January 5th, 2012
Construção de galerias, de nidificação e açambarcamento são espécies típicas atividades que os ratos prontamente executar em laboratório. Este artigo descreve como podem ser simplesmente mais barato avaliados. Estes protocolos são extremamente sensíveis à tensão mouse, lesões cerebrais e doenças. Além disso, eles constituem "enriquecimento ambiental" para os ratos, e encarnar o "refinamento" aspecto do "3 Rs" 18.
O objetivo deste procedimento é caracterizar os comportamentos típicos das espécies em camundongos. O primeiro comportamento de escavação é estudado enchendo um tubo com material e medindo quanto é removido pelo animal. Os ninhos são colocados na gaiola e a completude do ninho é quantificada como uma medida do comportamento de nidificação.
O comportamento de acumulação é examinado colocando um rato em uma caixa com acesso a um túnel cheio de pellets de comida e medindo o quanto o animal recupera do túnel. Os resultados desta série de testes mostram se os ratos realizam suas atividades da vida diária. Normalmente, As implicações desta técnica podem se estender para a busca de tratamentos para demência porque comportamentos funcionalmente semelhantes são prejudicados tanto em um camundongo quanto no homem a espécie.
Comportamentos típicos do camundongo podem ser comparados às atividades da vida diária dos humanos. E os primeiros efeitos da doença de Alzheimer são inibir o desempenho das atividades normais da vida diária, como fazer o café da manhã, arrumar os cadarços, planejar uma refeição, fazer compras. E com nosso modelo de camundongos Alzheimer, descobrimos que os comportamentos típicos da espécie são muito inibidos.
Portanto, aqui temos um modelo direto, um modelo homólogo quase entre as atividades da vida diária, como visto em pacientes com Alzheimer em casa e na clínica, e a inibição de espécies. Comportamentos típicos no camundongo Construa um tubo de plástico, com 68 milímetros de diâmetro e 20 centímetros de comprimento. Sele uma extremidade com um tampão feito de 12 milímetros de MDF.
Em seguida, faça dois furos, a um centímetro da extremidade aberta do tubo de escavação em um ângulo de 90 graus. Insira um parafuso de máquina de cinco centímetros de comprimento em cada orifício e aperte-os no lugar. O tubo agora deve ser elevado aproximadamente três centímetros do chão.
Em uma extremidade, encha a toca com 200 gramas de pellets de comida e coloque-a na gaiola doméstica para habitação durante a noite. Se os ratos forem alojados em grupos, a habituação será mais rápida e completa devido ao efeito de facilitação social. No entanto, os testes de linha de base em camundongos alojados individualmente ainda devem ser executados.
Posteriormente, substâncias não alimentares também podem ser usadas para medir o comportamento de escavação. Alguns exemplos incluem bolas de argila, telhas de ervilha e areia. Depois que os animais estiverem habituados, coloque uma toca completa na gaiola de teste por volta das 16:00 para executar um teste de linha de base.
Recomenda-se executar dois testes de linha de base, com 48 horas de intervalo. Duas horas depois. Meça o peso do material deixado na toca esvaziando o conteúdo em um recipiente.
Retorne o material não emprestado para o tubo e coloque-o de volta na gaiola doméstica na manhã seguinte. Remova o tubo e pese qualquer material restante para teste. Repita este procedimento pelo menos 48 horas após a última medição inicial.
C 57 camundongos pretos normalmente se enterram em torno de 70 gramas nas primeiras duas horas e perto de 200 gramas durante a noite. Os camundongos com lesão hipocampal geralmente se enterram com menos de cinco gramas. A doença do píon inibe a escavação, assim como o lipopolissacarídeo.
A escavação de administração pode detectar a doença do píon 10 a 12 semanas após a injeção do homogeneizado cerebral doente, enquanto os sinais clínicos só aparecem em 22 semanas. O empréstimo demonstrou ser sensível às diferenças de deformação e nocaute das subunidades do canal iônico de potássio. Para medir o comportamento de nidificação, monte gaiolas individuais e cubra o chão com material de cama de 0,5 centímetros.
Coloque profundamente um quadrado de cinco centímetros de algodão prensado chamado ninho iluminado em cada gaiola. Coloque um camundongo em cada gaiola de nidificação cerca de uma hora antes da fase escura e avalie os resultados. Na manhã seguinte.
Pese a quantidade de ninho não rasgado aceso e avalie o ninho em uma escala de cinco pontos. Uma pontuação de um é dada quando o ninho aceso está praticamente intocado e um cinco é concedido a um ninho quase perfeito com mais de 90% do ninho iluminado rasgado. Tanto os machos quanto as fêmeas fazem ninhos, pois seu objetivo é a termorregulação, além de estarem associados à reprodução.
As pontuações do ninho de seis camundongos pretos C 57 para machos e fêmeas estão na mesma faixa. Embora não tenhamos feito uma comparação controlada em um único, a maioria dos camundongos C 57 pretos pontua de quatro a cinco na construção do ninho. Mas quando o hipocampo é lesionado, a pontuação média seria a segunda rodada.
É improvável que uma pontuação de três seja excedida. Para medir o comportamento de acumulação, prepare a caixa que servirá de base inserindo uma garrafa de água e fazendo um furo na lateral onde o tubo de acumulação será fixado. Faça um tubo de acumulação rolando um comprimento de 45 centímetros de tela de arame em torno de um tubo de 40 milímetros de diâmetro.
Prenda-o com clipes Allen ou torções de arame. Em seguida, encaixe-o em um tubo preto de 10 centímetros de comprimento de 40 milímetros. Em seguida, conecte o tubo de acumulação à caixa preparada anteriormente e bloqueie a extremidade proximal com um tampão de madeira removível.
Prepare a caixa doméstica com um túnel de papelão e roupas de cama sujas da gaiola doméstica. Certifique-se de que o acesso ao tubo de acumulação seja impedido. Coloque o rato na caixa no início do dia para habituação mais tarde, remova o tubo de acumulação e encha a extremidade distal com uma mistura de pellets de comida grandes e pequenos, totalizando 100 gramas.
Pouco antes do início da fase escura. Remova o plugue de madeira para permitir que o mouse acesse o tubo de acumulação na manhã seguinte. Novamente, o tempo não é crítico.
Colete e pese os pellets de comida que foram acumulados na caixa da base. Usando camundongos fêmeas C 57 pretas de seis. A quantidade média acumulada seria de cerca de 50 a 70 gramas.
As lesões do hipocampo suprimem fortemente o acúmulo, enquanto as lesões do córtex pré-frontal têm apenas um efeito fraco. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como avaliar os comportamentos típicos das espécies na massa.
Este artigo descreve métodos para avaliar comportamentos típicos de espécies em camundongos, incluindo escavação, nidificação e acúmulo. Esses comportamentos são sensíveis a vários fatores, como linhagem de camundongos e lesões cerebrais, e servem como uma forma de enriquecimento ambiental.
Quantitative assessment of burrowing, nest construction, and hoarding in mice provides a translationally relevant readout for early functional decline in neurodegenerative disease models. These behavioral assays enable preclinical teams to evaluate activities of daily living analogs, supporting predictive confidence in target engagement and disease-modifying potential. Integrating such endpoints into discovery-stage workflows enhances portfolio triage and de-risks advancement decisions for Alzheimer's and related indications.
These behavioral assays position within the early discovery to preclinical continuum, bridging target validation and translational research for neurodegenerative disease portfolios.