Name: Métodos para ECG Avaliação de Indicadores de risco cardíaco e Susceptibilidade à Aconitina arritmias induzidas em ratos após a Estado Epiléptico (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Aprenda a avaliar a função cardíaca elétrica e a suscetibilidade a arritmias ventriculares em ratos após crises epilépticas usando ECG e infusão de aconitina. Este método ajuda a prever riscos de morte súbita cardíaca.

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Esta pesquisa foi suportada por uma concessão do United Cidadãos de Investigação em Epilepsia (CURE) para SLB.

<p class="jove_title"&gt; 1. Materiais para Construção</p&gt;<ol&gt;<li&gt; Um cateter da veia jugular é construído a partir de uma peça (100 mm) da PE-50 tubos de polietileno, chanfrada em uma extremidade, e depois preenchido com solução salina com heparina (50 U de heparina / ml salina).</li&gt;<li&gt; A gravação do ECG eletrodos são construídos a partir de dois comprimentos de 100 mm de fio de prata isolados (30AWG). Uma extremidade de ambos os fios é despojado e soldada a um microconector, eo isolamento é torcido para formar um terceiro fio que é usado como terra. Cinco milímetros de isolamento é retirado da extremidade distal dos fios e descartados.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 2. Implantação do cateter da veia jugular</p&gt;<ol&gt;<li&gt; Anesthetize o animal pela administração de uretano, ip (1,2 g / kg).</li&gt;<li&gt; Verifique regularmente (intervalos de 10 min) profundidade da anestesia através da avaliação da resposta retirada pedal e / ou reflexos oculares. Se necessário, complementar a anestesia.</li&gt;<li&gt; Depois que o animal está no plano adequado de anestesia, raspar o lado direito do pescoço da clavícula até o queixo.</li&gt;<li&gt; Faça uma incisão longitudinal (10-15 mm) na pele acima da artéria carótida e abrir a incisão.</li&gt;<li&gt; Usando técnicas de dissecção romba, espalhar o músculo subjacente para localizar e isolar a veia jugular direita.</li&gt;<li&gt; Coloque dois pedaços de seda cirúrgica (# 2) sob a veia jugular, e posicione a sutura da porção mais rostral e caudal da incisão. Amarrar a ligadura rostral interromper o fluxo através da veia.</li&gt;<li&gt; Recolha a ligadura caudal para levantar o navio fora do tecido subjacente e fazer um pequeno corte. Em seguida, insira a extremidade chanfrada da heparina cateter preenchido PE-50 (50 U / ml salina) de polietileno (100 mm de comprimento), e avançar a ponta cerca de 8 mm ao nível do átrio direito.</li&gt;<li&gt; A fim de garantir o cateter, amarrar a ligadura caudal em torno de ambos navio e cateter. Finalmente, feche a ferida com clips ou ferida ou sutura.</li&gt;<li&gt; Durante a implantação do cateter, a extremidade exposta ou é presa com uma pinça hemostática ou conectado para evitar o refluxo de sangue antes de apego a uma bomba de infusão.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 3. Implantação de eletrodos CG</p&gt;<ol&gt;<li&gt; Coloque o animal em suas costas e raspar o peito.</li&gt;<li&gt; Para a colocação dos eletrodos, fazer duas incisões longitudinais (≈ 10 mm), um no canto superior direito e um nos quadrantes inferior esquerdo do peito, ea pele sobrejacente livre para expor os músculos do tórax.</li&gt;<li&gt; Suture um dos expostos de 5 mm pontas dos eletrodos de prata-wire para os músculos do tórax em cada uma das áreas expostas, e coloque o eletrodo terra por via subcutânea.</li&gt;<li&gt; Feche a incisões com grampos de sutura e ligue o microconector para o dispositivo de gravação.</li&gt;<li&gt; Envolva o animal frouxamente em uma toalha para manter a temperatura corporal durante o procedimento.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 4. Gravação de ECG</p&gt;<ol&gt;<liGravações&gt; são feitas usando um Powerlab Aquisição de Dados do Sistema e Macintosh computador ou hardware similar / software (amplificado, 50X; filtrado, 1000-1000 Hz).</li&gt;<li&gt; Depois de um período de equilíbrio 20-30 min, o registro ECG durante 20 min.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 5. Indução de arritmias ventriculares</p&gt;<ol&gt;<li&gt; Coloque o cateter da veia jugular a uma seringa remoto colocado em uma bomba de infusão programável.</li&gt;<li&gt; Iniciar a infusão aconitina a uma taxa para fornecer uma dose constante de 5 ug / kg / min durante 7 minutos.</li&gt;<li&gt; Após a fibrilação ventricular ou o fim do período de infusão, eutanásia do animal usando um procedimento aprovado.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 6. Análise do ECG</p&gt;<ol&gt;<li&gt; O intervalo QT representa a duração total da atividade elétrica ventricular. Fig. 1 mostra um modelo de registro ECG ea duração do intervalo QT. Calcule o tempo médio entre o início da onda Q e terminação da onda T para todos os batimentos cardíacos gravados ao longo de um intervalo de cinco minutos obtida durante o período de gravação de 20 min.</li&gt;<li&gt; Para corrigir o intervalo QT para as diferenças na freqüência cardíaca (QTc), use a fórmula de Bazett, QTc = QT / (RR)<sup&gt; ½</sup&gt;, Onde RR é o intervalo médio entre os batimentos. O intervalo RR é calculada como a duração entre sucessivas ondas Q obtidos durante o período analisado.</li&gt;<li&gt; A dispersão QT (QTd) é calculado subtraindo-se o QT mínima do QT máxima registrada para cada animal.</li&gt;</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 7. Análise da variabilidade da freqüência cardíaca</p&gt;<ol<liProgramas&gt; Software (ie LabChart 7, ADInstruments, Inc.) que analisam a variabilidade nos intervalos RR obtidos durante o período de análise são usados ​​para o cálculo automatizado de variância temporal e / ou espectral da frequência cardíaca.</li</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 8. Análise da susceptibilidade a arritmias ventriculares</p&gt;<ol<li&gt; Calcular a latência do início da infusão aconitina à contração ventricular prematura primeiro (PVC, fig. 2, Painel 1), taquicardia ventricular (VT, Fig, 2, Painel 2) e fibrilação ventricular (VF, Fig. 2. Painel 3 ).</li</ol&gt;<p class="jove_title"&gt; 9. Resultados representante</p&gt;<p class="jove_content"&gt; Figura. 3 ilustra uma medida da VFC no domínio espectral (root mean squared do desvio padrão do intervalo RR, RMSSD) em ratos controle e em animais que foram submetidos SE uma semana antes do teste. Esta medida da VFC, o que representa mudanças no controle parassimpático da função cardíaca<sup&gt; 26</sup&gt;, É significativamente diminuída em animais após estado de mal epiléptico. Fig. 4 mostra que tanto o intervalo QT corrigido (QTc, Painel A) e dispersão do QT (QTd, Painel B) são significativamente aumentados de duas semanas após SE<sup&gt; 27</sup&gt;. Tomados em conjunto, esses dados prevêem que SE aumenta o risco de arritmias ventriculares. Esta previsão é confirmada pelos resultados que os períodos de infusão aconitina necessário para levar a arritmias experimental (PVC, VT, VF) observado nestes estudos foram significativamente menores nos animais após SE (Fig. 5)<sup&gt; 27</sup&gt;.</p&gt;<p class="jove_content"<img src="/files/ftp_upload/2726/2726fig1.jpg" alt="figure 1" /<br /<strong&gt; Figura 1.</strong&gt; Modelo de gravação ECG de um batimento cardíaco normal, mostrando P, QRS e ondas T. O intervalo QT é calculado como o tempo entre as linhas tracejadas.</p&gt;<p class="jove_content"<img src="/files/ftp_upload/2726/2726fig2.jpg" alt="figure 2" /<br /<strong&gt; Figura 2. Painel 1)</strong&gt; Contrações ventriculares prematuras (PVC) são isolados contracções dos ventrículos (B) que ocorrem entre batimentos cardíacos normais (A). Gravações de PVC são caracterizadas pela ausência de ondas P e T.<strong&gt; Painel 2</strong&gt; A taquicardia ventricular (VT) é uma série de contrações ventriculares múltiplas (C) que ocorrem sem batimentos cardíacos intervir normal (A).<strong&gt; Painel 3</strong&gt; A fibrilação ventricular (FV) é a falta de ritmo perceptível e nenhuma associação entre QRS e as ondas P (D).</p&gt;<p class="jove_content"<img src="/files/ftp_upload/2726/2726fig3.jpg" alt="figure 3" /<br /<strong&gt; Figura 3.</strong&gt; O root mean squared do desvio padrão (RMSSD; ms) dos intervalos entre os batimentos cardíacos observados em ratos controle e em animais submetidos a status epilepticus (SE) 1 semana antes do teste. ** P &lt;0,01 comparado ao controle.</p&gt;<p class="jove_content"<img src="/files/ftp_upload/2726/2726fig4.jpg" alt="figure 4" /<br /<strong&gt; Figura 4.</strong&gt; A média do intervalo QT corrigido (Painel A) e dispersão do QT (Painel B) calculado a partir de gravações de ECG obtidos de animais controle (Cont) e de ratos submetidos a estado de mal epiléptico (SE) duas semanas antes do teste. * P &lt;0,05 em comparação com Cont. (Metcalf, et al. Am. J. Physiol. Coração e Circ, 2009, Am Soc Physiol, usada com permissão do<sup&gt; 27</sup&gt;).</p&gt;<p class="jove_content"<img src="/files/ftp_upload/2726/2726fig5.jpg" alt="figure 5" /<br /<strong&gt; Figura 5.</strong&gt; As latências (s) entre o início da infusão aconitina ea primeira contração ventricular prematura (PVC), taquicardia ventricular (VT) e fibrilação ventricular (VF) em animais controle (Cont) e ratos submetidos a estado de mal epiléptico (SE) duas semanas antes do teste. * P &lt;0,05, ** p &lt;0,01 em comparação com Cont. (Metcalf, et al. Am. J. Physiol. Coração e Circ, 2009, Am Soc Physiol, usada com permissão do<sup&gt; 27</sup&gt;).</p&gt;

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</ol>

Dois aspectos dos procedimentos descritos são de importância crítica. Em primeiro lugar, a taxa de administração aconitina para o coração deve ser equivalente em animais. Isto requer a colocação consistente das dicas veia jugular cateter em relação ao coração, e ajuste cuidadoso da taxa de infusão. A taxa de entrega aconitina ao coração deve ser igual, a fim de avaliar adequadamente o aparecimento de arritmias ventriculares em relação a susceptibilidade alterada. Se a entrega aconitina varia, então a latência para arrit...

métodos para ecg avaliação de indicadores de risco cardíaco e susceptibilidade à aconitina arritmias induzidas em ratos após a estado epiléptico

Methods for ECG Evaluation of Indicators of Cardiac Risk, and Susceptibility to Aconitine-induced Arrhythmias in Rats Following Status Epilepticus

Letais arritmias cardíacas contribuem para a mortalidade em uma série de condições patológicas. Vários parâmetros obtidos a partir de um não-invasiva, eletrocardiograma facilmente obtidos (ECG) são estabelecidas, bem validadas indicadores prognósticos de risco cardíaco em pacientes que sofrem de uma série de cardiomiopatias. Aumento da freqüência cardíaca, diminuição da variabilidade da freqüência cardíaca (VFC), e aumento da duração e da variabilidade da atividade elétrica cardíaca ventricular (intervalo QT) são indicativos de maior risco cardíaco 1-4. Em modelos animais, é importante comparar esses ECG derivados variáveis ​​e susceptibilidade a arritmias induzida experimentalmente. Infusão intravenosa do agente aconitina arritmogênica tem sido amplamente utilizada para avaliar a susceptibilidade a arritmias em uma variedade de condições experimentais, incluindo modelos animais de depressão e hipertensão 5 6, 7 após o exercício e exposição a poluentes atmosféricos 8, bem como a determinação dos antiarrítmicos eficácia dos agentes farmacológicos 9,10. Note-se que a dispersão do intervalo QT em humanos é uma medida da variação do intervalo QT em todo o conjunto completo de cabos de um padrão de 12 derivações ECG. Consequentemente, a medida de dispersão QT do ECG duas derivações em ratos descrita neste protocolo é diferente do que o calculado a partir de registros ECG humano. Isso representa uma limitação na tradução dos dados obtidos de roedores à medicina clínica humana. Estado de mal epiléptico (SE) é uma crise única ou uma série de convulsões recorrentes continuamente com duração superior a 30 min 11,12 11,12, e os resultados na mortalidade em 20% dos casos 13. Muitas pessoas sobrevivem da SE, mas morrer dentro de 30 dias 14,15. O mecanismo (s) desta mortalidade tardia não é totalmente compreendido. Tem sido sugerido que arritmias ventriculares letais contribuir para muitas destas mortes 14-17. Além de SE, os pacientes com crises recorrentes de forma espontânea, epilepsia ou seja, estão em risco de morte súbita prematura e inesperada associada a epilepsia (SUDEP) 18. Tal como acontece com SE, os mecanismos precisos mediação SUDEP não são conhecidos. Tem sido proposto que as anormalidades e arritmias ventriculares resultando uma contribuição significativa 18-22. Para investigar os mecanismos de apreensão relacionados com morte cardíaca, ea eficácia de terapias cardioprotetor, é necessário obter os dois indicadores ECG derivados de risco e avaliar a susceptibilidade a arritmias cardíacas em modelos animais de doenças convulsivas 23-25. Aqui nós descrevemos métodos para o implante de eletrodos ECG na Sprague-Dawley laboratório de ratos (Rattus norvegicus), seguindo SE coleta e análise de gravações de ECG, e indução de arritmias durante a infusão intravenosa de aconitina. Estes procedimentos podem ser usados ​​para determinar diretamente as relações entre ECG derivados medidas de atividade elétrica cardíaca e susceptibilidade a arritmias ventriculares em modelos de ratos de distúrbios convulsivos, ou qualquer patologia associada com maior risco de morte súbita cardíaca.

Técnicas de medição da atividade elétrica do coração pelo eletrocardiograma (ECG), e análise de fatores de risco cardíaco e susceptibilidade a arritmias após estado de mal epiléptico (SE) no rato são descritos.

Métodos para ECG Avaliação de Indicadores de risco cardíaco e Susceptibilidade à Aconitina arritmias induzidas em ratos após a Estado Epiléptico

Arritmias cardíacas letais contribuem para a mortalidade em diversas condições patológicas. Vários parâmetros obtidos a partir de um método não invasivo e simples...

O objetivo geral deste procedimento é avaliar a função cardíaca elétrica e a suscetibilidade a arritmias ventriculares em animais experimentais após convulsões. Isso é realizado primeiramente inserindo um cateter de infusão em uma veia jugular de um animal que sofreu atividade convulsiva. Em seguida, eletrodos são implantados nos músculos torácicos para registrar eletrocardiogramas cardíacos ou ECGs.Os ECGs são então registrados em condições controle e durante a infusão intravenosa jugular de um agente que induz arritmias cardíacas. Por fim, os registros de ECG são avaliados. Em última análise, podem ser obtidos resultados que demonstram que as convulsões alteram a função cardíaca elétrica e aumentam o risco de arritmias ventriculares letais.Por meio da análise de registros de ECG, as alterações no ECG induzidas por convulsões podem servir como indicador prognóstico do risco de morte cardíaca súbita. A principal vantagem dessa técnica é que esses procedimentos, não invasivos em humanos, produzem registros da atividade elétrica do coração que podem ser utilizados para prever o risco de arritmias cardíacas letais. Além disso, em modelos animais, as alterações na atividade cardíaca po

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Neste vídeo, descrevemos a gravação simultânea de vídeo, EEG, ECG e pistas respiratórias em um modelo de coelho em resposta ao medicamento administrado por via oral para entender a sequência de eventos que levam à convulsão. O modelo pode ser usado para testar medicamentos potenciais para sua segurança neurocardíaca.

Monitoramento multissistêmico em modelo de coelho: um método para avaliar parâmetros neurocardíacos e respiratórios para estudar os gatilhos induzidos por drogas orais para arritmia e convulsões

Neste vídeo, demonstramos um método de monitoramento multissistêmico para avaliar anormalidades neurológicas e cardiorrespiratórias durante a injeção intravenosa de um medicamento indutor de convulsões. O monitoramento simultâneo dos parâmetros de vídeo EEG, ECG, oximetria e capnografia ajuda a entender as alterações fisiológicas em tempo real associadas às crises epilépticas.

Monitoramento multissistêmico de anormalidades epilépticas em coelhos: um método para gravação simultânea de vídeo EEG, ECG, capnografia e oximetria durante convulsões induzidas

Este vídeo demonstra o registro eletroencefalográfico (EEG) de crises epilépticas em ratos induzidos por epilepsia. Um rato com eletrodos implantados no hipocampo ventral é conectado ao sistema de registro de EEG e colocado em uma câmara de plexiglass. O rato pode se mover livremente enquanto a atividade cerebral é registrada para monitorar a ocorrência de convulsões.

Registro eletroencefalográfico de crises epilépticas em ratos induzidos por epilepsia

Fonte: Soukupová, M., et al. Microdiálise de aminoácidos excitatórios durante registros de EEG em ratos em movimento livre. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a avaliação dos níveis de neurotransmissores excitatórios extracelulares em ratos com indução de epilepsia crônica. Após a implantação de uma sonda de microdiálise no cérebro e a confirmação da ausência de convulsões por meio de eletroencefalografia (EEG), o fluido extracelular é coletado para avaliar níveis elevados de...

Avaliação dos níveis de neurotransmissores excitatórios em ratos induzidos por epilepsia crônica

Fonte: Jang, S., et al, Convulsões eletroconvulsivas em ratos e fracionamento de seus hipocampos para examinar alterações induzidas por convulsões em proteínas de densidade pós-sinápticas. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a indução de uma convulsão eletroconvulsiva aguda (ECS) em um modelo de rato para estudar a neuroplasticidade induzida por convulsões. Os pesquisadores aplicam estimulação elétrica por meio de eletrodos de clipe de ouvido, desencadeando hiperexcitabilidade neuronal e...

Induzindo uma convulsão eletroconvulsiva aguda em um modelo de rato

Aqui demonstramos o uso de uma tecnologia de habilitação sem fio para eletroencefalograma (EEG) em modelos de roedores neonatais de doenças humanas. Com a telemetria, não há conexões onerosas, permitindo assim comportamentos naturais.

Monitorização EEG contínuo a longo prazo no pequeno roedor modelos de doença humana, utilizando o Sistema Epoch transmissor sem fio

Apreensão de electroconvulsive (ECS) é um modelo animal experimental de terapia eletroconvulsiva para depressão grave. ECS globalmente estimula a atividade no hipocampo, levando a sinaptogênese e plasticidade sináptica. Aqui, descrevemos os métodos para a indução de ECS em ratos e para fraccionamento subcelular de seu hipocampo para examinar alterações induzidas pelo ataque em proteínas sinápticas.

Eletroconvulsiva convulsões em ratos e fracionamento de seu hipocampo para examinar alterações induzidas pelo ataque em densidade pós-sináptica proteínas

Aqui, apresentamos um protocolo para gravar o cérebro e coração bio sinais nos ratos usando vídeo simultâneo, Eletroencefalografia (EEG) e eletrocardiograma (ECG). Descrevemos também métodos para analisar as gravações de EEG-ECG resultantes para convulsões, potência espectral de EEG, função cardíaca e variabilidade da frequência cardíaca.

Simultânea vídeo-EEG-ECG de monitoramento para identificar a disfunção Neurocardiac em modelos de Mouse de epilepsia

Apresentamos um protocolo ECG que é tecnicamente fácil, barato, rápido e acessível em ratos pequenos, e pode ser realizado com maior sensibilidade. Sugerimos este método como uma abordagem de triagem para estudar agentes farmacológicos, modificações genéticas e modelos de doenças em camundongos.

Gravações de eletrocardiograma em camundongos anestesiados usando chumbo II

Utilizando vídeo simultâneo EEG-ECG-oximetria-capnografia, desenvolvemos uma metodologia para avaliar a suscetibilidade de modelos de coelhos para desenvolver arritmias provocadas e convulsões. Este novo sistema de gravação estabelece uma plataforma para testar a eficácia e a segurança da terapêutica e pode capturar a complexa cascata de eventos multi-sistemas que culminam em morte súbita.

Monitoramento multissuso para identificação de convulsões, arritmias e apneia em coelhos conscientes contidos

Aqui apresentamos um protocolo passo-a-passo para uma abordagem semi-automatizada para analisar dados murinos de eletrocardiografia de longo prazo (ECG) para parâmetros básicos de ECG e arritmias comuns. Os dados são obtidos por transmissores de telemetria implantáveis em camundongos vivos e acordados e analisados usando o Ponemah e seus módulos de análise.

Analisando gravações de eletrocardiografia de longo prazo para detectar arritmias em camundongos

Aprenda a avaliar a função cardíaca elétrica e a suscetibilidade a arritmias ventriculares em ratos após crises epilépticas usando ECG e infusão de aconitina. Este método ajuda a prever riscos de morte súbita cardíaca.

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