Name: Morris Teste Maze Água para déficits de aprendizagem e memória em camundongos Alzheimer Disease Modelo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Aprenda a realizar o teste de Morris Water Maze para avaliar déficits de aprendizagem e memória em camundongos modelo de Alzheimer. Este método neurobiológico permite analisar latências de fuga e padrões de nado.

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Este trabalho foi financiado pelos Institutos Canadenses de Pesquisa em Saúde (CIHR), a Família Townsend, e Jack Brown e Família Alzheimer Research Foundation (para WAS). WS é o titular da Cátedra de Pesquisa do Canadá na Doença de Alzheimer. PL foi apoiado por uma Graham Alexander Bell Canada NSERC Bolsa de Pós-Graduação Prêmio de Pesquisa de Doutorado e um Michael Smith Fundação para a Saúde Studentship Graduate Research Senior.

1. Preparação <ol><li> Preparação de equipamento <ol><li> Obtenção de uma piscina circular com um diâmetro de 150 centímetros e uma profundidade de 50cm (Fig. 1). Se estiver usando ratos pretos, uma piscina de branco deve ser usado, se utilizando ratos brancos, uma piscina de preto deve ser usado. </li><li> Organizar a sala de tal forma que o animal a ser testado não pode ver o experimentador durante o teste. Isso pode ser feito com cortinas ou divisórias. </li><li> Coloque sinais de alto contraste espacial sobre o quarto, e / ou no interior da piscina em um local que seria acima da superfície da água. </li><li> Coloque uma plataforma de 10 centímetros de diâmetro na piscina - branco para uma piscina branco, plexiglass claras para uma piscina de preto. Encher a piscina com água até a plataforma é um centímetro acima da superfície da água. Deixe a água atingir a temperatura ambiente (22 ° C). Dependendo da temperatura da água isso pode demorar 1-3 dias, ou, alternativamente, a água quente pode ser adicionada para acelerar o equilíbrio. </li></ol></li><li> Preparação de software <ol><li> Calibrar a piscina no software de computador para que a câmera pode criar informações distância física com base em pixel informações. Dividir a piscina em 4 quadrantes. Especificar a zona de plataforma como uma zona variável, que pode mudar com cada tentativa. Criar 5 subzones plataforma - um em cada quadrante, e um no centro da piscina. Salvar a calibração e usá-lo para os dias de teste restante. (Veja Fig. exemplo. 2). </li><li> Definir o tempo de julgamento máximo de 60 seg. Se o mouse encontra a plataforma antes deste tempo, o programa de software para parar o teste quando a plataforma for encontrada. </li><li> Especificar o programa para começar a acompanhar automaticamente, quando o pesquisador sai a área de testes. Utilizar qualquer "reflexão minimização" as suas opções de pacote de software fornece. </li><li> Faixa de percurso, a latência de escape, eo tempo gasto em cada quadrante. </li></ol></li></ol> 2. Dia 1: Plataforma Visible <ol><li> Programa de computador <ol><li> Carregar a calibração piscina no software de rastreamento. </li><li> Criar cinco ensaios, com um intervalo inter-julgamento apropriado para a sua experiência. Programa a localização da plataforma e direção começando a discordar de cada tentativa. Ver Tabela 1 para um protocolo de exemplo. </li></ol></li><li> Procedimento de teste <ol><li> Transferir os ratos a partir de sua instalação para a sala de comportamento. Manter os ratos em uma área onde eles não podem ver a piscina ou de informações espaciais. Deixe-os ajustar ao novo ambiente por pelo menos 30 minutos antes do teste. </li><li> Colocar uma bandeira na plataforma para aumentar a sua visibilidade. </li><li> Para começar a testar, levante rato da gaiola casa pela base da cauda. Apoiar o mouse como você trazê-lo para a área de testes. Levantar o mouse pela base da cauda, ​​coloque delicadamente o mouse para dentro da água, de frente para a borda da piscina. Rapidamente deixar a área de testes. </li><li> Se o mouse encontra a plataforma antes do sec 60 cut-off, deixe o mouse para ficar na plataforma durante 5 segundos e depois retorná-lo à sua gaiola. Se o mouse não encontrar a plataforma, coloque o mouse sobre a plataforma e permitir que ele fique lá por 20 segundos antes de voltar para sua gaiola em casa. </li><li> Repita o procedimento para todos os ratos na trilha. Começam cada tentativa subsequente, com uma localização plataforma diferente e direção de partida, como você programou em seu software. </li><li> Quando o teste estiver completo, o retorno dos ratos para as suas instalações de habitação. Os ratos são secas fora e normotermia é assegurada antes de retornar à facilidade animal. </li><li> Em preparação para o dia seguinte, retire a bandeira da plataforma e adicionar água para a piscina para submergir a plataforma para um centímetro abaixo da superfície. </li></ol></li></ol> 3. Dias 2-5: plataforma escondida <ol><li> Programa de computador <ol><li> Carregar a calibração piscina no software de rastreamento. </li><li> Criar cinco ensaios, com um intervalo inter-julgamento apropriado para a sua experiência. Localização do programa a plataforma a permanecer na mesma posição em todos os ensaios e dias, mas tem a direção de partida são diferentes com cada ensaio, a cada dia. </li></ol></li><li> Procedimento de teste <ol><li> Para os ratos pretos, adicione atóxico, branco, pintura a têmpera em pó para a piscina e misture bem. Use bastante pintura de tal forma que a plataforma submersa não é visível a partir da superfície da água. Para ratos brancos, uma piscina de preto com água limpa e uma plataforma de plexiglass transparente deve ser usado. </li><li> Siga os passos 2.2.3 a 2.2.6. </li></ol></li></ol> 4. Dia 6: Trial Probe <ol><li> Programa de computador <ol><li> Carregar a calibração piscina no software de rastreamento. </li><li> Criar um julgamento sem zona de plataforma, e uma direção de partida. A direção de partida mais distante do quadrante plataforma utilizada em 2-5 dias é o preferido. Definir a duração trilha para 60 seg. </li></ol></li><li> Procedimento de teste <ol><li> Remova a plataforma da piscina. </li><li> Siga os passos 2.2.3 a 2.2.6. </li></ol></li></ol> 5. Análise de dados <ol><li> Para cada dia e cada rato média, os 5 estudos para dar um comprimento de caminho único e latência de escape para cada assunto de teste. Calcular o erro combinado de forma adequada. Para o dia 6, simplesmente recolher o comprimento do caminho, a latência de escape, eo tempo gasto no quadrante da plataforma para cada rato. </li><li> Se as diferenças existem entre os grupos no 1 º dia, é provavelmente um problema com a visão ao invés de aprendizado e memória. Apenas proceder com a análise se não houver diferenças são vistas no dia 1. </li><li> Compare as curvas de aprendizagem para os dias 05/02 usando estatísticas adequadas para o seu conjunto de dados. A curva mais íngreme aquisição representa mais rápido tarefa; uma menor curva representa um déficit na aquisição de tarefas. Os dados do dia 2 ao dia 5 são analisados ​​usando ANOWA. </li><li> Para o dia 6, compare o percentual de tempo gasto no quadrante da plataforma anteriormente aprendidas, usando estatísticas adequadas para o seu conjunto de dados. A maior porcentagem de tempo gasto no quadrante da plataforma é interpretado como um maior nível de retenção da memória. </li></ol> 6. Resultados representante Temos utilizado o teste de labirinto aquático de Morris para examinar o efeito da hipóxia sobre a patogênese da AD (7) e ácido valpróico (VPA) 's potencial farmacêutico para o tratamento AD (6) em camundongos transgênicos modelo AD. Figura 3 é o resultado representante relatamos em nosso estudo sobre o efeito VPA sobre déficits de memória no modelo do rato APP23 AD (6). No dia 1 (ensaios plataforma visível), não há diferença entre o VPA tratados e grupo controle na latência (Fig. 3A) e comprimento do caminho (Fig. 3A), indicando que ambos os grupos têm motor semelhante e as capacidades visual. A partir disso, assume os ratos são capazes de ver a plataforma sinalizadas e as pistas no ambiente circundante, e pode nadar aceitável. Para os dias 05/02 (Dia 1-4 de ensaios plataforma escondida), o exemplo mostra a diferença na latência de escape (Fig. 3C) e comprimento do caminho (Fig. 3D) entre os grupos, sugerindo que os ratos tratados VPA desempenho significativamente melhor do que os controles ao longo do tempo. A sonda resultados fuga no último dia (dia 6) mostram que o número de vezes que os ratos viajou para o terceiro quadrante, onde a plataforma escondida foi previamente colocado, foi significativamente maior com VPA tratamento comparado ao grupo controle (Fig. 3E). Estes dados indicam que o tratamento VPA melhora significativamente a déficits de memória presentes no APP23 camundongos. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Configuração de equipamentos para a Água dias Maze teste Morris visível plataforma. A piscina está protegido contra o experimentador usando divisores de quarto. Pistas espaciais estão localizados nas paredes, e talvez colocados no interior da piscina, acima da superfície da água, se desejar. A piscina está cheia com água limpa, com a plataforma situado 1cm acima da superfície. A bandeira foi colocada na plataforma para melhorar a visibilidade. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Captura de tela a partir do Qualquer Maze-Tracking System ™ Video demonstrando calibração piscina. A piscina é visto de cima por uma câmera de monitoramento analógico a preto e branco com uma Digitizer RTV24. Várias zonas são definidas dentro do software e do pool total é dividido em quatro quadrantes. Um quinto, zona plataforma está inserida, que pode variar entre ensaios, com cinco localizações possíveis: NW, NE, SW, SE, ou Centro. Uma linha de calibração (linha assinalada através do centro) é adicionado para permitir que o software para converter distâncias pixel em distâncias físicas. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Resultados representativos para o labirinto aquático de Morris. O 7 meses APP23 camundongos transgênicos suporte humano sueco gene mutante APP foram testados após um mês de diária VPA (n = 30 ratos) ou solução veículo (n = 30 ratos) injeções. (A) Durante o primeiro dia de testes da plataforma visível, o VPA tratados e controle APP23 camundongos apresentaram uma latência semelhante ao escapar para a plataforma visível. P&gt; 0,05 por aluno t-teste. (B) O VPA-tratados e controle APP23 ratos tiveram semelhante distâncias de natação, antes de fugir para a plataforma visível no teste de plataforma visível. P&gt; 0,05 por aluno t-teste. (C) Em testes plataforma escondida, VPA tratados APP23 ratos mostraram um menor latência para escapar para a plataforma escondida no 3 º e 4 º dia, P &lt;0,001 por ANOVA. (D) A VPA-tratados APP23 ratos tiveram um comprimento menor de natação, antes de fugir para a plataforma escondida no 3 º e 4 º dia, P &lt;0,01 por ANOVA. (E) No julgamento da sonda no dia 6, o VPA-tratados APP23 ratos viajou no terceiro quadrante, onde a plataforma escondida foi previamente colocado, significativamente mais vezes do que os controles. * P &lt;; 0,005 por aluno t-teste. (Adaptado e reproduzido a partir de The Journal of Experimental Medicine 205, 2781-2789, 2008, Rockefeller University Press, Originalmente publicado em Exp Med J. doi:... 10.1084/jem.20081588) (6). <table border="1"><tbody><tr><td> </td><td colspan="2"> 1 dia </td><td> Dia 2 </td><td> Dia 3 </td><td> Dia 4 </td><td> Dia 5 </td><td> 6 º dia </td></tr><tr><td></td><td> Localização da plataforma </td><td> Direção de partida </td><td colspan="4"> Localização da plataforma: SW Começando Localização da seguinte forma: </td><td> Nenhuma plataforma. </td></tr><tr><td> Ensaio 1 </td><td> SW </td><td> S </td><td> W </td><td> N </td><td> N </td><td> E </td><td> N </td></tr><tr><td> Ensaio 2 </td><td> NW </td><td> N </td><td> S </td><td> W </td><td> E </td><td> S </td><td></td></tr><tr><td> Experimento 3 </td><td> NE </td><td> S </td><td> N </td><td> E </td><td> W </td><td> W </td><td></td></tr><tr><td> O ensaio 4 </td><td> Centro </td><td> E </td><td> E </td><td> W </td><td> S </td><td> E </td><td></td></tr><tr><td> Julgamento 5 </td><td> SE </td><td> W </td><td> S </td><td> S </td><td> N </td><td> N </td><td></td></tr></tbody></table> Tabela 1. Amostra de água * protocolo labirinto * Observe como tanto a posição da plataforma e começar mudar de direção no dia 1, enquanto que nos dias 05/02 a posição da plataforma permanece constante, enquanto as mudanças de direcção partida. No dia 6, não existe uma plataforma e um único ensaio. A direção de partida para o dia 6 está mais distante do local da plataforma anterior (SW), para que os ratos devem viajar a alguma distância antes de entrar no quadrante da plataforma previamente aprendido.

<ol><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+localization+does+not+require+the+presence+of+local+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Motivation%22%5BJournal%5D)">Spatial localization does not require the presence of local cues.</a> Learning and Motivation. 12, 239-260 (1981).</li>
<li>O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+hippocampal+place+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A review of the hippocampal place cells.</a> Prog Neurobiol. 13, 419-439 (1979).</li>
<li>Scoville, W. B., Milner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+recent+memory+after+bilateral+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 20, 11-21 (1957).</li>
<li>Eichenbaum, H., Stewart, C., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+representation+in+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal representation in place learning.</a> J Neurosci. 10, 3531-3542 (1990).</li>
<li>Block, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+ischemia+and+behavioural+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Global ischemia and behavioural deficits.</a> Progress in Neurobiology. 58, 279-295 (1999).</li>
<li>Qing, H., He, G., Ly, P. T., Fox, C. J., Staufenbiel, M., Cai, F., Zhang, Z., Wei, S., Sun, X., Chen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valproic+acid+inhibits+Abeta+production%2C+neuritic+plaque+formation%2C+and+behavioral+deficits+in+Alzheimer%27s+disease+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Valproic acid inhibits Abeta production, neuritic plaque formation, and behavioral deficits in Alzheimer's disease mouse models.</a> J Exp Med. 205, 2781-2789 (2008).</li>
<li>Sun, X., He, G., Qing, H., Zhou, W., Dobie, F., Cai, F., Staufenbiel, M., Huang, L. E., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+facilitates+Alzheimer%27s+disease+pathogenesis+by+up-regulating+BACE1+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxia facilitates Alzheimer's disease pathogenesis by up-regulating BACE1 gene expression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , 18727-18732 (2006).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of memory and learning.</a> Int J Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Lipp, H. P., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+and+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice and cognition.</a> Curr Opin Neurobiol. 8, 272-280 (1998).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural Plast. 6, 41-52 (1998).</li>
</ol>

Todos os experimentos foram conduzidos de acordo com o The University of British Columbia Animal Care e da comissão Use e diretrizes CIHR.

Idade, sexo, espécie e diferenças tensão influenciar o desempenho MWM (8). Estudos indicam que os ratos idosos têm um desempenho ruim na MWM, enquanto roedores machos têm melhor desempenho que as fêmeas, além disso, flutuante é mais pronunciada em ratos do que os ratos (9, 10). Portanto, esses elementos devem ser equiparados em todos os testes. Evidência também sugere que animais estressados ​​desempenho mais fraco no MWM (11), fatores ambientais, portanto, o que pode causar estresse, tais como temperatura, luz e ruído, deve ser monitorado e mantido constante ao longo da tarefa.

<table border="1"><tbody><tr><th> Nome do reagente </th><th> Companhia </th><th> Comentários (opcional) </th></tr><tr><td> AnyMaze Sistema de Rastreamento de Vídeo </td><td> Empresa Stoelting </td><td></td></tr><tr><td> Tinta Tempera </td><td> Grupos Reeves &amp; Poole </td><td> Branca, em pó </td></tr></tbody></table>

morris teste maze Água para déficits de aprendizagem e memória em camundongos alzheimer disease modelo

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

O labirinto aquático de Morris (MWM) foi estabelecido pela primeira vez pelo neurocientista Richard G. Morris, em 1981, a fim de testar hipocampo-dependente de aprendizagem, incluindo a aquisição de espaço de memória a longo prazo memoryand espacial 1. O MWM é um procedimento relativamente simples que consiste normalmente de seis ensaios dia, a principal vantagem é a diferenciação entre o espacial (plataforma escondida) e não-espaciais (visível plataforma) condições 2-4. Além disso, o ambiente de teste MWM reduz a interferência odor trilha 5. Isto levou a tarefa a ser amplamente utilizado no estudo da neurobiologia e neurofarmacologia da aprendizagem espacial ea memória. A MWM tem um papel importante na validação de modelos de roedores para transtornos neurocognitivos, como a Doença de Alzheimer 6, 7. Neste protocolo, discutimos o procedimento típico da MWM para o aprendizado e memória teste e análise de dados comumente usados ​​na doença de Alzheimer camundongos transgênicos modelo.

O labirinto aquático de Morris é uma tarefa comportamental para testar hipocampo-dependente aprendizagem e memória. Tem sido amplamente utilizada no estudo da neurobiologia, neurofarmacologia e distúrbios cognitivos em modelos de roedores.

Morris Teste Maze Água para déficits de aprendizagem e memória em camundongos Alzheimer Disease Modelo

O Labirinto Aquático de Morris (MWM) foi estabelecido primeiramente pelo neurocientista Richard G. Morris em 1981, a fim de testar o aprendizado dependente do hipocampo, incluindo...

O objetivo geral do experimento a seguir é testar a aprendizagem e a memória dependentes do hipocampo. No primeiro dia, o camundongo é treinado para encontrar uma plataforma elevada com bandeira, posicionada aleatoriamente em uma piscina com água clara, permitindo que o animal aprenda que a tarefa possui um ponto final escapável. Como segundo passo, o camundongo é treinado em dias subsequentes sendo liberado em uma piscina com água opaca a partir de diferentes posições, com a plataforma submersa e fixa em um local determinado.Isso permite que o camundongo aprenda a localização da plataforma utilizando as pistas ao redor. Em seguida, a plataforma é removida no dia final e o padrão de natação do camundongo é rastreado por um minuto para avaliar a aquisição da tarefa. Assim, são obtidos os resultados de aprendizado e memória.Esses apresentam prejuízos na aprendizagem espacial e na memória com base nas latências de escape e no comprimento do percurso observados nas três condições experimentais diferentes. A principal vantagem desta técnica em relação aos métodos existentes é que é relativamente simples diferenciar entre as condições de plataforma oculta especial e de plataforma visível não especial. Geralmente, pessoas novas neste método podem ter dificuldades, pois ele é sensível ao manuseio experimental.Você deve garantir que os camundongos não fiquem estressados durante os procedimentos, pois isso poderia afetar os resultados. Demonstrar este procedimento serão as respirações da Srta. Kelly Bromley e das alunas de pós-graduação da Suécia dos meus laboratórios. Primeiro, fixe uma piscina circular. Se os camundongos experimentais forem pretos, use uma piscina branca; se os camundongos forem brancos, use uma piscina preta. Agora.Organize a sala com divisórias de modo que os animais em teste não vejam o experimentador durante a realização do teste. Coloque pistas espaciais de alto contraste ao redor da sala e no interior da piscina em uma localização que permanecerá acima da superfície da água. Encha a piscina com água e deixe equilibrar à temperatura ambiente.Em seguida, coloque uma plataforma com diâmetro de 10 centímetros na piscina, a um centímetro acima da superfície da água, branca para uma piscina branca ou em plexiglás transparente para uma piscina preta. Calibre a piscina no software do computador para que a câmera possa gerar informações de distância física a partir de dados baseados em pixels.Divida o tanque em quatro quadrantes. Especifique a zona da plataforma como uma zona variável, que pode mudar em cada ensaio. Em seguida, crie cinco subzonas da plataforma, uma em cada quadrante e uma no centro do tanque.Salve a calibração e utilize-a nos dias de teste restantes. Em seguida, defina o tempo máximo do ensaio como 60 segundos. Se o camundongo encontrar a plataforma antes desse tempo, programe o software para encerrar o ensaio quando a plataforma for encontrada.Além disso, especifique o programa para iniciar automaticamente o rastreamento quando o experimentador sair da área de teste. Utilize quaisquer opções de minimização de reflexos fornecidas pelo pacote de software. Por fim, rastreie o percurso, o comprimento, a fuga, a latência e o tempo gasto em cada quadrante.No dia do teste, transfira os camundongos do local de alojamento para a sala de comportamento, em uma área onde eles não possam ver a piscina ou as pistas espaciais. Deixe-os se adaptar ao novo ambiente por pelo menos 30 minutos. Antes do teste, carregue a calibração da piscina no software de rastreamento.Crie cinco ensaios com um intervalo interensaio apropriado, variando a localização da plataforma e a direção inicial em cada ensaio. Coloque uma bandeira sobre a plataforma para aumentar sua visibilidade. Para iniciar o teste, levante o camundongo da gaiola de origem pela base da cauda, sustentando-o durante a transferência para a área de teste.Em seguida, coloque suavemente o camundongo na água com a cabeça voltada para a borda da piscina. Saia rapidamente da área de teste. Se o camundongo encontrar a plataforma antes do limite de 62 segundos, permita que ele permaneça sobre a plataforma por cinco segundos, depois devolva-o à sua gaiola de origem.Se o camundongo não encontrar a plataforma, coloque-o sobre a plataforma e permita que permaneça lá por 20 segundos antes de devolvê-lo à sua gaiola de origem. Repita o procedimento para todos os camundongos no ensaio. Inicie cada ensaio subsequente com uma localização diferente da plataforma e direção inicial, conforme indicado pelo software do programa.Quando os testes estiverem concluídos, devolva os camundongos à sua instalação de alojamento em preparação para o dia seguinte. Remova a bandeira da plataforma e adicione água adicional à piscina para submergir a plataforma a um centímetro abaixo da superfície. Carregue a calibração da piscina no software de rastreamento e crie cinco ensaios com um intervalo interensaio apropriado.Em seguida, programe a localização da plataforma para permanecer na mesma posição durante todos os ensaios e dias, mas faça com que a direção inicial varie a cada ensaio de cada dia. Para camundongos pretos, adicione tinta em pó branca atóxica de temperatura ambiente à piscina e misture bem. Utilize quantidade suficiente de tinta para que a plataforma submersa não seja visível a partir da superfície da água.Prossiga para testar individualmente os camundongos na água conforme descrito anteriormente para o ensaio de sonda final. Carregue a calibração da piscina no software de rastreamento. Crie um ensaio sem zona de plataforma e com uma direção de partida.De preferência, a direção inicial mais distante do quadrante onde a plataforma foi colocada nos dias dois a cinco. Também defina a duração do trajeto como 60 segundos. Agora, remova a plataforma da piscina e teste camundongos individuais na água conforme descrito anteriormente; para cada dia e cada camundongo, calcule a média das cinco tentativas para obter um único comprimento de trajeto e latência de escape para cada animal experimental.Além disso, analise e interprete os dados conforme detalhado no manuscrito acompanhante utilizando o labirinto aquático de Morris. Camundongos transgênicos PP 23 de sete meses portadores do gene A PP humano com mutação sueca foram testados após um mês de injeções diárias de ácido valpróico ou solução veicular durante o primeiro dia dos testes com plataforma visível. Os camundongos PP 23 tratados com VPA e os controles exibiram uma latência semelhante para escapar para a plataforma visível.Os camundongos A PP 23 tratados com VPA e os controles percorreram distâncias semelhantes nadando antes de escapar para a plataforma visível. No teste da plataforma visível e nos testes com plataforma oculta no terceiro e quarto dia, os camundongos A PP 23 tratados com VPA apresentaram uma latência menor para escapar para a plataforma oculta. No terceiro e quarto dia, os camundongos A PP 23 tratados com VPA percorreram uma distância menor nadando antes de escapar para a plataforma oculta.No teste de sonda no sexto dia, em compara&ccedil;&atilde;o com os camundongos controle, os camundongos tratados com VPA da linhagem PP 23 percorreram significativamente mais vezes o terceiro quadrante, onde a plataforma oculta havia sido previamente posicionada. Embora seja importante lembrar, ao tentar este procedimento, monitorar os fatores ambientais que possam causar estresse, como ru&iacute;do, temperatura e luz. Ap&oacute;s este procedimento, outros m&eacute;todos, como o condicionamento aversivo cued e contextual, podem ser realizados para responder perguntas adicionais, como saber se os d&eacute;ficits de aprendizagem s&atilde;o espec&iacute;ficos ao hipocampo ou se fazem parte de um problema neurocognitivo mais amplo, que pode incluir a am&iacute;gdala.

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Neurociência

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Diminui quantificar cognitivos causados ​​pela radioterapia craniana

Neste vídeo, descrevemos o teste do labirinto aquático de Morris com realocação de plataforma, uma tarefa de navegação usada para estudar a memória de trabalho em roedores.

O labirinto aquático com realocação de plataforma: um método para avaliar a memória de trabalho

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Aqui, um protocolo para realizar os testes de labirinto de água Morris para avaliar a capacidade de aprendizagem e memória de ratos modelo da doença de Alzheimer e para avaliar o efeito da acupuntura manual para tratá-los é descrito.

Análise da capacidade de aprendizagem e memória em um modelo de rato da doença de Alzheimer usando o Labirinto de Água Morris

Nós apresentamos um método de baixo custo para projetar e construir uma luz headstage sistema de pré-amplificador com a gravação simultânea e capacidade neural estimulação. Este dispositivo pode ser impermeabilizado para uso em animais de natação.

Concepção e Construção de um Headstage Custo Efetivo de Estimulação Neural Simultânea e Gravação no labirinto aquático

Aprenda a realizar o teste de Morris Water Maze para avaliar déficits de aprendizagem e memória em camundongos modelo de Alzheimer. Este método neurobiológico permite analisar latências de fuga e padrões de nado.

Morris Teste Maze Água para déficits de aprendizagem e memória em camundongos Alzheimer Disease Modelo

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