57BL/6. A quantidade mediana armazenada seria de cerca de 50 a 70 gramas.

Lesões no hipocampo suprimem fortemente o armazenamento, enquanto lesões no córtex pré-frontal têm apenas um efeito fraco. Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como avaliar comportamentos típicos da espécie em massa.