Name: Básico Técnicas Cirúrgicas na Minipig Göttingen: Intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão Transcardial (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 26 s
Description: Aprenda técnicas cirúrgicas essenciais em minipigs Göttingen, incluindo intubação endotraqueal, cateterismo vesical e femoral, além de perfusão transcardial. Este método aprimora a pesquisa biomédica com modelos animais eficazes.

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O estudo foi apoiado financeiramente pela Fundação Lundbeck, The Karen Elise Jensen Foundation, O Fundo de Pesquisa em Saúde da Região Central da Dinamarca e do Instituto de Medicina Clínica Aarhus University Hospital. Reconhecemos com gratidão a ajuda hábil de Donald F Smith, Steen Anders Soerensen, Soerensen Henrik, Asbjoern Ettrup-Christensen, e os funcionários da Paaskehoejgaard.

1. Intubação <ol><li> Equipamentos necessários para entubação endotraqueal: meios de ventilação assistida, fundas para a abertura da boca, sucção de baixa pressão com a ponta sem corte, laringoscópio com lâmina reta veterinária entre 17 e 25 cm de comprimento, estilete, seringa com ar, estetoscópio e fita adesiva. Para adultos Göttingen minipigs um tamanho de tubo endotraqueal 5-7 mm é apropriada 10. Neste vídeo um tubo de 5,5 mm foi utilizada 10. </li><li> O minipig é colocado em suas costas e devidamente comprovadas, a fim de garantir que a passagem da laringe é mantido em linha reta. </li><li> A língua é um pouco puxado para fora e da mandíbula mantidas abertas por um assistente, sem uso abusivo da cabeça. Rotação das vias aéreas ou a extensão excessiva da cabeça pode obstruir as vias aéreas, tornando a abertura da laringe mais difícil identificar e complicando a colocação do tubo traqueal. </li><li> O laringoscópio é passado para a cavidade faríngea e usados ​​para deprimir a língua, fazendo com que a epiglote visíveis. A ponta da sucção é utilizada para deslocar a epiglote do palato mole. A ponta do laringoscópio é então usado para pressionar a epiglote para cima em direção a base da língua, revelando a abertura da laringe. </li><li> As cartilagens aritenóides e pregas vocais entram em vista e do tubo endotraqueal é avançada suavemente com uma ligeira rotação, na traquéia durante a expiração. </li><li> O manguito do tubo é inflado de acordo com as especificações de fabricação tendo o cuidado de evitar a inflação em excesso, o que pode causar inchaço e edema das vias aéreas. Os porcos têm um brônquio para ventilar o lobo cranial direito pulmonal. Portanto, é importante para colocar o tubo acima da bifurcação da traquéia. Isto é facilitado usando o tamanho correto do tubo e mais importante, pela fixação da extremidade proximal do tubo ao nível do focinho com fita adesiva. </li><li> Quando o minipig está devidamente entubado, uma passagem livre de ar deve ser sentida através do tubo, e ausculta pulmonar deve revelar sons de respiração em ambos os lados esquerdo e direito do tórax. </li><li> Depois de ligar o ventilador com sistema de monitoramento para o minipig, fisiológicos valores de dióxido de carbono expiratório devem ser mensuráveis ​​e da curva de dióxido de carbono que segue o padrão de respiração decidiu pela ajustes do ventilador 6,10 podem ser observados. </li><li> O dióxido de carbono e os valores da oximetria pode inicialmente ser afetada pela pré-medicação e indução anestésica. No entanto, estes valores devem reverter rapidamente volta ao normal com ventilação adequada 6,10. Qualquer sinal de cianose apesar artificial assistida ventilação indicam colocação imprópria do tubo. O erro mais comum é a colocação inadvertida do tubo no esôfago. </li></ol> 2. Cateterismo vesical transuretral <ol><li> Este procedimento é apenas para fêmeas. Para minipigs adulto tamanho do cateter Foley francês 8 ou 10 é apropriado. Devido à curvatura e tamanho da abertura uretral externo, um cateter com estilete é preferível. Um espéculo nasal pode ser usado em pequenos porquinhos enquanto um espéculo com lâminas mais pode ser útil para grandes animais. Equipamento necessário também inclui uma ponta romba-fórceps, uma seringa com lubrificante, solução salina e um sistema fechado de bolsa de drenagem de urina. </li><li> A fim de melhor visualizar o orifício externo da uretra durante o cateterismo é o minipig colocados em suas costas com um apoio sob a região lombar, enquanto um assistente puxa as patas traseiras cranialmente. </li><li> O espéculo lubrificado é inserido e abriu para visualizar a parede vaginal. A abertura externa feminina uretral está localizado no piso da vagina cerca de um terço à metade da distância até o colo do útero (Fig. 1A). No entanto, porque o animal é colocado na parte traseira, a posição da abertura uretral aparecerá para ser invertido. </li><li> O cateter é controlada com a pinça romba-ponta, para que a ponta do cateter está na continuação do fórceps. Insira cuidadosamente o cateter na abertura da uretra (Figura 1B). A uretra é facilmente traumatizada se a força é muito usado durante o cateterismo. Contudo, a resistência ligeira pode inicialmente ser sentidas até o cateter passou o esfíncter urinário externo. Se o problema persistir, isso pode indicar que o animal não está sedado profundamente o suficiente. A solução é esperar um pouco e deixar a anestesia tomar o seu efeito. </li><li> Como o cateter alcança a bexiga, remova o estilete, e urina será visto fluindo. </li><li> Inflar o balão com solução salina de acordo com as especificações do fabrico e puxe o cateter até que o balão pega no colo da bexiga. </li><li> Anexar o sistema fechado bolsa de drenagem de urina. </li><li> Cateter a fita para a cauda para evitar deslocamento acidental do cateter ao manusear o animal. </li></ol> 3. Artéria femoral e veia catheterization <ol><li> Equipamento necessário inclui: bisturi, sem corte de ponta tesoura cirúrgica, pinça, pequenas blunt-ponta pinça cirúrgica, afastador de tecidos pequena auto-retenção, porta-agulhas, swaps cirúrgica, sutura com agulha, soro fisiológico heparinizado como um flush-fluido para manter a permeabilidade do cateter , dois de calibre 18 cânula IV, dois 4-Francês bainhas ponta brite com introdutor e arame Seldinger guia. </li><li> A profundidade da anestesia deve ser avaliado pelo teste do reflexo interdigital dor antes de iniciar o procedimento. </li><li> A artéria femoral e da veia são abordados com o minipig colocados em suas costas ea perna traseira retraído lateralmente. Identificar na prega de pele entre o músculo grácil e sartório, onde a pulsação da parte superficial da artéria safena medial desaparece. </li><li> Faça uma incisão cutânea longitudinal superficial cranial a este ponto, evitando assim, inadvertidamente, danificar os vasos medial safena. </li><li> Use uma tesoura de ponta romba para dissecar o tecido subcutâneo subjacente. </li><li> A divisão da fáscia do músculo sartório e grácil é dividido cranial ao local de penetração dos vasos safena medial, primeiro com uma pequena blunt-ponta pinça cirúrgica e depois digitalmente. </li><li> Os dois grupos musculares são separadas com afastador de tecidos pequena auto-retenção tendo o cuidado para não danificar o nervo femoral e vasos. </li><li> A artéria é isolado por um período de aproximadamente 1 a 2 cm, utilizando dissecção romba. </li><li> Gire a agulha venflon chanfrada para o lúmen é voltado para cima. Dobrar a agulha um pouco por isso vai acompanhar a curvatura navio com mais facilidade. Lembre-se de garantir a agulha ainda pode ir e vir com pouco esforço. </li><li> A artéria é puncionada, a agulha retraída eo fio-guia Seldinger é inserido através do tubo venflon. </li><li> Retire o tubo venflon enquanto suavemente aplicando pressão na artéria para assegurar a fixação do fio-guia. </li><li> A bainha com introdutor é inserida sobre o fio Seldinger e avançado para a posição desejada, após o qual o introdutor e arame Seldinger é removido. </li><li> A veia femoral está localizado logo abaixo e medial à artéria. Após isolar a veia utilizando dissecção romba, a veia é canulada, como descrito anteriormente para a artéria. </li><li> Para verificar que tanto a artéria e veia cateterizada são corretamente, tirar sangue de ambas as bainhas e comparar a cor das amostras. Sempre que desenho uma amostra de sangue, lembre-se de seguida lavar os cateteres com solução salina heparinizada, a fim de manter a permeabilidade do cateter. </li><li> Os cateteres são garantidos ea pele é fechada com alguns pontos. </li><li> Um ciclo de navio pode ser colocado ao redor da artéria e veia, a fim de fixar os vasos antes da punção. Apesar de suas vantagens, geralmente evitar este passo adicional, porque requer dissecção excessiva dos vasos e pode aumentar o risco de danificar os ramos laterais e profundas. </li></ol> 4. Perfusão Transcardial <ol><li> Os seguintes equipamentos são necessários para o procedimento: sistema de perfusão (Fig. 2), fluidos de perfusão relevantes, bisturi, sem corte de ponta de uma tesoura cirúrgica, tesoura de osso, e duas grandes auto-holding pinças dos quais pelo menos um tem uma ponta curva. A auto-retenção afastador esternal não é absolutamente necessário, mas facilita o processo consideravelmente. </li><li> Perfusão Transcardial deve ser realizada em um quarto bem ventilado com um alto sistema de extracção de fumos e poder instalações que permitem a coleta de líquidos e sangue do perfusato para a eliminação segura subseqüentes. </li><li> Após injeção intravenosa de uma dose letal de pentobarbital, teste do reflexo interdigital dor antes de continuar. </li><li> O melhor acesso para o coração e aorta é fornecido através de uma esternotomia mediana. Faça uma incisão longitudinal de pele profunda, que se estende desde o manúbrio ao processo xifóide do esterno. Ter acesso à cavidade torácica, fazendo uma pequena incisão no diafragma, logo abaixo do apêndice xifóide. </li><li> Inserir as tesouras óssea para a cavidade torácica e bisect do esterno. Cuidados devem ser tomados ao realizar este procedimento, porque o coração pode ser aderente em algum lugar para o interior do esterno. Portanto, certifique-se que a lâmina da tesoura osso repousa em todos os tempos no interior da cavidade torácica contra o interior do esterno. </li><li> Após o esterno foi dividido, coloque o afastador auto-retenção do esterno e abrir a cavidade torácica. </li><li> Se ainda intacto, fazer uma pequena incisão no pericárdio no ápice do coração e, em seguida, digitalmente abrir o saco pericárdico. </li><li> Identificar o ventrículo esquerdo, aurícula direita ea aorta, juntamente com a veia cava superior (Fig. 1C) </li><li> Faça um pequeno corte superficial perto do ápice do coração e de acesso ao ventrículo esquerdo por perfuração do miocárdio com um instrumento de ponta romba. </li><li> Insira o perfusion cânula no interior do ventrículo esquerdo e mova a ponta da cânula cranialmente para a aorta. </li><li> Quando a cânula é sentida entre os dedos na aorta, fixar a cânula no lugar com a pinça auto-holding curvas. </li><li> Faça uma incisão na aurícula direita e começar a injetar o fixador através da cânula de perfusão. O fluxo de perfusato na aorta pode ser sentida, e sangue derramará através da aurícula direita incisão como o fluxo de perfusato para os vasos minipig continua. Observe como a perfusão sistêmica com paraformaldeído induz hiperextensão dos membros e espasmos da musculatura superficial, devido à aldeído ligação transversal dos nervos e músculos. Ao utilizar um sistema de perfusão alimentado por ar comprimido em vez da gravidade, certifique-se remover a cânula, ou prender o tubo de silicone claro, antes do canister está vazio, a fim de evitar a entrada de ar no sistema vascular. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. A: A fêmea Göttingen minipig abertura uretral externo B:. A abertura da uretra após a inserção de cateter C:. Vista ventral do coração minipig após a esternotomia mediana. <img src="/files/ftp_upload/2652/2652fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. R: O sistema de perfusão consiste de tubo de entrada com uma válvula de pressão ajustável e uma alavanca usada para controle de admissão de ar comprimido dentro do recipiente mantendo o perfusato. Tubo de silicone claro liga o recipiente para uma cânula de ponta romba feita a partir de um tubo de aço 4 milímetros B e C:. Ao comprimir a alavanca de entrada, a pressão sobe no recipiente e do perfusato é propelido através da cânula D:. Quando a clara tubo de silicone e cânulas são preenchidos com perfusato, o fluxo é interrompido com uma pinça eo sistema está pronto para uso.

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</ol>

Todos os procedimentos foram aprovados pelo dinamarquês Experimental animal Inspecção do Ministério da Justiça dinamarquês e foram conduzidos de acordo com os &quot;Princípios de cuidados com animais de laboratório&quot; (NIH Publication No. 86-23, revisado em 1985).

Esta apresentação fornece instruções passo-a-passo as instruções visuais sobre como realizar quatro procedimentos freqüentemente utilizados na pesquisa minipig 12,13. As técnicas descritas podem ser utilizados com pouca ou nenhuma adaptação em suínos da raça Landrace e outros animais de pesquisa de grande porte como cães e ovelhas 14. A técnica asséptica deve ser empregada para evitar infecções, ao executar os procedimentos descritos em estudos de sobrevida. Indução da anestesia é importante para o bem-estar animal e as razões científicas, e deve fornecer ausência de reflexos da córnea e relaxamento muscular bom, antes da intubação traqueal é tentada. No entanto, porque os anestésicos usados ​​para a indução não são dadas em doses fixas, mas administrado até o efeito desejado é observado, é importante acompanhar de perto o animal, devido ao risco de apnéia, especialmente se estiver usando propofol 6,10. Para a intubação traqueal, o uso de xilocaína spray ou relaxante muscular pode facilitar a introdução do tubo, mas o uso de bloqueadores neuromusculares deve ser feito apenas por pessoal que são bem treinados em tais procedimentos, de modo a estar em conformidade com os requisitos éticos. Cuidados devem ser tomados para não traumatizar a passagem da laringe durante a intubação, a fim de evitar o inchaço da traquéia e edema. Edema das vias aéreas pode ser tratada com AINE ou similar anti-inflamatórios 10. Os porcos podem ser entubados de várias posições, mas com o animal em sua parte traseira tende a ser mais fácil para aqueles que regularmente realizar intubação humano, pois apresenta as vias aéreas de forma semelhante 6. O erro mais comum durante a intubação é a colocação inadvertida do tubo no esôfago, que está situado logo abaixo da laringe a passagem quando o animal é colocado em suas costas. Note, o tubo não deve nunca ser avançados sem primeiro identificar claramente as cartilagens aritenóides e pregas vocais. Cateterização transuretral da bexiga através da uretra é facilmente feito em suínos fêmeas, enquanto que este procedimento é extremamente difícil, talvez impossível, no sexo masculino 6. Deve-se notar que, desde o orifício da uretra feminina é anterior à vagina, a maior abertura vaginal pode ser erroneamente cateterizada. O uso de lubrificante estéril e desinfecção é aconselhável para estudos de sobrevida. Além disso, lubrificante com efeito anestésico local pode facilitar o procedimento de cateterismo. Ao realizar artéria femoral e veia catherization, a escolha de cateteres navio e como eles são garantidos diferem entre a sobrevivência não e estudos de sobrevivência, especialmente quando os cateteres são implantados por um período prolongado de tempo 6. Por exemplo, cateteres para implantação crônica deve ser altamente biocompatível, tem contas a retenção ou punhos para fixação, bem como não traumatizar a parede do vaso ao longo do tempo, induzindo a trombose ou erosão 6. No vídeo presente, nós usamos um sistema fechado alimentado por ar comprimido para perfusão transcardial. Outra opção é usar um sistema orientado pela gravidade. A vantagem dos sistemas de gravidade em comparação com sistemas que utilizam ar comprimido é que eles são simples, eficientes e não apresentam risco de ar pressurizado entrar no sistema vascular. No entanto, a pressão hidrostática exercida pela gravidade sistemas muda continuamente durante a perfusão, e isso pode afetar os resultados histológicos 15. Dependendo de qual tipo de estudos histopatológicos se quer executar, pode ser vantajoso para perfundir o animal com solução salina heparinizada primeiro. Este é importantance especial ao realizar a coloração de imunofluorescência, a fim de evitar problemas causados ​​por autofluorescência eritrócitos. Além disso, se o órgão de interesse é o cérebro, a aorta descendente poderia ser fixada para salvar fixador. No entanto, em suínos, este passo implica adicionais dissecação e irá prolongar o procedimento.

<table border="1"><tbody><tr><th> Procedimento </th><th> Equipamento </th><th> Companhia </th><th> Catálogo número </th></tr><tr><td> Intubação </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Respirador </td><td> Datex-Ohmeda S / S Avance, a GE Healthcare </td><td> 1009-9002-000 </td></tr><tr><td></td><td> Sucção com ponta romba </td><td> Unomedical </td><td> 34091181 </td></tr><tr><td></td><td> Laringoscópio </td><td> Moleiro </td><td> 85-0045 (set Laringoscópio) </td></tr><tr><td></td><td> Tubo endotraqueal 5,5 mm de diâmetro </td><td> Smiths Medical International Ltd. </td><td> 100/199/055 </td></tr><tr><td></td><td> Estilete </td><td> Hudson RCI </td><td> 5-151001 </td></tr><tr><td></td><td> 5ml seringa </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Estetoscópio </td><td> Martin </td><td> 17-262-00 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Catherization bexiga </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> AquaFlate glicerina silicone cateter Foley 8-francês com estilete </td><td> Rüsch </td><td> 178003 </td></tr><tr><td></td><td> Espéculo nasal </td><td> Martin </td><td> 36-859-50 </td></tr><tr><td></td><td> Espéculo retal </td><td> Martin </td><td> 30-613-15 </td></tr><tr><td></td><td> Blunt-ponta forceps </td><td> Martin </td><td> 13-374-16 </td></tr><tr><td></td><td> Gel lubrificante cateter </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Cathejell lidocaína </td><td> Montavit </td><td> CJL08501 </td></tr><tr><td></td><td> Comb Instillagel. </td><td> FARCO Pharma </td><td> 08-40-200 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> A4 bolsa de drenagem de urina </td><td> Unomedical </td><td> 38 155 1S </td></tr><tr><td></td><td> Fita adesiva </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Artéria femoral e veia catherization </</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Bisturi </td><td> Martin </td><td> 10-295-11 </td></tr><tr><td></td><td> Blunt-ponta tesoura cirúrgica </td><td> Martin </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> Pinça </td><td> Martin </td><td> 12-100-14 </td></tr><tr><td></td><td> Pequena blunt-ponta pinça cirúrgica </td><td> Martin </td><td> 13-375-13 </td></tr><tr><td></td><td> Retrator Tissue pequena auto-retenção </td><td> Martin </td><td> 15-753-13 </td></tr><tr><td></td><td> Needleholder </td><td> Martin </td><td> 20-634-14 </td></tr><tr><td></td><td> Swaps cirúrgica </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Sutura com agulha </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Salina </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Heparina </td><td> LEO </td><td> 585679 </td></tr><tr><td></td><td> Calibre 18-venflon </td><td> BD Venflon Pro </td><td> 393206 </td></tr><tr><td></td><td> 4-brite francês bainhas ponta com introdutor e guia de arame Seldinger </td><td> Cordis </td><td> 154-2629-1/0017 </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Perfusão Transcardial </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Sistema de perfusão sob pressão </td><td> Casa feita a partir de peças disponíveis na maioria das lojas de ferragens profissional </td><td></td></tr><tr><td></td><td> Sistema de extracção de fumos </td><td> Gram A / S </td><td> 01750000 e 0303700 </td></tr><tr><td></td><td> Perfusant 5L </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Blunt-ponta tesoura cirúrgica </td><td> Martin </td><td> 11-881-18 </td></tr><tr><td></td><td> Tesouras óssea </td><td> FST </td><td> 16150-24 </td></tr><tr><td></td><td> Grandes curvas ponta auto-retenção forceps </td><td> Martin </td><td> 13-421-18 </td></tr><tr><td></td><td> Auto-retenção afastador esternal </td><td> Rudolf Medical </td><td> 7520-10 </td></tr><tr><td></td><td> Pentobarbital</td><td> TheRoyal Veterinária e Agrícola University (KVL) </td><td> 200 mg / ml </td></tr><tr><td></td><td> 22 calibre venflon </td><td> BD Venflon Pro </td><td> 393202 </td></tr></tbody></table>

básico técnicas cirúrgicas na minipig göttingen: intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão transcardial

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

O surgimento do minipig Göttingen na pesquisa de temas como a neurociência, toxicologia, diabetes, obesidade e cirurgia experimental reflete a estreita semelhança destes animais à anatomia e fisiologia humana 1-6. O tamanho da minipig Göttingen permite o uso de cirurgia equipamentos e avançados métodos de imagem semelhantes aos usados ​​em humanos 6-8. O objetivo deste vídeo-aula é aumentar a consciência sobre o valor dos porquinhos na pesquisa biomédica, demonstrando como executar a intubação traqueal, cateterismo vesical transuretral, artéria femoral e cateterização da veia, bem como a perfusão transcardial. Intubação endotraqueal deve ser realizada sempre que um minipig sofre anestesia geral, porque mantém uma via aérea patente, permite ventilação assistida e protege as vias aéreas dos aspirados. Cateterismo vesical transuretral pode fornecer informações úteis sobre sobre o estado de hidratação, bem como função renal e cardiovascular durante longos procedimentos cirúrgicos. Além disso, cateterismo urinário podem evitar a contaminação de equipamentos médico-técnica delicada e extensão da bexiga dolorosa que pode prejudicar o animal e desnecessariamente influência do experimento devido ao aumento do tônus ​​vagal e alteração nos parâmetros fisiológicos. Cateterização arterial e venosa é útil para a obtenção de amostras de sangue repetidas e monitoramento de vários parâmetros fisiológicos. Cateterização de vasos femorais é preferível a cateterização dos vasos do pescoço para maior facilidade de acesso, quando a realização de experimentos envolvendo frame-based neurocirurgia estereotáxica e imagiologia cerebral. Ao realizar o cateterismo navio em estudos de sobrevida, técnica asséptica rigorosa deve ser empregada para evitar infecções 6. Perfusão Transcardial é o método de fixação mais eficaz, e produz resultados de destaque na elaboração de órgãos minipig para histologia e histoquímica 2,9. Para mais informações sobre a cirurgia anestesia e técnicas experimentais em suínos, em geral nos referimos a Swindle 2007. Informações suplementares sobre a pré-medicação e indução da anestesia, ventilação assistida, analgesia, cuidados pré e pós-operatório de Göttingen porquinhos estão disponíveis através da Internet em <a href="http://www.minipigs.com">http://www.minipigs.com</a> 10. Para informações completas sobre anatomia suína nos referimos a Nickel et al. Vol. 01-05 novembro.

O uso de suínos domésticos e em miniatura na ciência tem aumentado significativamente nos últimos anos. Ao demonstrar como executar a intubação, cateterismo vesical transuretral, artéria femoral e cateterização da veia, bem como a perfusão transcardial, pretendemos aumentar ainda mais o valor de Göttingen minipigs na pesquisa biomédica.

Básico Técnicas Cirúrgicas na Minipig Göttingen: Intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão Transcardial

A emergência do minipig de Göttingen em pesquisas sobre temas como neurociência, toxicologia, diabetes, obesidade e cirurgia experimental reflete ...

A entubação endotraqueal deve ser realizada sempre que um mini porco for submetido à anestesia geral para facilitar a cirurgia, pois mantém uma via aérea permeável, permite ventilação assistida e protege as vias aéreas contra aspiração. Mini porcos podem ser entubados em várias posições, mas posicionar o animal em decúbito dorsal costuma ser mais fácil para quem realiza rotineiramente entubação em humanos, pois apresenta a via aérea de maneira semelhante e facilita os meios de ventilação assistida. Os equipamentos necessários para a entubação endotraqueal são tiras para abrir a boca, aspiração de baixa pressão com ponta romba, laringoscópio veterinário com lâmina reta entre 17 e 25 centímetros de comprimento, estilete, seringa com ar, estetoscópio e fita adesiva.Para evisceração de adultos e porquinhos-da-índia. Um tubo endotraqueal com diâmetro de cinco a sete milímetros é apropriado. Neste vídeo, foi utilizado um tubo de 5,5 milímetros.O porco miniatura é colocado em decúbito dorsal e adequadamente sustentado. Para garantir que a passagem laríngea permaneça reta, a língua é levemente puxada para fora e a mandíbula mantida aberta por um assistente. Sem hiperextender a rotação da cabeça, pois a extensão excessiva da cabeça pode obstruir as vias aéreas, tornando mais difícil identificar a abertura laríngea.O laringoscópio é usado para pressionar a língua para baixo e a ponta da cânula de aspiração é utilizada para deslocar a epiglote do palato mole. Em seguida, a ponta do laringoscópio é usada para pressionar a epiglote para cima, em direção à base da língua, revelando a abertura laríngea. Com a abertura das cartilagens aritenoides, as pregas vocais tornam-se visíveis e o tubo endotraqueal é avançado suavemente, com uma leve rotação, para dentro da traqueia.Durante a expiração, o balonete do tubo é inflado de acordo com as especificações do fabricante. Tomando cuidado para evitar a superinflação, que pode causar inchaço e edema das vias aéreas, os porcos possuem um brônquio para ventilar o lobo pulmonar cranial direito. É, portanto, importante posicionar o tubo acima da bifurcação da traqueia.Isso é facilitado pelo uso do tamanho correto do tubo e pelo fixamento da extremidade proximal do tubo ao nível da focinheira com fita adesiva. Quando o mini porco estiver adequadamente entubado, deve-se sentir uma passagem livre de ar através do tubo e a ausculta torácica deve revelar sons respiratórios tanto no lado esquerdo quanto no direito do tórax. Após conectar o ventilador com o sistema de monitoramento ao mini porco, devem ser mensuráveis os valores fisiológicos de dióxido de carbono expiratório, e pode-se observar a curva de dióxido de carbono que segue o padrão respiratório determinado pelos ajustes do ventilador.A intubação endotraqueal de mini suínos pode ser desafiadora porque a passagem laríngea é estreita e a membrana mucosa das cordas vocais é facilmente traumatizada. Se um tubo muito grande ou força excessiva for utilizado, o uso de spray de Xilocaína ou relaxante muscular pode facilitar a introdução do tubo. Contudo, o uso de bloqueadores neuromusculares deve ser realizado apenas por pessoal bem treinado nesses procedimentos.A cateterização da bexiga pode ser utilizada como um método para monitorar a produção urinária, o que pode fornecer informações úteis sobre o estado de hidratação, bem como a função renal e cardiovascular durante procedimentos cirúrgicos prolongados. A cateterização da bexiga urinária através da uretra é facilmente realizada em porcas. Embora este procedimento seja extremamente difícil, talvez impossível em machos de mini porcos adultos, um cateter de Foley número oito ou dez na escala francesa é apropriado devido à curvatura e ao tamanho da uretra externa.A abertura de um cateter com fio guia é preferível. O equipamento necessário inclui um espéculo, pinça de ponta romba, uma seringa com lubrificante salino e uma bolsa de drenagem urinária de sistema fechado. Para visualizar da melhor forma o orifício uretral externo durante a cateterização, o mini porco é posicionado em decúbito dorsal com suporte na região lombar.Enquanto um assistente puxa as patas traseiras em direção cranial, a abertura uretral externa feminina localiza-se no assoalho da vagina, aproximadamente a um terço até a metade da distância até o colo do útero. No entanto, como o animal está posicionado em decúbito dorsal, a posição da abertura uretral parecerá invertida. O cateter é manipulado com pinça de ponta romba, de modo que a ponta do cateter esteja em continuação com a pinça.Insira cuidadosamente o cateter na abertura uretral. A uretra pode ser facilmente traumatizada se for usada força excessiva durante a cateterização; no entanto, pode-se sentir inicialmente uma leve resistência até que o cateter ultrapasse o esfíncter urinário externo. Se esse problema persistir, isso pode indicar que o animal não está suficientemente sedado.A solução é esperar um pouco e deixar a anestesia fazer efeito. À medida que o cateter atinge a bexiga, remova o estiloide e observe o fluxo de urina. Inflar o balão com soro fisiológico de acordo com as especificações do fabricante e puxar suavemente o cateter até que o balão prenda no colo da bexiga.Conecte a bolsa de drenagem urinária de sistema fechado e fixe o cateter à cauda com fita adesiva para evitar o deslocamento acidental do cateter. Ao manipular o animal com treinamento e experiência adequados, a cateterização vesical transuretral pode ser realizada com pouca dificuldade. Este procedimento minimamente invasivo pode prevenir a contaminação de equipamentos médicos delicados e a distensão dolorosa da bexiga, o que poderia prejudicar o animal e influenciar o experimento devido ao aumento do tônus vagal e a alterações nos parâmetros fisiológicos.A cateterização arterial e venosa é útil para obter amostras sanguíneas repetidas e monitorar diversos parâmetros fisiológicos. Ao realizar a cateterização de vasos em estudos de sobrevivência, deve-se empregar uma técnica asséptica rigorosa para evitar infecções. O equipamento necessário inclui bisturi, ponta romba, tesoura cirúrgica, pinça para tecidos, pequena ponta romba, pinça cirúrgica, pequeno retrator de tecidos auto-retrátil, porta-agulhas, cotonetes cirúrgicos, sutura com agulha e solução salina heparinizada como fluido de lavagem para manter a perviedade do cateter.Duas cânulas IV de calibre 18 e duas bainhas de ponta brilhante de dois a quatro French com introdutor e fio guia Seldinger G. A profundidade da anestesia é avaliada testando o reflexo de dor interdigital. A artéria e a veia femorais são acessadas com o porquinho-da-índia posicionado em decúbito dorsal e a perna traseira retratada lateralmente.Identifique na prega da pele entre o músculo grácil e o sartório o local onde a pulsação da parte superficial da artéria safena medial desaparece. Faça uma incisão cutânea superficial longitudinal na direção cranial a esse ponto, evitando assim danificar acidentalmente os vasos safenos mediais. Utilize uma tesoura de ponta romba para dissecar o tecido subcutâneo subjacente.A divisão da fáscia dos músculos sartório e grácil é realizada cranialmente ao local de penetração dos vasos safenos mediais. Primeiro com uma pequena pinça cirúrgica de ponta romba, e depois digitalmente, os dois grupos musculares são separados com um pequeno retrator tecidual auto-retrátil, tomando cuidado para não danificar o nervo e os vasos femorais; a artéria é isolada por um comprimento de aproximadamente um a dois centímetros. Usando dissecação romba, gire a agulha venflon biselada para que a luz fique voltada para cima.Dobre um pouco a agulha para que ela siga mais facilmente a curvatura do vaso. Lembre-se de testar se a agulha ainda pode se mover para frente e para trás. A artéria é punçurada.A agulha é recolhida e o fio-guia Seldinger é inserido através do tubo Venton. Remova o tubo Venflon enquanto aplica suavemente pressão sobre a artéria para garantir a fixação do fio G. A bainha com introdutor é inserida sobre o fio Salter e avançada até a posição desejada, após o que o introdutor e o fio Seing ou o fio são removidos.A veia femoral situa-se logo abaixo e medialmente à artéria. Após isolar a veia por meio de dissecação romba, a veia é canulada conforme descrito anteriormente para a artéria. Para verificar se tanto a artéria quanto a veia foram corretamente cateterizadas, retire sangue de ambas as bainhas e compare a cor das amostras.Sempre que coletar uma amostra de sangue, lembre-se de, posteriormente, lavar os cateteres com solução salina heparinizada. Para manter a perviedade dos cateteres, eles são fixados e a pele é fechada. Com alguns pontos, um laço vascular pode ser colocado ao redor da artéria e da veia para fixar os vasos antes da punção.Apesar de suas vantagens, geralmente evitamos esta etapa adicional porque exige uma dissecação excessiva dos vasos e aumenta o risco de danificar os ramos laterais e profundos. As imagens atuais demonstram como cateterizar os vasos femorais. A cateterização dos vasos femorais é preferível à cateterização dos vasos do pescoço pela facilidade de acesso.Ao realizar experimentos que envolvem cirurgia neurológica estereotáxica baseada em moldura e imagem cerebral, a perfusão transcardial é o método de fixação mais eficaz e fornece resultados preeminentes. Ao preparar órgãos de porquinhos-da-índia para histologia e histoquímica, o seguinte equipamento é necessário para o procedimento: sistema de perfusão, fluidos de perfusão relevantes, seringa com cânula intravenosa, pentobarbital, bisturi, ponta romba, tesoura cirúrgica, tesoura óssea e duas pinças grandes de retenção automática, das quais pelo menos uma possui ponta curva.Um afastador esternal auto-retrátil não é absolutamente necessário, mas facilita consideravelmente o procedimento. A perfusão transcardial deve ser realizada em um ambiente bem ventilado, com um sistema potente de exaustão de vapores e instalações que permitam a coleta de grandes volumes de líquidos e sangue para descarte seguro posterior. Após a injeção de uma dose letal de pentobarbital, teste o reflexo da dor interdigital.O melhor acesso ao coração e à aorta é obtido por meio de uma esternotomia mediana. Faça uma incisão longitudinal profunda na pele, estendendo-se do manúbrio até o processo xifoide do esterno. Obtenha acesso à cavidade torácica fazendo uma pequena incisão no diafragma logo abaixo do processo xifoide.Insira as tesouras ósseas na cavidade torácica e biseccione o esterno; é necessário ter cuidado ao realizar este procedimento, pois o coração pode estar aderido em algum ponto à face interna do esterno. Após a divisão do esterno, introduza o retrator esternal auto-retrátil e abra a cavidade torácica; se ainda estiver íntegra, faça uma pequena incisão no pericárdio no ápice do coração e, em seguida, abra digitalmente a bolsa pericárdica. Identifique o ventrículo esquerdo, o átrio direito e a aorta.Juntamente com a veia cava superior, faça um pequeno corte superficial próximo ao ápice do coração e acesse o ventrículo esquerdo perfurando o miocárdio com um instrumento de ponta romba. Insira a cânula de perfusão dentro do ventrículo esquerdo e mova a ponta da cânula cranialmente para dentro da aorta. Quando a cânula for sentida entre o segundo e o terceiro dedo na aorta, fixe a cânula com um grampo.Com a pinça curva autoportante, faça uma incisão no orifício direito e comece a injetar o fixador através da cânula de perfusão. O fluxo abundante de oito na aorta pode ser sentido e o sangue irá derramar pelo orifício direito incisado à medida que o fluxo de oito perfundido prossegue nos vasos do mini porco. Observe como a perfusão sistêmica com paraformaldeído induz hiperextensão dos membros e contrações da musculatura superficial devido à ligação cruzada por aldeído dos nervos e músculos.Ao utilizar um sistema de perfusão movido a ar comprimido, certifique-se de remover a cânula ou prender o tubo de silicone transparente antes que o frasco fique vazio, a fim de evitar a entrada de ar no sistema vascular. No presente vídeo, utilizamos um sistema de perfusão movido a ar comprimido em vez de gravidade. A vantagem dos sistemas que utilizam ar comprimido é que a pressão hidrostática exercida é constante durante o processo, proporcionando, em última instância, a melhor perfusão orgânica.

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JoVE Journal

Medicine

Medicina

Um método para semeadura de titânio de sangue entrar em contato com biomateriais com células autólogas e biocompatibilidade teste é descrito. Este método utiliza células progenitoras endoteliais e tubos de titânio, semeadas em poucos minutos de implante cirúrgico em suínos as cavas. Esta técnica é adaptável a muitas outras implantáveis ​​dispositivos biomédicos.

Autólogas progenitoras endoteliais Cell Technology Semear e Teste de biocompatibilidade para dispositivos Cardiovascular em Modelo Animal Grande

O vídeo demonstra um procedimento para obter acesso vascular em um porco anestesiado usando orientação por ultrassom. Após desinfetar o local e administrar anestesia local, uma sonda de ultrassom é usada para visualizar os vasos sanguíneos. Sob orientação de ultrassom, uma agulha é inserida no lúmen arterial, um fio-guia estabelece um trajeto e uma bainha é inserida e lavada com anticoagulante. Finalmente, uma linha de pressão é conectada e a bainha é presa com suturas para garantir um acesso...

Um procedimento de acesso vascular guiado por ultrassom em um porco anestesiado

lavagens pulmonares repetidas em porcos anestesiados induzir lesão pulmonar que assemelha-se os principais aspectos da síndrome da angústia respiratória aguda humana (ARDS). Para este efeito, os pulmões são repetidamente lavados com solução salina a 0,9% a 37 ° C. O objetivo do protocolo é uma atenuação reprodutível de trocas gasosas e hemodinâmica para a investigação em ARDS.

induzida por lavagem de surfactante Esgotamento em porcos como modelo da Síndrome da Angústia Respiratória Aguda (SARA)

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Uso de um Modelo de Leitão para o Estudo da Neurotoxicidade de Desenvolvimento induzida por Anestesismo (AIDN): Uma Abordagem de Neurociências Translacionais

Um protocolo é descrito para a perfusão in situ do corpo inferior do camundongo, incluindo a bexiga, a próstata, órgãos sexuais, osso, músculo e pele do pé.

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Guia de Cateterismo Fio Assistida e injeção de corante colorido para o Mapeamento de Vascular monocoriônicas placentas gêmeas

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Básico Técnicas Cirúrgicas na Minipig Göttingen: Intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão Transcardial (Vídeo) | JoVE Journal

Básico Técnicas Cirúrgicas na Minipig Göttingen: Intubação, cateterismo vesical, cateterização veia femoral e perfusão Transcardial

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