0 visualizações • 3:21 min. • July 8th, 2025
Os vasos linfáticos estão presentes na derme da pele e sua função é remover o excesso de líquido intersticial do tecido. Danos aos vasos linfáticos causam acúmulo excessivo de líquido no espaço intersticial e aumento da deposição subcutânea de tecido fibroso e adiposo. Essas alterações resultam em linfedema.
Para gerar linfedema na cauda murina, pegue um camundongo anestesiado e coloque-o em decúbito ventral. Faça uma excisão de pele circunferencial de espessura total em um local adequadamente distante, distal à base da cauda. Incise outro local na cauda inferior ao primeiro corte.
Faça uma incisão vertical na pele conectando as duas incisões pré-fabricadas. Usando este corte, excise o adesivo de pele sobreposto para expor as veias laterais e os vasos linfáticos.
Pegue uma seringa contendo corante de rastreamento colorido e injete-a por via subcutânea perto do final da cauda, fazendo com que os vasos linfáticos pareçam azuis. Tranecte os vasos linfáticos, envolva o local da ferida e monitore o camundongo pelo tempo desejado.
A microdissecção interrompe o fluxo de linfa nos vasos e o fluido se acumula no espaço do tecido. Consequentemente, o linfedema sustentado é observado como inchaço da cauda do camundongo dorsal ao local da cirurgia.
Para começar, posicione o camundongo sedado de 8 semanas esternalmente e prepare a cauda com álcool isopropílico a 70%. Use um paquímetro para medir o diâmetro da cauda em incrementos de 5 milímetros a partir de 20 milímetros da base da cauda. Marque uma incisão circunferencial de 3 milímetros na cauda a 20 milímetros da base.
Sob ampliação microscópica cirúrgica, realize uma excisão meticulosa de pele de espessura total de 3 milímetros, deixando toda a vasculatura subjacente intacta. Incisar uma marca circunferencial superior, primeiro através da derme, seguida por uma incisão circunferencial de espessura total 3 milímetros distal à primeira incisão. Faça uma incisão vertical perpendicular de espessura total para conectar as duas incisões e, em seguida, use um captador fino dentado para segurar uma borda de ataque e dissecar profundamente dentro do plano avascular até a derme e superficial até a adventícia da veia, com microtesoura.
Injete 0,1 mililitro de azul de isosulfan a 1% por via subcutânea proximal à ponta da cauda. Identifique os dois canais linfáticos que aparecem em azul devido à injeção, adjacentes às veias laterais da cauda. Passe os linfáticos cuidadosamente, dissecando um plano entre a veia lateral e a linfática com uma tesoura microcirúrgica reta. Passe a ponta de uma lâmina de tesoura entre o vaso linfático e a veia lateral e feche as lâminas para transeccionar o vaso linfático. Quando terminar, cubra a ferida da cauda com um curativo transparente aderente estéril.